《磺胺類及喹諾酮類藥物的分析ppt課件》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《磺胺類及喹諾酮類藥物的分析ppt課件（44頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

第八章 磺胺類和喹諾酮類藥物的分析,1,第一節(jié) 磺胺類藥物的分析,對氨基苯磺酰胺衍生物,N1取代物：母體結構中磺酰氨基上的一個氫原子被其它基團取代后的衍生物。 N4取代物：母體結構中對位氨基上的一個氫原子被其他基團取代后的衍生物。 N1、N4取代物：母體結構中N1和N 4上各有一個氫原子被取代的衍生物。,2,一、常用藥物的化學結構及理化性質,,常用藥物化學結構,3,兩性化合物：Ar－NH2顯弱堿性；磺酰胺基N1上的H較活潑，即具有一定的酸性。因此可溶于酸性或堿性溶液中。 與金屬離子生成沉淀：銅鹽沉淀的顏色隨N1取代基的不同而異，有的還有顏色變化過程，常用于磺胺類藥物的鑒別。 可發(fā)生重氮化-偶合反應：產生有色沉淀,性 質,4,與芳醛在酸性溶液中縮合：生成有色的希夫堿。 N1上的芳雜環(huán)取代基具有堿性，可與有機堿沉淀劑反應：生成沉淀。 乙?；磻悍疾被洿佐；螅匆阴；?，在顯微鏡下觀察，都具有特殊的結晶形狀，可做鑒別反應。,性 質,5,二、磺胺類藥物的鑒別,1．化學鑒別法 （1）銅鹽反應,可初步區(qū)別結構類似的磺胺藥,6,表8-1 磺胺類藥物與銅鹽的反應,,,7,,（2）重氮化-偶合反應,8,（3）芳伯氨基與芳醛的縮合反應,芳醛： 對二甲氨基苯甲醛、香草醛、水楊醛等,如：與對二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黃色希夫氏堿。,9,N1取代基為含氮雜環(huán)，有一定堿性，可以和有機堿沉淀劑生成沉淀。,（4）N1取代基的反應,10,2．紅外光譜識別法,紅外法具有指紋性，在一定波長下，磺胺類藥物各具有其獨特的吸收光譜圖，可鑒別本類藥物的特征官能團。,圖8-1 磺胺嘧啶的紅外吸收光譜,11,三、磺胺嘧啶的檢查,1．溶液澄清度與顏色的檢查,方法：比色法 要求：澄清無色；如顯色，與黃色3號標準比色液比較，不得更深。,有色的氧化產物——偶氮苯化合物,12,2．有關物質的檢查,目的：控制藥物的純度。 方法：薄層色譜法，主成分自身對照法 雜質的限度：0.5％。,3．干燥失重 105℃干燥至恒重，減失重量≤0.5％。,13,4．酸度 取本品2.0g，加水100mL，置水浴中振搖加熱10分鐘，立即放冷，濾過；分取濾液25mL，加酚酞指示液2 滴與氫氧化鈉滴定(0.1mol/L)0.20mL，應顯粉紅色。 5．熾灼殘渣：不得過0.1％。 6．重金屬：不得過百萬分之十。,14,四、含量測定,1．亞硝酸鈉滴定法 測定原理：利用磺胺類藥物的N1取代物分子中含有芳伯氨基，在0~5℃低溫狀態(tài)下、鹽酸介質中可與亞硝酸鹽發(fā)生重氮化反應，測定磺胺類藥物的含量。,,,15,取供試品約0.5 g，精密稱定，置燒杯中，加水40 mL與鹽酸溶液(1+2)15 mL，然后置于電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑-鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉液滴定液迅速滴定，隨滴隨攪拌。至近終點時，將滴定管的尖端提出液面，用少量的水淋洗，將洗液并人溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，直到電流計指針突然偏轉，并不再回復，即為滴定終點（永停法）。每1mL的亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當于25.03 mg的C10H10N4O2S。,磺胺嘧啶含量測定,16,（1）加入適量KBr （2）酸的種類及用量 芳胺∶鹽酸＝1∶2.5~6mol （3）室溫條件下滴定 （4）滴定速度 （5）指示終點的方法 藥典采用永停法,計算公式：,主要條件：,17,2．非水溶液滴定法,含磺酰亞氨基－SO2－NH－R，其N上的H具有一定酸性（R吸電子效應越強，N上的H越易失去，酸性越強），故可用非水酸堿滴定法測定。,取供試品約0.5g，精密稱定，加二甲基甲酰胺40mL溶解后，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液恰顯藍色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1mL甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當于26.73mg的C11H13N3O3S。,磺胺異噁唑,18,（1） 測定結果準確，終點明顯。 （2）甲醇鈉滴定溶液應臨用前標定。 （3）滴定最好在隔絕空氣中二氧化碳的情況下進行。,計算公式：,討 論：,19,3．紫外分光光度法,僅有單一組分或雖有多種組分，但組分間互不干擾的制劑： 直接采用紫外分光光度法，在待測組分的最大吸收波長處測定吸收度，以對照品比較法或吸收系數(shù)法計算 磺胺嘧啶片的溶出度測定 有多種組分且各組分吸收光譜互相重疊： 采用計算分光光度法 復方磺胺甲噁唑片的含量測定(2000版）,20,磺胺嘧啶片的溶出度測定,,取供試品照溶出度測定漿法，以鹽酸溶液(9→1000)1000mL為溶劑，轉速為100r/min，依法操作，經60min，取溶液5 mL濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置50 mL量瓶中，加0.01 mol/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，在254 nm的波長處測定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系數(shù)（ ）為866計算出每片的溶出量，限度為標示量的70％，應符合規(guī)定。,計算公式如下：,,檢查方法：,21,復方磺胺甲噁唑片含量測定,處方組成： 磺胺甲噁唑 400mg 甲氧芐啶測定 80mg 輔料 適量 測定方法： 雙波長分光光度法,22,雙波長分光光度法(雙波長等吸收法) 當光譜重疊時，在其光譜中選擇兩波長，在選定的波長處，干擾組分有相同的吸收；被測組分與干擾組分的吸收有足夠大的差別。則兩波長處吸光度的差值與被測組份的濃度成正比。,23,因為,所以,可見，在雙波長分光光度法中吸光度的差值與干擾組份B無關。,為測定波長, 為參比波長 A為待測組分, B為干擾組分,24,,磺胺甲噁唑測定：因為磺胺甲噁唑在257nm的波長處有最大吸收,甲氧芐啶在此波長處吸收較小，并在304nm波長附近有一等吸收點，故選擇257nm為測定波長（λ2），在304nm波長附近選擇等吸收波長為參比波長（λ1）。 甲氧芐啶測定：由甲氧芐啶紫外吸收圖譜可知，在239nm波長處甲氧芐啶有較大吸收，而此波長是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波長附近有一等吸收點，故選擇239nm作為甲氧芐啶的測定波長，在295nm波長附近選擇等吸收波長作為參比波長。,波長選擇,25,精密稱取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑對照品50mg與甲氧芐啶對照品10mg，分別置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別作為對照品溶液(1) 與對照品溶液(2) 取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于磺胺甲噁唑50mg與甲氧芐啶10mg），置100ml 量瓶中，加乙醇適量，振搖15分鐘使磺胺甲噁唑與甲氧芐啶溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品母液。,對照品溶液 配制,供試品母液 配制,26,稀釋液的配制：精密量取供試品母液與對照品溶液(1)、(2)各1ml ，分別置50ml量瓶中，各加0.4％氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。 參比波長和測定波長的確定：取對照品溶液(2)的稀釋液，以257nm 為測定波長(λ2)，在304nm 波長附近(每間隔0.5nm)選擇等吸收點波長為參比波長(λ1)，要求△Ａ＝Ａλ2 －Ａλ1 ＝0 。 樣液的測定：再在λ2與λ1波長處分別測定供試品溶液的稀釋液與對照品溶液(1) 的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△Ａ)計算，即得。,磺胺甲噁唑測定,27,稀釋液的配制： 精密量取上述供試品母液與對照品溶液(1)、(2)各2.5ml,分別置50ml 量瓶中，各加鹽酸－氯化鉀溶液〔取0.1mol/L鹽酸溶液75ml與氯化鉀6.9g，加水至1000ml，搖勻〕稀釋至刻度，搖勻，即得。 參比波長和測定波長的確定：照分光光度法取對照品溶液(1) 的稀釋液，以239.0nm 為測定波長(λ2)，在295nm 波長附近(每間隔0.2nm)選擇等吸收點波長為參比波長(λ1)，要求△Ａ＝Ａλ2-Ａλ1 ＝0 ， 樣液的測定：再在λ2 與λ1 波長處分別測定供試品溶液的稀釋液與對照品溶液(2) 的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差值(△Ａ)，計算，即得。,甲氧芐啶測定,28,計算公式,,式中，△AX為供試品溶液稀釋液的吸光度差值； △AR為對照品溶液稀釋液的吸光度差值； mR為SMZ對照品的稱量（mg） m為樣品的稱量（g）； 為平均片重（g/片）。,29,第二節(jié) 氟喹諾酮類藥物的分析,,喹諾酮類藥物是一類化學合成抗菌藥，由于具有抗菌譜廣、抗菌作用強、使用安全及易于制造等優(yōu)點，發(fā)展迅速。 基本母核結構：6-氟-4-喹諾酮-3-羧酸,30,一、幾種常用藥物的化學結構及理化性質,,,環(huán)丙沙星,,氧氟沙星,常用藥物結構,諾氟沙星,培氟殺星,31,理 化 性 質,,顯酸堿兩性 氟喹諾酮類藥物結構分子中都含有羧基及堿性氮原子 溶解性 易溶于堿和酸，在水和乙醇中極微溶解。 紫外區(qū)有特征吸收 具有共軛系統(tǒng),32,二、諾氟沙星的分析,,諾氟沙星：臨床常用消炎藥 化學名：1-乙基-6-氟-4-氧代-l,4-二氫-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸 結構：,性質：結構中有羧基顯酸性，有哌嗪基顯堿性，是兩性化合物。,33,1．鑒別試驗,,（1） N1為叔氨基 （2）F6顯有機氟化物的性質 （3） 紫外吸收特征：5?g/mL本品的0.4％NaOH溶液，λmax＝273nm （4）采用紅外光譜、薄層色譜、HPLC鑒別,34,2．檢查試驗,,（1）溶液的澄清度： 目的：控制堿不溶性雜質的限量 檢查方法：比濁法 指標要求：5份均應澄清；如顯渾濁，與2號濁度標準液比較，均不得更濃。 （2）氟： 限度：含氟量≥ 5.4％（理論5.95％） 偏低原因：原料制備、副反應,35,,（3）有關物質：HPLC法 限度：雜質A≤0.2%。其他單個雜質≤0.5%。其他各雜質的和≤1.0%。 （4）干燥失重：本品易吸收水分。 限度：105℃，減失重量不得過1.0% （5）熾灼殘渣 鉑坩堝 限度：遺留殘渣不得過0.1%。 （6）重金屬 限度： ≤15ppm。,36,3．含量測定,,原理：利用分子中有哌嗪基團顯堿性。 測定方法：取本品約0.25g，精密稱定，加冰醋酸20mL溶解后，加橙黃Ⅳ指示劑，用高氯酸標準滴定溶液(0.1mol/L)滴定至溶液顯紫紅色，并將滴定結果用空白校正。 注意事項：嚴格控制醋酐用量 諾氟沙星分子中哌嗪基為仲胺，容易發(fā)生乙?；磻?。,非水堿量法,37,,色譜條件： 色譜柱：C18柱 流動相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調節(jié)pH值至3.0±0.1）-乙腈（87∶13） 檢測波長：278nm 系統(tǒng)適用性： 諾氟沙星峰與與環(huán)丙沙星峰和依諾沙星峰的分離度均應不小于2.0 定量方法：外標法,高效液相色譜法,38,三、環(huán)丙沙星的分析,,化學名： 1-環(huán)丙基-6-氟-l,4-二氫-4-氧-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧基 結構：,與諾氟沙星的結構區(qū)別是N1上的取代基不同,39,1．鑒別試驗,,紅外光譜法：與對照的圖譜一致。 TLC法：供試品所顯主斑點的顏色位置與對照品的主斑點相同。 水溶液顯氟化物的鑒別反應。 HPLC法：供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。,40,2．檢查試驗,,（1）結晶性：應符合規(guī)定。 （2）水分：卡爾-費休法 含水量應在4.7％～6.7％。 （3）有關物質：高效液相色譜法 雜質A≤0.3%，雜質B,C,D,E均≤0.2%，其他單個雜質≤0.2%，各雜質的和≤0.5%。,41,,（4）溶液的澄清度與顏色 ：比色法 應澄清無色；如顯色，與黃色或黃綠色4號標準比色液比較，不得更深。 （5）干燥失重：五氧化二磷干燥法 120℃減壓干燥6hr，減失重量≤1.0% （6）)熾灼殘渣：鉑坩堝 遺留殘渣不得過0.1%。 （7）重金屬： 含重金屬≤20ppm。,42,,色譜條件： 色譜柱：C18柱 流動相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調節(jié)pH值至3.0±0.1）-乙腈（87∶13） 檢測波長：278nm 系統(tǒng)適用性：環(huán)丙沙星峰與氧氟沙星峰和雜質I峰的分離度均應符合要求。 定量方法：外標法,高效液相色譜法,3．含量測定,43,,（2）間接原子吸收法： 根據(jù)環(huán)丙沙星在弱酸性介質中與雷氏鹽定量生成締合物，用原子吸收法測定沉淀中的Cr含量，間接測定環(huán)丙沙星含量。 （3）紫外分光光度法： 環(huán)丙沙星在稀鹽酸中有紫外吸收的特點，用紫外分光光度法測定含量。,44,