《屆高考高考生物一輪復(fù)習(xí) 專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（第四十四課時(shí)）課題13 微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)、分解纖維素的微生物的分離課件 新人教版選修》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《屆高考高考生物一輪復(fù)習(xí) 專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用（第四十四課時(shí)）課題13 微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)、分解纖維素的微生物的分離課件 新人教版選修（89頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、專題專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用第四十四課時(shí)課題第四十四課時(shí)課題13 微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)、微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)、 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)、 分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離1.微生物的分離和培養(yǎng)微生物的分離和培養(yǎng)2.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用3.利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物利用微生物進(jìn)行發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物【回扣教材回扣教材】 考點(diǎn)一培養(yǎng)基考點(diǎn)一培養(yǎng)基 1培養(yǎng)基的定義：人們按照微生物對(duì)培養(yǎng)基的定義：人們按照微生物對(duì) 的的不同需求，配制出供其不同需求，配制出供其 的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁

2、殖 2類型：培養(yǎng)基按照類型：培養(yǎng)基按照 可分為液體培養(yǎng)基可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑 后，后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，是實(shí)驗(yàn)室最常用的培養(yǎng)基之一。制成瓊脂固體培養(yǎng)基，是實(shí)驗(yàn)室最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成 的的 。物理性質(zhì)瓊脂肉眼可見(jiàn)菌落 3營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：各種培養(yǎng)基一般都含有水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：各種培養(yǎng)基一般都含有水、 _源、源、_源和無(wú)機(jī)鹽四種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。滿足微生物生長(zhǎng)還需源和無(wú)機(jī)鹽四種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。滿足微生物生長(zhǎng)還需要適宜的要適宜的_(培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的p

3、H調(diào)至酸性，調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至調(diào)至 或或 性性)、氧氣的要、氧氣的要求求(根據(jù)微生物的需求提供有氧或無(wú)氧環(huán)境根據(jù)微生物的需求提供有氧或無(wú)氧環(huán)境)、 物質(zhì)物質(zhì)(如培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中如培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加添加 等等)。碳氮中性微堿特殊營(yíng)養(yǎng)維生素pH 這種新型抗生素對(duì)細(xì)這種新型抗生素對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)無(wú)影響；或這種新型抗生素對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)有抑菌生長(zhǎng)無(wú)影響；或這種新型抗生素對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)有抑制作用制作用蛋白胨和酵母提取物蛋白胨和酵母提取物bedca 殺死活殺死活的微生物的微生物殺死殺死24小時(shí)中由細(xì)菌芽孢萌發(fā)而生長(zhǎng)的微生物小時(shí)中由細(xì)菌芽孢萌發(fā)而生長(zhǎng)的微生物 將培養(yǎng)

4、基在將培養(yǎng)基在37 下放置下放置35天天,如果無(wú)微生物生長(zhǎng)如果無(wú)微生物生長(zhǎng),則證明培養(yǎng)基已達(dá)則證明培養(yǎng)基已達(dá)到滅菌效果到滅菌效果 將圓片在不添加任何抗生素的無(wú)菌水中浸泡一段將圓片在不添加任何抗生素的無(wú)菌水中浸泡一段時(shí)間時(shí)間平板劃線或稀釋涂布平板平板劃線或稀釋涂布平板不能轉(zhuǎn)動(dòng)絨布不能轉(zhuǎn)動(dòng)絨布見(jiàn)下圖見(jiàn)下圖考點(diǎn)二無(wú)菌技術(shù)考點(diǎn)二無(wú)菌技術(shù)【回扣教材回扣教材】獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)_的入侵，要的入侵，要注意以下幾個(gè)方面：注意以下幾個(gè)方面：(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的_、操作者的、操作者的_和和_進(jìn)進(jìn)行行_和和_。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器將用

5、于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行具進(jìn)行_。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，_應(yīng)應(yīng)在酒精燈在酒精燈_進(jìn)行。進(jìn)行。(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免_處理的材料用具與處理的材料用具與_的物品相接觸。的物品相接觸。雜菌雜菌空間空間衣著衣著手手清潔清潔消毒消毒滅菌滅菌實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作火焰附近火焰附近已經(jīng)滅菌已經(jīng)滅菌周圍周圍B考點(diǎn)三純化大腸桿菌以及菌種的考點(diǎn)三純化大腸桿菌以及菌種的保藏保藏【回扣教材回扣教材】1制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)方法步驟：方法步驟：_、稱量、溶化、稱量、溶化、_、_。(2)倒平板操作的步驟：倒平板

6、操作的步驟：計(jì)算計(jì)算滅菌滅菌倒平板倒平板將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在_的桌面上，右手的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶，將右手拿錐形瓶，將_迅速通過(guò)火焰。迅速通過(guò)火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約約1020 mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板等待平板_，大約需，大約需510 min。然后，。然后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。將

7、平板倒過(guò)來(lái)放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。火焰旁火焰旁瓶口瓶口冷卻凝固冷卻凝固2純化大腸桿菌純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法最常用的是微生物接種的方法最常用的是_法和法和_法。法。(2)平板劃線法是通過(guò)平板劃線法是通過(guò)_在瓊脂固體培養(yǎng)基表面在瓊脂固體培養(yǎng)基表面_的操作。的操作。(3)稀釋涂布平板法是將稀釋涂布平板法是將_進(jìn)行一系列的進(jìn)行一系列的_稀 釋 ， 然 后 將 不 同 稀 釋 度 的 菌 液 分 別 涂 布 到稀 釋 ， 然 后 將 不 同 稀 釋 度 的 菌 液 分 別 涂 布 到_ _ _ _ _ _ _ _ _ 培 養(yǎng) 基 的 表 面 ， 進(jìn) 行 培 養(yǎng) 。 分 為培 養(yǎng) 基

8、的 表 面 ， 進(jìn) 行 培 養(yǎng) 。 分 為_(kāi)和和_兩步。兩步。(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物聚集在一起的微生物_成單個(gè)成單個(gè)_，從而能，從而能在培養(yǎng)基在培養(yǎng)基_形成單個(gè)的形成單個(gè)的_。平板劃線平板劃線稀釋涂布平板稀釋涂布平板接種環(huán)接種環(huán)連續(xù)劃線連續(xù)劃線菌液菌液梯度梯度瓊脂固體瓊脂固體系列稀釋操作系列稀釋操作涂布平板操作涂布平板操作分散分散細(xì)胞細(xì)胞表面表面菌落菌落 (5)平板劃線法操作步驟：平板劃線法操作步驟：將接種環(huán)放在火焰上將接種環(huán)放在火焰上_，直到接種環(huán)，直到接種環(huán)_。在火焰旁在火焰旁_接種環(huán)，并打開(kāi)盛有菌液

9、的試管的接種環(huán)，并打開(kāi)盛有菌液的試管的棉塞。棉塞。將將_通過(guò)火焰。通過(guò)火焰。將將_的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將將_通過(guò)火焰，并塞上棉塞。通過(guò)火焰，并塞上棉塞。灼燒灼燒燒紅燒紅冷卻冷卻試管口試管口已冷卻已冷卻試管口試管口左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，右手將沾有菌種的接種左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條_，蓋上皿，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠粕w。注意不要?jiǎng)澠芲。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的_開(kāi)始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在開(kāi)始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)

10、以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意_將最后一區(qū)的將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。劃線與第一區(qū)相連。將平板將平板_放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。平行線平行線培養(yǎng)基培養(yǎng)基 末端末端不要不要倒置倒置 (6)涂布平板操作的步驟：涂布平板操作的步驟：將將_浸在盛有酒精的燒杯中。浸在盛有酒精的燒杯中。取取_菌液菌液(不超過(guò)不超過(guò)0.1 mL)，滴加到培養(yǎng)基表面。，滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上將沾有少量酒精的涂布器在火焰上_，待酒，待酒精精_后，后，_810 s。用涂布器將菌液用涂布器將菌液_地涂布在培養(yǎng)基表面。地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布器涂布器少量少量引

11、燃引燃燃盡燃盡冷卻冷卻均勻均勻3菌種的保存菌種的保存(1)對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用_保藏的方法。保藏的方法。臨時(shí)保藏方法臨時(shí)保藏方法將菌種接種到試管的固體將菌種接種到試管的固體_上，在上，在_的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長(zhǎng)成后，將試管放入的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長(zhǎng)成后，將試管放入_的的冰箱中保藏。以后每冰箱中保藏。以后每_個(gè)月，都要重新將菌種個(gè)月，都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上從舊的培養(yǎng)基上_到新鮮的培養(yǎng)基上。到新鮮的培養(yǎng)基上。缺點(diǎn)：這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易缺點(diǎn)：這種方法保存的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易_或產(chǎn)生或產(chǎn)生_。 臨時(shí)臨時(shí)斜面培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基合適合適436轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移被污

12、染被污染變異變異(2)對(duì)于需要對(duì)于需要_保存的菌種，可以采用保存的菌種，可以采用_管管藏的方法。藏的方法。在在3 mL的甘油瓶中，裝入的甘油瓶中，裝入1 mL甘油后甘油后_。將。將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在放在_的冷凍箱中保存。的冷凍箱中保存。長(zhǎng)期長(zhǎng)期甘油甘油滅菌滅菌20D1.17108多多不能不能 因?yàn)椴荒芘懦s菌來(lái)自因?yàn)椴荒芘懦s菌來(lái)自培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程培養(yǎng)基或來(lái)自培養(yǎng)過(guò)程 每次劃線每次劃線前要灼燒前要灼燒冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始劃冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始劃首尾區(qū)不重疊首尾區(qū)不重疊B考點(diǎn)四篩選菌株、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目

13、、考點(diǎn)四篩選菌株、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目、設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照【回扣教材回扣教材】1篩選菌株篩選菌株(1)自然界篩選：自然界篩選：實(shí) 例 ：實(shí) 例 ： D N A 多 聚 酶 鏈 式 反 應(yīng)多 聚 酶 鏈 式 反 應(yīng) ( P C R ) 要 求 使 用要 求 使 用_酶。科學(xué)家從水生耐熱細(xì)菌酶?？茖W(xué)家從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離到耐高溫的中分離到耐高溫的TaqDNA聚合酶。聚合酶。耐高溫的耐高溫的DNA聚合聚合方法：根據(jù)目的菌對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中方法：根據(jù)目的菌對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。去尋找。(2)實(shí)驗(yàn)室中篩選：實(shí)驗(yàn)室中篩選：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件人為提供有利于目的菌株生

14、長(zhǎng)的條件(包括包括_、_、_等等)，同時(shí)，同時(shí)_或或_其他微生其他微生物生長(zhǎng)。物生長(zhǎng)。(3)選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許在微生物學(xué)中，將允許_種類的微生物生長(zhǎng)，同種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止時(shí)抑制或阻止_微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱作微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱作_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)溫度溫度pH抑制抑制阻止阻止特定特定其他種類其他種類選擇選擇2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有_法和法和_法。法。3設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照(1)設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除_中中_對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信

15、度。可信度。(2)判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染：判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染：_。(3)判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：_。稀釋涂布平板稀釋涂布平板顯微鏡直接計(jì)數(shù)顯微鏡直接計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組非測(cè)試因素非測(cè)試因素將未接種的培養(yǎng)基在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)將未接種的培養(yǎng)基在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)對(duì)照培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)齊全營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)齊全)接種后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目接種后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目D考點(diǎn)五土壤中分解尿素的細(xì)菌的考點(diǎn)五土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)分離與計(jì)數(shù)【回扣教材回扣教材】1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括_，所需，所需_、_、_，具體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的

16、綜，具體的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。合考慮和安排。實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方案儀器儀器材料材料用具和藥品用具和藥品2操作提示操作提示(1)無(wú)菌操作無(wú)菌操作取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在_都需要都需要滅菌。滅菌。應(yīng)在應(yīng)在_稱取土壤。在稱取土壤。在_附近將稱好的土樣附近將稱好的土樣_錐形瓶中，塞好棉塞。錐形瓶中，塞好棉塞。在在_土壤溶液的過(guò)程中，每一步都要在土壤溶液的過(guò)程中，每一步都要在_操作。操作。(2)做好標(biāo)記做好標(biāo)記本實(shí)驗(yàn)使用的平板和試管比較多。為避免混淆，最好在本實(shí)驗(yàn)使用的平板和試管比較多。為避免混淆，最好在_就做好就做好_。例如，在標(biāo)記培養(yǎng)皿時(shí)應(yīng)注。例

17、如，在標(biāo)記培養(yǎng)皿時(shí)應(yīng)注明明_、_以及平板上培養(yǎng)樣品的以及平板上培養(yǎng)樣品的_等。等。使用前使用前火焰旁火焰旁火焰火焰倒入倒入稀釋稀釋火焰旁火焰旁使用前使用前標(biāo)記標(biāo)記培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類培養(yǎng)日期培養(yǎng)日期稀釋度稀釋度3課題延伸課題延伸本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。對(duì)分離本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。對(duì)分離純化的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助純化的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助_的的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的_將尿素分解成了將尿素分解成了_，pH_，以尿素為，以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基加入唯一氮源的培養(yǎng)基加入_，如果，

18、如果pH升高，升高，_，可以初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。，可以初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。生物化學(xué)生物化學(xué)脲酶脲酶氨氨升高升高酚紅指示劑酚紅指示劑指示劑變紅指示劑變紅 尿素是唯一尿素是唯一的氮源的氮源,只有能利用尿素的微生物才能生長(zhǎng)只有能利用尿素的微生物才能生長(zhǎng)平板劃線法或稀釋涂布平板法平板劃線法或稀釋涂布平板法酚紅酚紅紅紅和和滅菌滅菌考點(diǎn)六分解纖維素的微生物的考點(diǎn)六分解纖維素的微生物的分離分離【回扣教材回扣教材】1纖維素：是一種由纖維素：是一種由_首尾相連而成的高首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的分子化合物，是地球上含量最豐富的_物質(zhì)。物質(zhì)。_是自然界中纖維素含量最高的天然

19、產(chǎn)物。是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。有些微生物能分解利用纖維素，因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生有些微生物能分解利用纖維素，因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生_。葡萄糖葡萄糖多糖類多糖類棉花棉花纖維素酶纖維素酶2纖維素酶：是一種復(fù)合酶，一般包括纖維素酶：是一種復(fù)合酶，一般包括_酶、酶、_酶和酶和_酶。前兩種酶能使纖維素分解成酶。前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶能將纖維二糖分解成纖維二糖，第三種酶能將纖維二糖分解成_。3篩選纖維素分解菌的方法是篩選纖維素分解菌的方法是_。該。該方法可以通過(guò)方法可以通過(guò)_反應(yīng)直接篩選。反應(yīng)直接篩選。其原理是：剛果紅可以與纖維素形成其原理是：剛果紅可以與纖維素形成_，當(dāng)纖維素被當(dāng)纖維

20、素被_分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，出現(xiàn)以出現(xiàn)以_為中心的為中心的_，我們可以根，我們可以根據(jù)據(jù)_來(lái)篩選纖維素分解菌。來(lái)篩選纖維素分解菌。C1CX葡萄糖苷葡萄糖苷葡萄糖葡萄糖剛果紅染色法剛果紅染色法顏色顏色紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物纖維素酶纖維素酶纖維素分解菌纖維素分解菌透明圈透明圈是否產(chǎn)生透明圈是否產(chǎn)生透明圈4纖維素分解菌大多分布在富含纖維素分解菌大多分布在富含_的環(huán)境中，的環(huán)境中，也可以將富含纖維素的物質(zhì)埋在土壤中，經(jīng)過(guò)也可以將富含纖維素的物質(zhì)埋在土壤中，經(jīng)過(guò)30天左天左右，再?gòu)囊迅癄€的物質(zhì)埋藏處篩選右，再?gòu)囊迅癄€的物質(zhì)埋藏處篩選_。5在將樣品稀釋涂布到在將樣品稀釋涂布

21、到_的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基上之前，可以用上之前，可以用_增加纖維素分解菌的增加纖維素分解菌的濃度。培養(yǎng)時(shí)要在濃度。培養(yǎng)時(shí)要在_培養(yǎng)。培養(yǎng)。6 常 用 的 剛 果 紅 染 色 法 有 兩 種 ： 一 種 是 常 用 的 剛 果 紅 染 色 法 有 兩 種 ： 一 種 是_，再加入，再加入_；另一種；另一種是是_。纖維素纖維素纖維素分解菌纖維素分解菌鑒別纖維素分解菌鑒別纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基搖床上振蕩搖床上振蕩先培養(yǎng)微生物先培養(yǎng)微生物剛果紅染色剛果紅染色在倒平板時(shí)就加入剛果紅在倒平板時(shí)就加入剛果紅7為確定得到的是纖維素分解菌，尚需進(jìn)行為確定得到的是纖維素分解菌，尚需進(jìn)行_的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵

22、方法有的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有_發(fā)酵和發(fā)酵和_發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法一般采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的法一般采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的_進(jìn)行定量測(cè)定。進(jìn)行定量測(cè)定。發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶液體液體固體固體葡萄糖葡萄糖 培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)導(dǎo)致菌體堆積致菌體堆積,影響分離效果影響分離效果 避免培養(yǎng)基避免培養(yǎng)基污染棉塞污染棉塞量與活性量與活性J4 發(fā)酵過(guò)程會(huì)發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高CCCACACD碳源碳源酒精

23、燈火焰酒精燈火焰稀釋涂布平板稀釋涂布平板敏感敏感綠膿桿菌對(duì)頭孢菌素的敏感性比美羅培南弱綠膿桿菌對(duì)頭孢菌素的敏感性比美羅培南弱雜菌污染雜菌污染抗比阿培南的綠膿桿菌形成的菌落抗比阿培南的綠膿桿菌形成的菌落美羅培南美羅培南平板劃線平板劃線NaNO3尿素和葡萄糖尿素和葡萄糖1.165109原油原油選擇選擇固體固體強(qiáng)強(qiáng)氮源和無(wú)機(jī)鹽氮源和無(wú)機(jī)鹽 只有能利用苯磺隆的微只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖生物能正常生長(zhǎng)繁殖細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素母液母液接種環(huán)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻；接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始開(kāi)始 自養(yǎng)自養(yǎng)厭氧型厭氧型AE 在酒精在酒精燈火焰旁操作燈火焰旁

24、操作接種環(huán)放在火焰上灼燒并冷卻接種環(huán)放在火焰上灼燒并冷卻錐形瓶的瓶口火焰灼燒滅菌錐形瓶的瓶口火焰灼燒滅菌CA培養(yǎng)液缺少氮源培養(yǎng)液缺少氮源,細(xì)菌不能很好生長(zhǎng)細(xì)菌不能很好生長(zhǎng)B培養(yǎng)液所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較齊全培養(yǎng)液所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較齊全,不能篩選出細(xì)菌不能篩選出細(xì)菌A增加稀釋倍數(shù)增加稀釋倍數(shù)40 000異氧需氧型異氧需氧型 尿素為唯尿素為唯一氮源一氮源酚紅酚紅45搖勻搖勻(振蕩、混勻振蕩、混勻)涂布器涂布器(玻璃刮刀玻璃刮刀)稀釋涂布稀釋涂布(平板平板)法法紅色環(huán)帶紅色環(huán)帶105或或106無(wú)氧呼吸無(wú)氧呼吸D石油石油瓊脂瓊脂滅菌滅菌蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹)萃取法萃取法油脂油脂血細(xì)胞計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板稀釋涂布

25、平板稀釋涂布平板4540高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌液體液體系列稀釋系列稀釋(或或“梯度稀釋梯度稀釋”)淀粉淀粉出現(xiàn)透明圈出現(xiàn)透明圈分泌淀粉酶分泌淀粉酶 巴氏消毒法巴氏消毒法(煮沸消毒法煮沸消毒法,紫外線消毒法等紫外線消毒法等)較強(qiáng)的理化因素較強(qiáng)的理化因素阿拉伯膠阿拉伯膠 巴氏消毒法巴氏消毒法(煮沸消毒法煮沸消毒法,紫外線消毒法紫外線消毒法等等) 目的目的菌株菌株(菌株菌株SM01)能分泌降解阿拉伯膠的蛋白質(zhì)能分泌降解阿拉伯膠的蛋白質(zhì)ABG 不合理不合理,缺少空白缺少空白對(duì)照對(duì)照 另設(shè)置另設(shè)置兩組一樣裝置的對(duì)照組兩組一樣裝置的對(duì)照組,其中第一組只用上清液其中第一組只用上清液,不添不添加蛋白酶加蛋白酶,取出取出10 mL加入阿拉伯膠溶液。測(cè)定阿拉加入阿拉伯膠溶液。測(cè)定阿拉伯膠的降解率。第二組不用上清液伯膠的降解率。第二組不用上清液,只用含蛋白酶的只用含蛋白酶的溶液。取出溶液。取出10 mL加入阿拉伯膠溶液加入阿拉伯膠溶液,測(cè)定阿拉伯膠測(cè)定阿拉伯膠的降解率的降解率A