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41 西 壯 族 自 治 區(qū) 地 方 標(biāo) 準(zhǔn) 5/T 2017 病死豬無害化處理堆肥技術(shù)操作規(guī)程 of by 征求意見稿） 2017 - 布 施 廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā)布 2017 I 目 次 前言 ................................................................................. 范圍 ............................................................................... 1 2 術(shù)語和定義 ......................................................................... 1 3 病死豬無害化堆肥技術(shù)前期準(zhǔn)備 ....................................................... 1 4 堆肥工藝 ........................................................................... 1 5 堆肥時(shí)間控制 ....................................................................... 2 6 無害化判定 ......................................................................... 2 7 注意事項(xiàng) ........................................................................... 2 附錄 A ................................................................................ 3 附錄 B（規(guī)范性附錄） 菌株及培養(yǎng)基要求 ................................................ 4 附錄 C ................................................................................ 5 2017 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)按照 2009給出的規(guī)則起草。 本標(biāo)準(zhǔn)由廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局提出。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)良圻原種豬場、賀州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、南寧市武鳴區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、河池市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、桂林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：熊 毅、伍少欽、顏健華、馮淑萍、李軍、郭建剛、胡巧云、何奇松、胡麗萍、 張浩、于俊勇、王孝德、凌丹、韋建華、韋達(dá)有、楊威、彭昊、陳澤祥 。 2017 1 病死豬無害化處理堆肥技術(shù)操作規(guī)程 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了病死豬無害化處理的堆肥前期準(zhǔn)備、堆肥過程中影響因素控制、無害化判定。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于病死豬無害化堆肥處理。 2 術(shù)語和定義 下列術(shù)語和定義適用于本文件。 病死豬 指飼養(yǎng)在養(yǎng)殖場（戶）內(nèi)因病原微生物或不明原因引起發(fā)病而導(dǎo)致的 淘汰豬或 死亡豬。 無害化處理 指將養(yǎng)殖廢棄物（病 死豬等 ）內(nèi)生物性有害物質(zhì)殺滅或降解成無害物質(zhì)、消除其危害的一種技術(shù)。 3 病死豬無害化堆肥技術(shù)前期準(zhǔn)備 肥地點(diǎn)選擇 肥地點(diǎn) 要求地形平坦，地勢稍高，利于排水， 距離居民區(qū)、生活飲用水源地、公路及鐵路等主要交通干線 1000m 以上，距離養(yǎng)殖區(qū) 500應(yīng)位于居民區(qū)和公共建筑群常年主導(dǎo)風(fēng)向的下風(fēng)向。 肥房要求 肥房選址 堆肥房 選址 應(yīng)符合動(dòng)物防疫條件要求，應(yīng)建在相對獨(dú)立的隔離地方，凈、污通道分離，進(jìn) 、 出口分開并安裝有消毒裝置，場面硬化、平滑易于清潔消毒。 肥房要求 堆肥間建于防雨棚內(nèi)，棚屋檐高應(yīng)不少于 風(fēng)良好。堆肥間應(yīng)不少于 4間，每間長、寬、高分別為 U”型布局，即三面圍墻，一面開口，場面和墻面用水泥砂漿硬化。 肥原料準(zhǔn)備 堆肥主料為甘蔗渣或木屑，輔料可選擇畜禽糞便、氮肥、豆渣、微生物菌劑等。 4 堆肥工藝 2017 地面上鋪一層甘蔗渣或木屑做主料，厚約 20 料上放置病死豬，對死亡的基礎(chǔ)公母豬和育肥大豬，應(yīng)預(yù)先進(jìn)行碎尸處理后再堆放（離墻壁 20 大豬尸體、尸塊每個(gè)間隔 15 豬尸體、尸塊上鋪一層 2025度為 60%的甘蔗渣或木屑，甘蔗渣或木屑中可添加一定量的輔料。以此類推，層層堆放，可堆放到 ，最后一層甘蔗渣或木屑厚度為 3040自然通氣狀態(tài)下進(jìn)行發(fā)酵。 專用溫度計(jì)測定堆體 4080120溫度，必須保證堆體內(nèi)物料的溫度要達(dá)到 55℃以上、并持續(xù) 10d 以上。 5 堆肥時(shí)間控制 期堆肥 經(jīng)過 60d～ 90d，堆肥溫度下降 45℃以下，首次熱循環(huán)結(jié)束。此時(shí)病死豬尸體基本被化制，但降解還不夠完全。 期堆肥 溫度下降后將一期堆肥所有的殘余物轉(zhuǎn)移到另一個(gè)空的堆肥房，確保所有的殘余物都被覆蓋。二期堆制過程需要 60d～ 90d，經(jīng)過 60d～ 90d，溫度再次下降至 45℃以下，結(jié)束 堆肥 。 6 無害化判定 以大腸桿菌 109徑 50 μ 密封于含培養(yǎng)基的 2別置于堆肥的上、中、下層，堆肥期到期的前一周取出進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，符合總大腸菌數(shù)量小于 1000 無害化合格的化尸堆可以用于農(nóng)作物施肥，也可以與新的甘蔗渣或木屑混合作為下一次堆肥處理中的碳基礎(chǔ)層。 7 注意事項(xiàng) 肥過程中注意水分控制。堆肥的起始含水率一般為 50%～ 65%，含水量不足，影響發(fā)酵速度，補(bǔ)入適量水分。過于潮濕，即用手?jǐn)D壓時(shí)有水分流出，則添加更多甘蔗渣或木屑。 重 大動(dòng)物疫病及人畜共患病死亡的病死豬尸體不得使用此種方式進(jìn)行處理。 酵過程中，應(yīng)做好防雨措施。 2017 3 附 錄 A （資料性附錄） 實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備配置 要儀器設(shè)備 —— 恒溫?fù)u床； —— 電熱恒溫培養(yǎng)箱。 驗(yàn)工具 —— 水份 測定儀； —— 專用溫度計(jì)； —— 移液器； —— 三角取樣器； —— 平板； —— 接種環(huán)； —— 酒精燈； —— 10μL、 200μ； —— 天平； —— 50 —— 2017 附 錄 B （規(guī)范性附錄） 菌株及培養(yǎng)基要求 腸桿菌 0157:株轉(zhuǎn)基因抗萘啶酮酸 的大腸桿菌 0157:7)菌株，均為實(shí)驗(yàn)室保存菌株，由廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。 品及培養(yǎng)基 萘啶酮酸； 大腸桿菌 即磷酸鹽緩沖液； 溫 80的 即胰蛋白胨培養(yǎng)基； 即麥康凱瓊脂培養(yǎng)基； 即補(bǔ)充了 頭孢克肟 ,亞碲酸鉀， 50萘啶酮酸的山梨醇麥康凱培養(yǎng)基； ，即補(bǔ)充了 20新生霉素， 膽汁鹽 ,磷酸二甲鹽的 以上培養(yǎng)基按照生產(chǎn)廠家說明書進(jìn)行配制，并按上述要求加入特殊物質(zhì)。 2017 5 附 錄 C （規(guī)范性附錄） 大腸桿菌 7的接種和總大腸菌的檢測 腸桿菌的接種 將三株抗萘啶酮酸的 7(7)菌株接種于 100μ g/于 37℃培養(yǎng) 6h，隨后將三份培養(yǎng)液等體積混合 ,以備接種豬肉樣品，所用豬肉樣品經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定沒有抗萘啶 酮酸的 7菌株存在，接種濃度約達(dá) 109 品的采集 用三角形取樣器采集樣品進(jìn)行總大腸菌檢測。堆肥樣品在采集后即冰上保存 ,并于 6 7 的檢測 采用平板計(jì)數(shù)法 ,將樣品用 沖液 10 倍梯度稀釋 ,并涂在 板培養(yǎng)基上 ,37℃過夜培養(yǎng)后計(jì)數(shù) ,每個(gè)樣品兩個(gè)重復(fù)。每個(gè)平板上最多 3 個(gè)單克隆菌株。當(dāng)平板計(jì)數(shù)檢測不到 7時(shí) ,2 個(gè)重復(fù)的 1g 樣品被加入到 9 養(yǎng)基中 ,于 37℃富集 6h,并將富集液用 大 腸桿菌 疫磁珠分離檢測試劑盒 檢測 ,最終確定 7 菌株是否存在。 大腸桿菌的檢測 將 28溫 80的 做 10倍梯度稀釋，隨后涂于麥康凱平板培養(yǎng)基上 ,于 37℃過夜培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。 _________________________________