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38 西壯族自治區(qū) 地方標準 5/ T 2017 苦丁茶種子質(zhì)量要求 擊此處添加與國際標準一致性程度的標識 （征求意見稿） 布 施 廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術監(jiān) 督局 發(fā)布 T 2016 I 前 言 本標準 按照 2009 給出的規(guī)則起草。 本標準由廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生和計劃生育委員會提出。 本標準由廣西衛(wèi)生標準 化技術委員會歸口。 本標準起草單位： 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院 。 本標準主要起草人 ： T 2016 1 苦丁茶種子質(zhì)量要求 1 范圍 本標準規(guī)定了苦丁茶 . J. 子的質(zhì)量要求、檢驗方法、檢驗規(guī)則、標志、包裝、貯藏、運輸 、生產(chǎn)檔案等 。 本標準適用于廣西境內(nèi)生產(chǎn)和銷售的苦丁茶種子。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應用是必不 可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 扦樣 農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 凈度分析 農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 發(fā)芽試驗 農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 真實性和品種純度鑒定 農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程 水分測定 7415主 要農(nóng)作物種子貯藏 2006 農(nóng)作物種子標簽通則 國家技術監(jiān)督局令（ 2005）第 75號 定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法 限數(shù)值的表示方法和判定方法 值修約規(guī)則 3 術語與定義 下列術語和定義適合于本標準 苦丁茶種子 系冬青科植物苦丁茶 . J. 種子批 同一來源，同一品種，同一采收期的質(zhì)量基本一致，在規(guī)定數(shù)量之內(nèi)的種子。 送驗樣品 送到種子檢驗機構(gòu)檢驗、規(guī)定數(shù)量的樣品。 T 2016 2 試驗樣品 在實驗 室中從送驗樣品中分出的部分樣品，供測定某一檢驗項目之用。 4 質(zhì)量要求 苦丁茶種子質(zhì)量指標見表 1。 表 1 苦丁茶種子 質(zhì)量指標 級別 發(fā)芽率 /% 凈度 /% 千粒重 /g 水分 /% 一級 ≥50 ≥35 二級 30～ 49 ＜ 35 5 檢驗方法 見附錄 A。 6 檢驗規(guī)則 以凈度、發(fā)芽率、千粒重指標為劃分種子質(zhì)量級別的依據(jù)。凈度、發(fā)芽率、千粒重各定一個指標，其中一項達不到一級指標的降為二級，其中一項達不到二級 指標的即為不合格種子。水分一項達不到指標的即為不合格種子 ?？喽〔璺N子質(zhì)量檢驗結(jié)果報告單內(nèi)容格式見附錄 B。 7 標志、包裝、貯藏 按 0464－ 2006、國家技術監(jiān)督局令（ 2005） 第 75號 定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法 、 7415行。 8 運輸 種子在運輸過程中必須做好防曬、防蟲、防丟失、防損壞等工作。 T 2016 3 附錄 A 苦丁茶種子檢驗方法 樣 參照 作物種子檢驗規(guī)程 扦樣執(zhí)行。 本品種 的種子批最大重量和樣品最小重量見表 表 種子批的最大重量和樣品最小重量 種子批的最大重量 品最小重量 /g 送檢樣品 凈度分析 1000 250 50 度分析 參照 作物種子檢驗規(guī)程 凈度分析執(zhí)行。 量測定 采用百粒法測定，測定程序如下： a） 將凈度分析后的全部凈種子均勻混合，分出一部分作為試驗樣品。 b） 用手或數(shù)種器從試驗樣品中隨機數(shù)取 8個重復，每個重復 100粒，分別稱重（ g）， c） 按以下公式（ 1）、（ 2）、（ 3）計算 8個重復的平均重量 、標準差及變異系數(shù)： 平均百粒重（ X ） = ……………………………… （ 1） 式中： X —— 100粒種子的平均重量 /g； n—— 重復次數(shù)。 標準差（ S） =)1()()( 22??? ? ……………………… （ 2） 式中： X—— 各重復重量 /g； n—— 重復次數(shù)。 變異系數(shù) = 100?…………………… ……… （ 3） 式中： S —— 標準差； X —— 100粒種子的平均重量 /g。 T 2016 4 d） 如變異系數(shù)不超過 可計算測定的結(jié)果。如變異系數(shù)超過 4，則應再測定 8個重復，并計算 16個重復的標準差。凡與平均數(shù)之差超過兩倍標準差的重復略去不計。 e） 按以下公式（ 4）計算結(jié)果，結(jié)果精確至 g： 種子千粒重（ g） =（ X ） ×10 …………………………… （ 4） 式中： X —— 100粒種子的平均重量 /g。 分測定 參照 作物種子檢驗規(guī)程 水分測定執(zhí)行。 采用高溫烘干法測定，測定程序如下： a） 將樣品盒預先烘干，放入干燥器內(nèi)冷卻 30 45 果精確至 g），并記下盒號。 b） 稱取經(jīng)充分混合的送檢樣品約 20 g，用小型粉碎機粉碎 30 s，即磨碎細度應達到至少有 50 %成分通過 0.5 留在 1.0 0%。 c） 取經(jīng)磨碎的充分混勻的試樣 2份，每份 9.0 g～ 11.0 g， 將試樣放入預先烘干并稱重過樣品盒內(nèi) ，再稱重（結(jié)果精確至 g）。 d） 使烘箱預先通電預熱至 145 ℃ ，將樣品攤平放入烘箱內(nèi)的上層，樣品盒距溫度計的水銀球約 2.5 速關閉烘箱門，使箱溫在 5 10 30℃ ～ 133℃ 時開始計時，在130 ℃ ～ 133 ℃ 溫度下烘 1h。 e） 1 出放入干燥器內(nèi)冷卻 30 45 果精確至 g）。 f） 結(jié)果計算： 根據(jù)烘后失去的重量計算種子水分百分率，按以下公式（ 5）計算到小數(shù)點后一位： 種子水分（ %） =1232 M ??×100 ……………………………… （ 5） 式中： 1M —— 樣品盒和蓋的重量， g； 2M —— 樣品盒和蓋及樣品的烘前重量， g； 3M—— 樣品盒和蓋及樣品的烘后重量， g。 注：若一個樣品的兩次測定之間的差距不超過 ，其結(jié)果可用兩次測定值的算術平均數(shù)表示 。否則，重做兩次測定。 T 2016 5 芽試驗 參 照 作物種子檢驗規(guī)程 發(fā)芽試驗執(zhí)行。 測定在規(guī)定的條件和時間內(nèi)長成正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。從經(jīng)充分混合的凈種子中，用數(shù)種設備或手工隨機數(shù)取 400粒，每次重復 100粒， 4次重復，技術規(guī)定如下表 表 苦丁茶種子的發(fā)芽技術規(guī)定 發(fā)芽床 溫度， ℃ 初次計數(shù) 天數(shù)， d 末次計數(shù) 天數(shù)， d 附加說明，包括破除休眠的建議 紙上（ 沙上（ 25 25 60 種子 硬實 ，透水透氣性差， 需破除休眠后用 35℃ 浸種 20h～ 24 吸漲。破除硬實建議：砂紙打磨 種子 ， 濃硫 酸腐蝕 6 苗鑒定 參照《幼苗鑒定手冊》 A 葉留土發(fā)芽類型 常幼苗： a） 完整幼苗：幼苗具有生長良好的初生根及次生根，上胚軸發(fā)育良好，有完整的 2片子葉，完全展開的綠色初生葉 2片，完整的頂芽。 b） 帶有輕微缺陷的幼苗：幼苗的初生根有些許變色或枯斑；有可愈合的或淺度的裂縫或裂口；或初生根雖有缺陷， 但生長有足夠數(shù)量的正常次生根。子葉沒 有功能部分少于原來組織的50 %。上胚軸有些許變色或枯斑；有可愈合的或淺度的裂縫、裂口或破損；有些許扭曲。初生葉沒有功能部分少于葉面積的 50 %，只有 1片初 生葉或 3片初生葉。 c） 次生感染的幼苗：幼苗明顯符合完整幼苗或帶有輕微缺陷正常幼苗的要求，但已受到不是來自種子本身的真菌或細菌的病源感染而致使幼苗的主要構(gòu)造發(fā)病和腐爛。 正常幼苗： a） 受損傷的幼苗：初生根殘缺或缺失，從根尖裂開，次生根又很少或有缺陷。子葉分離或缺失。上胚軸有濃度裂縫或破損，且裂口穿透胚軸。初生葉破損面積超過葉面積 50 %。頂芽缺失。 b） 畸形或不勻稱的幼苗：初生根縮縊，或過于纖細，或陷在種皮內(nèi)，或負向地性，或呈玻璃體狀。子葉變色或壞死。上胚軸縮短增厚，或縮縊，或過度彎曲形成環(huán)狀、螺旋狀，或過于纖T 2016 6 細， 或呈玻璃體狀。初生葉卷曲或畸形，變色或壞死。整株幼苗畸形、兩株融合在一起、黃化或白化、纖細、呈玻璃體狀。 c） 腐爛幼苗：由種子本身攜帶的真菌或細菌引起的初生感染而致使幼苗發(fā)病或腐爛，以致妨礙其正常生長的。 子真實性鑒定 參照 作物種子檢驗規(guī)程 真實性和品種純度鑒定 執(zhí)行。 采用種子外觀形態(tài)法，通過對種子形態(tài)、大小、顏色等表面特征的鑒定能夠快速的檢驗種子的真實性。鑒別依據(jù)見表 表 丁茶種子形態(tài)特征 類別 苦丁茶 . J. 種子 顏色與種皮特質(zhì) 種皮 黃棕色， 表面具 網(wǎng)狀紋理及溝， 石 質(zhì) 大小 千粒重 長 7.0 7.5 4.0 5.0 形狀 種子 長圓形 ；臍條明顯；胚乳白色， 2 片，呈橢圓形。 果皮 顏色與果皮特質(zhì) 核果，紅 色， 球形，宿存花萼 4 裂片，盤狀，內(nèi)含種子 4 粒。 子生活力測定 用生化測定法測定，種子預濕前需機械破皮，每次至少測定 200粒種子，每重復 100粒或少于 100粒的若干重復，技術規(guī)定如下表 表 苦丁茶種子四唑染色技術規(guī)定 染色前的準備 預濕方式 預濕時間 h 溶液濃度 % 35℃ 染色時間， h 鑒定前的處理 有生活力種子允許不染色、較弱或壞死的最大面積 備注 沿平行種臍的遠端切去種子的 30%，切口可見到胚乳。 紙間或水中 紙間 18～20；水中16～ 18 4（暗黑條件下） 除去種皮 胚根頂端 ≤1/3不染色，子葉遠離胚根處 ≤2/3不染色 子健康測定 檢查種子攜帶病菌情況，測定程序如下： T 2016 7 a） 種子外部帶菌情況 從每份樣本中隨機選取 400粒種子 ，放入 100 入 40 取懸浮液 1 2000 r/速離心 10 上清液，再加入 1 00 μ 板培養(yǎng)基上，涂勻，每個處理 4次重復。相同操作條件下設無菌水空白對照。 25 ℃ 黑暗條件下培養(yǎng)，觀察記錄 b） 種子內(nèi)部帶菌情況 將破皮充分吸漲的種子將種皮和種仁分開，用 5 %次氯酸鈉（ 液浸泡種皮 5 仁 3 菌水沖洗 3遍，將同一樣本的種皮和種仁均勻擺放在直徑 15 板培養(yǎng)基上，每皿擺放 100個分別來自 100粒種子的種皮或種仁組 織塊， 4次重復， 25 ℃ 黑暗條件下培養(yǎng)，觀察記錄。 將分離到的真菌分別進行純化、鏡檢和轉(zhuǎn)管保存。根據(jù)真菌培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征進行鑒定。 驗數(shù)據(jù)判定 檢驗數(shù)據(jù)判定按 170250 T 2016 8 附錄 B 種子質(zhì)量檢驗結(jié)果報告單 檢測號： 字第 號 送驗單位 送驗日期 植物名稱 完成檢測日期 品種名稱 檢 驗 員（簽字） 產(chǎn) 地 復 核 員（簽字） 凈 度 分 析 凈種子， % 其他植物種子， % 雜質(zhì)， % 其他植物種子的種類及數(shù)目： （完全 /有限 /簡化檢驗） 雜質(zhì)的種類： 發(fā) 芽 試 驗 正常幼苗， % 不正常幼苗， % 新鮮不發(fā)芽種子， % 硬實， % 死種子， % 發(fā)芽床： ；溫度： ℃ ；試驗持續(xù)時間： d； 發(fā)芽前處理和方法 ： 水分 水分 % 其他 測定 項目 生活力 % 重量（千粒） g 健康狀況： 檢驗結(jié)論或評語： □一級 □二級 □不合格 檢測單位（蓋章） _________________________________