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1、
專題1 1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具
課前預(yù)習(xí)學(xué)案
一、 預(yù)習(xí)目標(biāo)
簡(jiǎn)述DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具。
二、 預(yù)習(xí)內(nèi)容
1、 基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過(guò)______________和_______等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在__________水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做______________。
2、 培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的操作過(guò)程至少需要三種工具,即_________________的“手術(shù)刀”、_______________________的“
2、縫合針”、將體外重組好的DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的“_________”。
3、 切割DNA的工具是________________,又稱______。這類酶主要是從________中分離純化而來(lái)的。它們能夠________________________________________,并且使每一條鏈中特定部位的_________________的____________斷開。DNA分子經(jīng)過(guò)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式——________和______。
4、 將切割下來(lái)的DNA片段拼接成新的DNA分子,是靠____________來(lái)完成的。根據(jù)酶的來(lái)源不同,可以將這些酶分為兩
3、類:一類是從________中分離得到的,稱為E·coliDNA連接酶;另一類是從T4噬菌體中分離出來(lái)的,稱為_____________。這兩類酶都可以恢復(fù)被限制酶切開了的____________________________。
5、 質(zhì)粒是一種裸露的、________、獨(dú)立于細(xì)菌染色體(即擬核DNA)之外,并具有_________________的_______________分子。它有一個(gè)至多個(gè)______________,供外源DNA片段插入其中。攜帶外源DNA的質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后,停留在細(xì)胞中進(jìn)行________,或者整合到染色體DNA上,隨染色體DNA____________。它
4、還有特殊的____________,如抗四環(huán)素、氨芐青霉素等標(biāo)記基因,供重組DNA的__________。在基因工程中所使用的運(yùn)載體除質(zhì)粒外,還有_________________、___________等。
三、提出疑惑
同學(xué)們,通過(guò)你的自主學(xué)習(xí),你還有哪些疑惑,請(qǐng)把它填在下面的表格中
疑惑點(diǎn)
疑惑內(nèi)容
課內(nèi)探究學(xué)案
一、 學(xué)習(xí)目標(biāo)及重難點(diǎn)
1、簡(jiǎn)述DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具。
2、認(rèn)同基因工程的誕生和發(fā)展離不開理論研究和技術(shù)創(chuàng)新。
學(xué)習(xí)重點(diǎn):DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具的作用。
學(xué)習(xí)難點(diǎn):基因工程載體需要具備的條件。
二、 學(xué)習(xí)過(guò)程
5、
1、 基因工程的概念
回答:什么是基因工程?
2、科技探索之路(基因工程是如何發(fā)展起來(lái)的?閱讀課本P2—3頁(yè))
思考并回答:
(1) 基因工程是在哪些學(xué)科的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的?
(2) 哪些基礎(chǔ)理論的突破催生了基因工程?
(3) 哪些技術(shù)發(fā)明促進(jìn)了基因工程的實(shí)施?
(4) 你覺得,基因工程的誕生和發(fā)展能否離不開理論研究和技術(shù)創(chuàng)新?
3、 限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”
思考并回答:
(1) 從噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)來(lái)看,細(xì)菌等單細(xì)胞原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,那么這類原核生物之所以長(zhǎng)期進(jìn)化而不絕滅,有什么保護(hù)機(jī)制?由此可知,限制酶可以從哪些生物中分離
6、出來(lái)?
(2)限制酶是如何切割DNA分子的?
(3) 參考課本P4圖1—2,指出限制酶能破壞那個(gè)磷酸二酯鍵。
(4)以EcoRI為例,畫出限制酶切割后形成的末端。
4、 DNA連接酶——“分子縫合針”
思考并回答:
(1)DNA連接酶是怎么分類的?
(2) DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事兒?jiǎn)幔坑心男﹨^(qū)別?
(3)E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶作用效果一樣大嗎?為什么?
5、 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”
思考并回答:
(1)載體的作用是什么?為什么需要載體?把單獨(dú)的DNA片段導(dǎo)入受體細(xì)胞不行嗎?
(2)我們選用從霍亂
7、弧菌中分離出來(lái)的質(zhì)粒做載體,可以嗎?為什么?
(3)我們能不能用肉眼直接觀察到載體進(jìn)入受體細(xì)胞?那如何鑒定呢?
(4)如果載體上沒有限制酶切割位點(diǎn),能否把目的基因運(yùn)輸進(jìn)入受體細(xì)胞?
6、 活動(dòng):模擬操作重組DNA分子
(分組進(jìn)行;完成后小組之間進(jìn)行交流)
三、 反思總結(jié)
工具名稱
種類
作用
限制酶
DNA連接酶
載體
四、 當(dāng)堂檢測(cè)
1、下圖是基因工程主要技術(shù)環(huán)節(jié)的一個(gè)基本步驟,這一步需用到的工具是 ( )
A.DNA連接酶和解旋酶 B.
8、DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶
C.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 D.DNA聚合酶和RNA聚合酶
2、依右圖有關(guān)基因工程的工具酶功能的敘述,不正確的是 ( )
A.切斷a處的酶為限制性核酸內(nèi)切酶
B.連接a處的酶為DNA連接酶
C.切斷b處的酶為解旋酶
D.切斷b處的酶為限制性核酸內(nèi)切酶
3、以下說(shuō)法正確的是 ( )
A.所有的限制酶只能識(shí)別同一種特定
9、的核苷酸序列
B.質(zhì)粒是基因工程中惟一的載體
C.載體必備的條件之一是:具有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便與外源基因連接
D.基因治療主要是對(duì)有缺陷的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)
4、不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是 ( )
A.能復(fù)制 B.有多個(gè)限制酶切點(diǎn)
C.具有標(biāo)記基因 D.它是環(huán)狀DNA
5、科學(xué)家選用的細(xì)菌質(zhì)粒往往帶有一個(gè)抗菌素抗性基因,該抗性基因的主要作用是
10、 ( )
A.提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐熱性 B.有利于檢測(cè)目的基因否導(dǎo)入受體細(xì)胞
C.增加質(zhì)粒分子的相對(duì)分子質(zhì)量 D.便于與外源基因連接
課后練習(xí)與提高
1、限制酶是一種核酸切割酶,可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨識(shí)序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合?其正確的末端互補(bǔ)序列為何?
11、 ( )
A. BamHI和EcoRI;末端互補(bǔ)序列—AATT—
B. BamHI和HindⅢ;末端互補(bǔ)序列—GATC—
C. EcoRI和HindⅢ;末端互補(bǔ)序列—AATT—
D. BamHI和BglII;末端互補(bǔ)序列—GATC—
2、在基因工程中,把選出的目的基因(共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì),其中腺嘌呤脫氧核苷酸460 個(gè)),放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代,那么,在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是
12、 ( )
A.540 個(gè) B.7560個(gè) C.8100 個(gè) D.17280 個(gè)
3、基因工程是DNA分子水平的操作,下列有關(guān)基因工程的敘述中,錯(cuò)誤的是 ( )
A、限制酶只用于切割獲取目的基因
B、載體與目的基因必須用同一種限制酶處理
C、基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA連接酶
D、帶有目的基因的載體是否進(jìn)入受體細(xì)胞需檢測(cè)
4、下列關(guān)于DNA連接酶的敘述中,正確的是 ( )
A. DNA連接酶連接的是兩條鏈堿
13、基對(duì)之間的氫鍵
B. DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖
C. DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和核糖
D. 同一種DNA連接酶可以切出不同的黏性末端
5、與“限制性內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是: ( )
A.反轉(zhuǎn)錄酶??????? B.RNA聚合酶???????? C.DNA連接酶????? D.解旋酶
6、下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述,正確的是 ( )
A.質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器
14、
B.質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子
C.質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后才能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制
D.細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過(guò)程一定是在宿主細(xì)胞外獨(dú)立進(jìn)行的
7、關(guān)于右圖DNA分子片段的說(shuō)法正確的是 ( )
①
G
C
A
T
A
T
G
C
A
T
A
T
15N
14N
②
③
…
…
…
…
…
A.限制性內(nèi)切酶可作用于①部位,解旋酶作用于③部位
B.②處的堿基缺失導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)的變異
C.把此DNA放在含15N的培養(yǎng)液中復(fù)
制2代,子代中含15N的DNA
15、占3/4
D.該DNA的特異性表現(xiàn)在堿基種類和(A+T)/(G+C)的比例上
8、下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是: ( )
A.DNA連接酶的作用是將兩個(gè)黏性末端的堿基連接起來(lái)
B.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,受體細(xì)胞即發(fā)生基因突變
C.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合的過(guò)程發(fā)生在細(xì)胞外
D.常使用的運(yùn)載體有大腸桿菌、噬菌體和動(dòng)植物病毒等
9、限制酶在DNA的任何部位都能將DNA切開嗎?以下是四種不同限制酶切割形成的DNA片段:
(1) …CTGCA??? (2) …AC??? (3) GC…
???
16、 …G??????????? …TG??????? CG…
(4)…G????? (5)??? ?G…? (6) …GC
????? …CTTAA???? ACGTC…????? …CG
(7) GT…?????? ? (8)AATTC…
???? CA…???????????? ? G…
請(qǐng)用DNA連接酶將它們連接起來(lái):
______和_____能連接成_________________________;
______和_____能連接成______________________
17、___;
______和_____能連接成_________________________;
______和_____能連接成_________________________。
10、下圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細(xì)胞干擾素的基本過(guò)程圖,據(jù)圖回答:
(1)①過(guò)程需要___________酶的參與。
(2)②物質(zhì)是從大腸桿菌分離出的_________________。其化學(xué)本質(zhì)是________________,它必須能在宿主細(xì)胞中__________________________。
(3)③過(guò)程表明目的基因_____________
_________________________________。
5