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植病研究法試題庫 一、填空題 1.實驗室中常用的滅菌方法有 熱力滅菌、 過慮滅菌 和 輻射滅菌 2.PDA培養(yǎng)基，從組成成分來源看，屬于 半合成、半組合培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)來看，屬于 固體培養(yǎng)基 從使用的目的和范圍來看，屬于通用培養(yǎng)基 3.植物病害控制的方法主要有 抗病育種、病害檢疫、農業(yè)措施、物理方法、生物方法、化學方法 4.常用的植物組織表面消毒液有氯化汞溶液、次氯酸鈉和 乙醇 5.癥狀按照表現部位分為 外部癥狀和 內部癥狀。按照組成性質分為病狀 和 病癥。 6.植物病害的典型病狀有 壞死、 腐爛、 萎蔫、 畸形和 變色。典型病癥類型有 霉狀物、粉狀 、絲狀物、塊狀和傘狀物和銹狀物。 7.植物病害標本的制作常用的方法有 浸漬標本制作法和蠟葉標本制作法。 8.實驗室常見保存標本的方法有 封袋保存 、臺紙保存 和 盒裝保存。 9.培養(yǎng)基中碳素的來源有 葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、淀粉、氨基酸、蛋白質次之油脂類最差 ；氮素的來源有 蛋白胨、牛皮膏、酵母膏、氨基酸、硝酸銨、硝酸鈉 10.植物病原真菌常見的保存方法 室溫保存 、 低溫保存 、干燥保存 和 土壤中保存 等。 石蠟油 11.分離病原真菌常用的是 PDA培養(yǎng)基；分離病原細菌常用的是 NA或YDC 培養(yǎng)基。 12.植物病原細菌的液體培養(yǎng)性狀包括 表現的生長情況 、 色素的產生 、有無沉淀 和特殊氣味。 13.植物病原細菌在平板上的菌落形狀有 全緣 、鋸齒狀 、樹枝狀和扇形 等類型。 14.常見細菌的染色方法有 革蘭氏染色 、 鞭毛染色 、 莢膜染色和 芽苞和晶體染色。 15.植物病毒病常見的癥狀類型有 變色、畸形 、壞死 和在植物細胞內形成內含體。 16.由種子帶菌傳染的病害接種方法有 拌種法 和 浸種法、花期接種 。如 黑粉病、炭疽病 病害；由土壤帶菌傳染的病害的接種方法有 蘸根接種和 拌土、切傷灌根，如 枯萎病、黑穗病病害。 17.由流水和雨水傳染的病害的接種有 噴霧 、噴粉 、涂抹 、 針刺、注射 等方法，如黃瓜霜霉病 和 麥類銹病 病害。 18.植物病毒內含體的形狀有、 不定形內含體 、 晶狀體內含體 、準晶體內含體和 風輪狀內含體。 19.由線蟲引起的植物病害有 馬鈴薯根結線蟲病、小麥線蟲病、甘薯莖線蟲病、大豆包囊線蟲病 和大豆根結線蟲病 等。 20.植物線蟲常用的分離方法有 貝曼漏斗法 、卡勃過篩分離法和離心法等。 21.真菌菌絲的生長量的測定方法有 測定菌體的半徑和直徑、 測定濕重 、測定干重和目測估計等。 22.由小麥散黑穗病的田間接種方法有 花期接種和 致傷接種法。棉花枯萎病的田間接種方法有 切傷灌根接種法 和 蘸根接種法。番茄葉霉病的田間接種方法有 針刺法和 噴霧法； 番茄病毒病的田間接種方法有汁液摩擦接種法和 噴槍接種法。黃瓜霜霉病的田間接種方法有 注射法 和 噴霧法 23.黃瓜灰霉病在田間通過 土壤 傳播，引起該病害的病原菌屬于 半知菌亞門、灰葡萄孢屬。在PDA平板上病原菌呈 初期白色后期灰色 顏色。 二、簡答題 1.觀察和描述一種植物病害的癥狀應注意哪些方面？ （1）在癥狀觀察和描述時，要準備好相機，手持放大鏡，解剖顯微鏡，解剖刀等工具。遇到典型癥狀時，及時拍照記錄癥狀，以免標本褪色和變形后影響診斷效果。 （2）檢查病部前首先應注意病害對全株的影響 （3）觀察和描述斑點病害時，要注意斑點的形狀、數目、大小、色澤、排列和有無輪紋等 （4）腐爛病害，要注意腐爛組織的色味，結構以及有無蟲傷等。 （5）對于未出現病癥的真菌病害，可用70%酒精進行表面消毒，用無菌水清洗，保濕，出現癥狀后再進行觀察描述。 3. 植物病害的診斷包括哪些方面。 一般真菌病害經過癥狀觀察和顯微鏡檢查，可以做出初步鑒定，有些還必須經過分離，培養(yǎng)，接種等一系列工作。 4. 簡述柯赫氏法則的內容 （1）某種微生物經常與某種病害有聯系，發(fā)生這種病害往往就有這種微生物存在 （2）從病組織上可以分離得到這種微生物的純培養(yǎng)，并且可以在各種培養(yǎng)基上研究它的形狀 （3）將培養(yǎng)的菌種接種在健全的寄主上，可誘發(fā)與原來相同的病害 （4）從接種后發(fā)病的植物上能再分離到原來的微生物 5.柯赫氏法則在植物病害診斷中的局限性。 不適合霜霉菌，白粉菌，植原體和螺原體等目前還不能人工培養(yǎng)的病原物。 6.試列舉不少于5種有關植物病理學方面的文獻？ （1）1922年：應用真菌學文獻摘要Review of Applied Mycology（R.A.M.）收集和摘錄世界各國有關真菌和植物病理學文獻，1970年改名“植物病理文獻摘要” Review of Plant pathology（R.P.P.） （2）1962年：植物病理學評述Annual Review of Phytopathology介紹各方面專題研究的進展 （3）1959-1960年：植物病理學高級論述Plant pathology：an Advanced Treatise共三卷：卷1的內容是病植物；卷2的內容是病原物；卷3的內容是群體發(fā)病、流行及預測 （4）1977-1980年：植物病害高級論述Plant Disease an Advanced Treatise共五卷：卷1如何控制植物病害；卷2病害如何在植物體內發(fā)展；卷3植物如何受植物病害的危害；卷4病原物如何引起植物的病害；卷5植物如何進行防御 7. 參考文獻（書/期刊）該如何記載？ 文獻常用卡片記載。書：應注明作者、發(fā)表年份、書名、版本、頁數、有無圖表和出版地點 8. 植物病害標本采集使常用的工具有哪些？ 標本夾、標本箱、刀、剪、鋸、鋤、小玻瓶、標本紙、紙袋、標簽和記錄本等 9.采集標本注意的事項？ （1）各受害部位不同時期的典型癥狀：病害標本主要是有病的根、莖、葉和果實等，好的標本要有各受害部位在不同時期的典型癥狀，真菌病害上面有子實體更好。 （2）注意識別寄主 （3）標本的數目：不能太少，在制作的過程中容易損壞，多余的標本還可以互相交流。 （4）不同標本采集后要根據其性狀妥善放置 （5）記載:寄主名稱、采集日期和地點、采集人姓名、主要發(fā)生情況和必要的生態(tài)因子。 10.采集標本時記載的項目有哪些？ 記錄內容包括寄主名稱，采集日期，地點，采集人姓名，標本編號，分布情況，地理條件，損失率 11.簡述干燥標本制作的過程。 1.采集標本后，要立刻放入標本夾中壓制，以保持標本的原形，有些標本在壓制時需做少量的加工，如標本的葉子過多，莖稈或枝條粗壯，壓制時把葉子剪掉一部分或將枝條剪去一側在壓制 2.標本放到標本夾內后，用標本繩將標本夾扎緊或用重物壓實，將標本放在通風處放置，使標本盡快干燥。在壓制標標過程中前四天通常要每天早、晚各換一次紙，以后每天換一次，直至干燥為止，第一二次換紙時要對標本進行整形。簡言之將田間采集的新鮮病葉標本用標本夾壓平后，經過幾次還翻，待標本干燥，即為干燥標本 12.簡述真菌孢子萌發(fā)的條件。 (一）內在因素：包括孢子的成熟度、壽命和生活力等。孢子的壽命長和生活力高，真菌孢子萌發(fā)率高，一般情況下，孢子不成熟對壞境敏感，剛形成的不能正常發(fā)芽，只有成熟后才獲得較強萌發(fā)能力 （二）外界壞境因子：包括溫度、光照、濕度、營養(yǎng)條件 （1）濕度是最重要的條件影響孢子萌發(fā)的快慢、萌發(fā)的百分率和芽管的生長 （2）真菌孢子一般要在水中才能萌發(fā)，而且有些真菌的孢子只有在液態(tài)水中才能萌發(fā)，但有些在濕度很高的條件下即使沒有水滴也能萌發(fā)。 （3）孢子萌發(fā)時要有空氣 （4）真菌孢子一般是在酸性條件下萌發(fā)較好 （5）光可以刺激或抑制有些真菌孢子的萌發(fā)，而多數真菌孢子的萌發(fā)與光關系不大 （6）孢子密度過大，會抑制孢子的萌發(fā) （7）真菌孢子萌發(fā)時對養(yǎng)分有著不同的要求，有些真菌的包子身體儲藏的養(yǎng)分不夠萌發(fā)時必須由外界供給養(yǎng)分 13.簡述植物病原細菌分離時注意的事項。 1材料是否新鮮，目標菌是否存在染菌滋生情況 2培養(yǎng)基是否適當，包括化學和物理性狀 3培養(yǎng)條件是否適宜。受低溫、高溫和其它因子影響 4病原微生物的生物學特點對于腐生條件的適應性 14.簡述植物病原真菌組織分離法和稀釋（孢子）分離法的適用材料及優(yōu)缺點 組織分離法適用的材料： 斑點病病原真菌的分離；維管束組織內病原真菌的分離；根腐的分離；肉質組織中病菌的分離；種子內病菌的分離 孢子分離法適用材料新鮮，有大量的霉層存在。 包子分離法 組織分離法 優(yōu)點 生活力強，容易取得 簡便、后代不易變異、能保持原菌種優(yōu)良特性 缺點 個體小、數量大、計數不方便容易產生變異 如果菌絲含量少，則往往用此方法不成功 15. 病原真菌的培養(yǎng)性狀主要包括哪些方面？ ①菌落的質地；②菌落形凸起的或者有成簇的菌絲體；③形成成堆的孢子是干的或粘性的； ④各種子實體和休眠結構（厚垣孢子、菌核等）的形成和所需時間；⑤菌落正面和背面的顏色，有無色素參入培養(yǎng)基中⑥有無特殊氣味；⑦菌落中有沒有部分呈扇狀； ⑧生長率的快慢，如菌落長到一定直徑所需的時間。菌落的顏色也要不斷的觀察，它的顏色是隨著時間而改變的。 16. 革藍氏染色的原理及成敗的關鍵是什么？為什么？ 原理：G+ 菌：細胞壁厚，肽聚糖含量高，交聯度大，當乙醇脫色時，肽聚糖因脫水而孔徑縮小，故結晶紫-碘復合物被阻留在細胞內，細胞不能被酒精脫色，仍呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯松散，乙醇脫色不能使其結構收縮，因其含脂量高,乙醇將脂溶解，縫隙加大，結晶紫-碘復合物溶出細胞壁，酒精將細胞脫色，細胞無色，沙黃復染后呈紅色關鍵：1涂片時不可過厚否則在染色脫色時不一均勻，固定時不可過熱，以載玻片不燙手為宜2嚴格掌握脫色溫度，是其關鍵步驟。如脫色時間太長陽性菌會誤為陰性菌，反之。3在鏡檢時，以分散開的菌體的革蘭氏反應為準 17. 植物病毒的傳播方式主要有哪些？ 病毒枝葉機械傳染、嫁接傳染、種子和花粉傳染、介體傳染（昆蟲、昆蟲、線蟲） 18. 常見的植物寄生線蟲的分離方法有哪幾種？ （一）植物病組織中線蟲的分離（1）直接解剖分離法（2）漏斗分離（3）淺盤分離（4）培育分離 （二）土樣中線蟲分離（1）直接過篩分離法（2）線蟲濾紙分離（3）沉降分離（4）離心漂浮分離（5）漂浮分離 19.植物寄生性線蟲造成的癥狀主要有哪些？ 以畸形為主1.頂芽和花芽的壞死，莖葉的卷曲或組織的壞死，形成葉癭或種癭等。 2.根部停止生長或卷曲，根上形成瘤腫或過度分枝，根部組織的壞死和腐爛等。 因此，表現為植株矮小，色澤失常和早衰等癥狀，嚴重時整株枯死。 20.簡述病原菌的接種實驗在植物病害研究中有那些重要的意義？ （1）接種實驗對于植物病害病原生物學說的確立具有非常重要意義（2）對于柯赫法則的建立奠定了基礎 三、名詞解釋 植物病害：植物在其生命過程中受寄生物侵害或受不良環(huán)境影響，組織器官發(fā)生病理變化，外部呈現不正常的現象，造成經濟損失 癥狀：是植物受病原物或不良環(huán)境條件影響后，內部生理活動和外觀的生長發(fā)育所顯示的某種異常狀態(tài) 培養(yǎng)基：是根據微生物對營養(yǎng)、水分及酸堿度的要求人工配置而成的培養(yǎng)基質，他是微生物生長和發(fā)育的物質基礎 局部癥狀：當病毒侵染寄主植物后，僅在接種的葉片上出現癥狀的稱局部癥狀，一般是壞死斑，也可以是褪綠斑及褪綠環(huán)等 系統(tǒng)癥狀：病毒侵染寄主植物后，在接種葉片上不出現癥狀，而是在新長出來的葉片上出現的癥狀稱為系統(tǒng)癥狀，多數是花葉類型 四、分析題： 1.用A、B兩種藥劑防治番茄灰霉病，調查結果如下表： 病級 發(fā)病程度（葉片枯死率） 代表數值 A藥處理調查株數 A藥處理調查株數 A、B兩藥對照區(qū)病理指數 1 無病或幾乎沒有病 0 20 10 均為75.0 2 少至25%的葉片枯死 1 40 10 3 26%～50%的葉片枯死 2 20 20 4 51%～75%的葉片枯死 3 10 25 5 76%～100%的葉片枯死 4 10 35 合計 100 100 （1） 根據上表分別計算A、B兩藥劑處理區(qū)的發(fā)病率和病情指數。 感染指數=Σ（病級株數x代表數值）/（株數總和x發(fā)病最重級的代表數值）x100 A藥發(fā)病率：（40+20+10）/100=80％ B藥發(fā)病率：（10+20+25+35)/100=90％ 感染指數：A藥：（1x40+2x20+3x10+4x10)/(100x4)x100=37.5 B藥：（1x10+2x20+3x25+4x35)/(100x4)x100=66.25 （2）根據計算結果，判斷哪種藥劑相對防治效果好。 A藥的防治效果好 2. 接種環(huán)采用酒精燈火焰滅菌的方法，按照無菌操作的方法，用接種環(huán)從純培養(yǎng)的試管中轉接了9支斜面使館，結果其中3支不長任何菌；3支污染了雜菌；3支長純菌，試分析造成這些差異的原因。 1.接種時接種環(huán)灼燒滅菌時過熱便去接種，使接種菌滅亡 2.在保存時，保存不當，被外界污染產生雜菌 3.使用接種環(huán)時姿勢改變使接種環(huán)上的菌未能放在斜面培養(yǎng)基上4. 接種時，接種環(huán)壓力過大，使菌按在培養(yǎng)基下 5.在接種時選取菌種的位置不同，也會影響6.培養(yǎng)基的成分可能不同7.接種時的操作方法不當 3. 甲、乙和丙三人，在不同時期分別觀察了同一種病害，正常情況下在葉子上所形成的病斑，結果三人所觀察和描述的病斑的大小和顏色均不一樣，其原因是？ 1.一種病害在同一植物可表現出不同類型的癥狀 2.在植物生長發(fā)育的不同時期也可先后表現不同類型的癥狀3.不同部位也可表現不同4.同一種植物的不同品種5.同一品種不同個體的生長情況不同也可 6.有的病害在一種植物上可以同時產生和先后表現兩種以上不同類型的癥狀 4.根據小麥產量比較的試驗結果制表： 年份：2005、2006、2007；地區(qū)：運城和大同；品種：玉皮和農大60 （1） 主要表示不同年份產量的變化繪表。 運城 大同 玉皮 農大60 玉皮 農大60 2005 2006 2007 （2） 主要表示同一品種在不同地點產量的變化繪表。 玉皮 農大60 運城 大同 運城 大同 2005 2006 2007 （3） 不同品種在同一地點產量的變化繪表。 運城 大同 2005 2006 2007 2005 2006 2007 玉皮 農大60 五、論述題 1.當你在田間發(fā)現一種你不熟悉的病害時，將根據田間觀察到的那些情況初步判斷它可能是生理性病害、真菌性病害、細菌性病害或者病毒??？ 看癥狀類型：通常我們把生病植物變化分成五大類型，即腐爛、壞死、變色、萎蔫、畸形。由于真菌的種類很多，不同真菌能夠造成以上五類病害，其中最常見的是壞死和腐爛，如玉米大小斑病、小麥葉枯病、大白菜黑斑病等各種形狀的葉斑病，壞死發(fā)生在根部或莖稈上就形成枯萎病、根腐病，真菌造成的腐爛有的較干有的濕潤且沒有臭味，有衣物發(fā)霉或發(fā)酵的香味，常常長出各種顏色的霉層或小黑點、小黑粒；細菌通常破壞細胞壁，讓細胞內的物質外滲或阻塞水和營養(yǎng)物質在植物體內運輸，所以主要造成腐爛、萎蔫癥狀，腐爛后往往出水很多，爛成一灘泥且發(fā)出臭味，病斑很像水浸或油浸狀，邊緣有點透明濕潤條件下，能夠在發(fā)病部位看到亮黃色小珠子的菌膿細菌病害的分布常與流水、淹水、雨滴飛濺有關；而病毒病害常和傳毒昆蟲的活動有關觀察病害田間分布情況，也可間接推測植物病毒對寄主的危害，病毒侵入植物一般不會立刻殺死植物，主要改變生長發(fā)育過程，引起植株顏色或形狀的改變，我們叫它變色或畸形；生理病害由于管理不當和不良環(huán)境影響而使植物生長不正常，表現出來的癥狀稱為生理病害，是非生物病害，不具有侵染性，生理病害共同特征是病株表面或內部沒有任何病征。這類病害明顯特點是一般在田間大面積同時發(fā)生，同一時間、植株相同部位和器官出現基本相同癥狀，常見有低溫障礙、缺素癥、激素中毒、肥害及藥害所造成的生理性障礙。 2. 試述PDA培養(yǎng)基的制作過程。 1.稱量：去皮馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15—20g，瓊脂加入的量取決于瓊脂的質量，質量好的15g就夠了，質量差的應適當，另外，在夏天氣溫較高時，適當增加用量。 2.將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水1000毫升，煮沸30min。用紗布濾去馬鈴薯殘渣。 3.將馬鈴薯濾液放回鍋中，加入瓊脂，加熱融化，并需要用玻璃棒不斷攪拌，并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。 4.加入葡萄糖，溶解后加入適量的水以補充加熱過程中損失的水分，定容至1000毫升。通常在制作培養(yǎng)基的鍋內用紅藍鉛筆標記出不同體積的刻度。 5.分裝，根據不同的實驗目的，可將配制的培養(yǎng)基分裝于試管內或三角瓶內。分裝試管，其量為管高的1/5，滅菌后制成斜面，分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。 6.封口：在管口或瓶口用塑料膜封口，也可以用棉塞，要用未脫脂的經彈松的棉花，棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)，故在植物病理學研究工作中普遍使用。 7.包扎：加賽后，將試管用線繩捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、組別、制作人等 8.滅菌：將培養(yǎng)基以0.1MPa，121C，高壓蒸氣滅菌20min 。 9.擱置斜面：將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50C左右，將試管口端擱在玻棒或其它合適高度的器具上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。培養(yǎng)基經滅菌后，必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h，無菌生長者方可使用。 3. 設計黃瓜霜霉病的接種試驗。 （1）霜霉病孢子懸浮液的制備:將培養(yǎng)5天的黃瓜霜霉病菌用無菌水配成濃度為十的七次個每毫升孢子懸浮液 （2）取兩個黃瓜清洗干凈并用酒精棉擦拭。 （3）取其中一根，將病菌孢子懸浮液用注射針注射到寄生生長點或幼嫩部分，將黃瓜放入培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿中放有濕潤的濾紙和脫脂棉，最后用保鮮膜將培養(yǎng)皿和黃瓜包好。 （4）另一根黃瓜直接放入又濕潤濾紙和脫脂棉的培養(yǎng)皿中，用保鮮膜包好，作為對照。