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北京上海廣州地區(qū)的流感嗜血桿菌分離及藥敏試驗

上傳人:澤*** 文檔編號:77638621 上傳時間:2022-04-20 格式:DOC 頁數(shù):5 大?。?26KB
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1、 流感嗜血桿菌可引起人類各種感染, 包括常見的眼結(jié)膜炎,中耳炎,上呼吸道感染,它們多 由非 b 型株引起。而嚴重感染,如腦膜炎,會厭炎、心包炎,肺炎,關(guān)節(jié)炎,骨髓炎,菌 血癥,面部蜂窩組織炎,多由 b 型株引起。 5 歲以下為高發(fā)年齡,最常見于 6~8 個月的嬰 幼兒,但也可見于成人及老年人 [ 1] 。在美國自從 1985 年將流感嗜血桿菌的 b 型抗原化學 疫苗加入兒童免疫計劃后, b 型株引起的疾病發(fā)病率有所下降, 1987 年起多種多糖疫苗與 白喉類毒素或破傷風類毒素結(jié)合,被推薦給 18 個月以下兒童的免疫計劃, b 型株感染率急

2、 劇地下降,減少了 95% [ 2, 3] 。為了解我國流感嗜血桿菌的分離率及藥敏譜,我們在北京、 廣州、上海三地區(qū)組織了 10 家教學醫(yī)院進行了調(diào)查, 并對其結(jié)果進行了分析, 現(xiàn)報告如下。 材料與方法 一、菌株來源 從門診急診呼吸道感染患者的痰及咽拭子標本進行流感嗜血桿菌的分離鑒定及藥 物敏感試驗,共獲得流感嗜血桿菌 319 株。 二、菌株分離鑒定方法 ( 一 ) 分離用培養(yǎng)基 1 立升蒸餾水加 40 克胰消化大豆瓊脂粉 (Oxoid) , 115°C15 分鐘蒸汽滅菌,冷卻至 80℃后,加

3、脫纖維羊血至 5% 濃度,維持 15 分鐘,再冷至 50℃~ 55 ℃,加溶于水中的 15 毫克的輔酶 I(NAD) 和 300 毫克桿菌肽,立即傾倒平皿, 4℃保存。 ( 二 ) 藥敏用培養(yǎng)基 1 升蒸餾水加嗜血桿菌試驗用培養(yǎng)基瓊脂粉 (HTM ,Oxoid)8.6 克, 115 ℃ 15 分鐘蒸氣滅菌,將 2 整瓶生長因子 (Hematin, Oxoid) 用 4ml 無菌水充分溶解 后, 55℃下無菌加入,立即定量傾倒平皿至 4mm 厚, 4℃保存。 (三) 鑒定培養(yǎng)基 同分離用培養(yǎng)基,不加桿菌肽。 ( 四 ) 分離鑒定

4、步驟 將痰及咽拭子標本按常規(guī)方法種入分離培養(yǎng)基內(nèi), 36℃下燭 缸內(nèi)培養(yǎng)過夜,挑選 4 ~ 6 個可疑菌落移種至鑒定培養(yǎng)基及 Mueller Hinton (M-H, Oxoid) 培 養(yǎng)基上作衛(wèi)星試驗。在 M-H 培養(yǎng)基上貼 X+V 因子, X 因子, V 因子紙片。只在血平皿上衛(wèi) 星試驗陽性、在 M-H 平皿上衛(wèi)星試驗陰性;以及只在 X+V 因子紙片周圍生長、 X 因子, V 因子紙片周圍不生長的菌落可判定為流感嗜血桿菌,并進行以下試驗: 1. 頭孢硝噻酚試驗 (Nitrocefin,Oxoid) 檢測 β-內(nèi)酰胺酶。 2. 流感嗜血

5、桿菌 b 型抗原乳膠凝集試驗 (bio Merieux Co.) 檢測 b 型株 (Hib) ,流感 嗜血桿菌 b 型株送協(xié)和醫(yī)院再檢驗。 3. 在 HTM 平皿上作 8 種抗生素的紙片擴散法藥敏試驗。 三、藥敏試驗 藥敏試驗采用 NCCLS 規(guī)定的紙片瓊脂擴散法,按 NCCLS 的判定標準測量抑菌圈直徑及判定耐藥及敏感 (表 1) 。 四、質(zhì)量控制 用 ATCC 49766 監(jiān)測頭孢克羅的活性,用大腸桿菌 ATCC 25923 監(jiān)測其他 7 種藥 的活性, NCCLS 規(guī)定 ATCC 497

6、66 對頭孢克羅的抑菌范圍為 25~ 31mm ,本資料中各醫(yī)院所測值為 25~ 31mm ,平均為 28.4mm 。大腸肝菌 ATCC 25922 對其余抗生素的抑菌大小也在規(guī)定范圍內(nèi)。 五、電腦分析 各醫(yī)院的原始數(shù)據(jù)均送至協(xié)和醫(yī) 院,統(tǒng)一輸入電腦中,用 WHONET-3 軟件進行分析。 結(jié) 果 一、各醫(yī)院分離流感嗜血桿菌株數(shù)及咽試子標本和痰標本分離陽性率 見表 2。 二、北京廣州兩地區(qū)流感嗜血桿菌的生物學特點 見表 3。由于分離菌株數(shù)少,不能判定三地區(qū) b 型株及產(chǎn)

7、 β-內(nèi)酰胺酶株有多大差 別,但三地區(qū) b 型株分離株占 5.9% ,產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株占 4.7% 。 三、 8 種抗生素對流感嗜血桿菌的敏感性 見表 4。表 4 中結(jié)果證實:北京地區(qū)的流感嗜血桿菌對頭孢克羅、頭孢呋辛、環(huán) 丙沙星、多西環(huán)素,都是非常敏感的,敏感率分別為 99% 、 99% 、 98% 、 95% 。而且對氨 芐青霉素也很敏感 (92%) ,氯霉素的敏感率為 87% ,紅霉素及復方新諾明則較差。廣州地 區(qū)除了對頭孢克羅及頭孢呋肟高度敏感外,其它六種抗生素的敏感率從 79% 至 3% 。上海 地區(qū)與北京相似,但前者對氨芐

8、青霉素的敏感率為 59% 。 表 1 對流感嗜血桿菌的抑菌圈判定值 (NCCLS 規(guī)定 ) 劑量 抑菌圈直徑 (mm) 藥 名 R I S ( μg) 氨芐西林 10 ≤18 19~21 ≥22 頭孢克羅 30 ≤16 17~19 ≥20 頭孢呋辛 30 ≤16 17~19 ≥ 環(huán)丙沙星 5 ≤20 ≥21 紅霉素 15 ≤13 14~ 22 ≥23 多西環(huán)素 30 ≤12 13~ 15 ≥16 氯霉素 30 ≤25

9、 26~ 28 ≥29 TMP/SMZ 1.25/23.75 ≤ 10 11~ 15 ≥ 16 表 2 流感嗜血桿菌的分離情況 醫(yī) 院 例 數(shù) 分離株數(shù) 分 離 率(%) 咽拭 痰 北京協(xié)和醫(yī)院 249 50 20.1 - 北京醫(yī)院 400 38 9.5 - 北京友誼醫(yī)院 371 36 9.7 - 北京解放軍總院 213 26 12.2 - 北京朝陽紅十字醫(yī)院 309 38 12.3 - 北京中日

10、友好醫(yī)院 177 36 20.4 - 廣州醫(yī)院 60+107 31 41.5 5.6 中山醫(yī)院 127+93 30 19.7 5.4 注: -為未作 表 4 319 株流感嗜血桿菌對 8 種抗生素的敏感率 抗生素 北京 (224) 上海 (34) 廣州 (61) 合計 (285) I% S% I% S% I% S% I% S% 氨芐西林 3 92 12 59 10 75 5 88 頭孢克羅 1 99 0 9

11、7 7 93 2 98 頭孢呋肟 1 99 6 88 2 98 1 99 環(huán)丙沙星 0 98 0 94 0 79 0 表 3 流感嗜血桿菌中的 b 型株及 產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株的分離率 b 型 產(chǎn) β-內(nèi) 地區(qū) 菌株數(shù) (%) 酰胺酶 (%) 北京 224 4(1.8) 9(4.0) 廣州 61 4(6.5) 6(9.8) 上海 34 11(32.3) NR 合計 319 19(5.9) 15(4.7) 討 論

12、 本資料中的我國三大城市的流感嗜血桿菌大多數(shù)來自門急診的上呼吸道感染的輕 癥患者;尤以兒童為多。 b 型株及產(chǎn) β-內(nèi)酰胺酶株的檢出率分別為 2.8% 及 5.3% 。 流感嗜血桿菌對口服的頭孢克羅及頭孢呋肟很敏感,用散點圖配對比較二者相關(guān) 性很好, 這是因為二者作用機制相同所致。 說明都是治療中輕癥流感嗜血桿菌感染的合適的藥。 所有耐氨芐西林的菌株,不論廣州,上?;虮本┏焕舛紝︻^孢克羅及頭孢呋肟敏感,本例 β- 內(nèi)酰胺酶陰性,卻對氨芐西林耐藥,估計是染色體介導的耐藥性所致。

13、 古希臘哲學大師亞里士多德說: 人有兩種,一種即  “吃飯是為了活著  ”,一種是 “活著是為了吃飯 

14、 ”一.個人之所以偉大,首先是因為他有超于常人的心。  “志當存高遠 ”,風“物長宜放眼量  ”,這些古語 皆鼓舞人們要樹立雄心壯志,要有遠大的理想。 有一位心理學家到一個建筑工地,分別問三個正在砌磚的工人: “你在干什

15、么? ” 第一個工人懶洋洋地說: “我在砌磚。 ” 第二個工人缺乏熱情地說: “我在砌一堵墻。 ”第三個工人滿懷憧憬地說: “我在建一座高樓! ” 聽完回答,心理學家判定: 第一個人心中只有磚,他一輩子能把磚砌好就不錯了;第二個人眼中只有墻,好好干或許能當一位技術(shù)員;而第三個人心中已經(jīng)立起了一座殿堂,因為他心態(tài) 樂觀,胸懷遠大的志向! 井底之蛙,只能看到巴掌大的天空;摸到大象腿的盲人,只能認為大象長得像柱子;登上五岳的人,才能感覺 “一覽眾山小 ”;看到大海的人,就會頓感心胸開闊舒暢; 心中沒有希望的人,是世界上最貧窮的人;心中沒有夢想的人,是普天下最平庸的人;目光短淺的人,是最沒有希望的人。 清代 “紅頂商人 ”胡雪巖說: “做生意頂要緊的是眼光,看得到一省,就能做一省的生意;看得到天下,就能做天下的生意;看得到外國,就能做外國的生意。 決定了他志向的短淺或高遠;一個人的希望和夢想,決定了他的人生暗淡或輝煌。  ”可見,一個人的心胸和眼光,

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