《廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物源性食品中獸藥殘留量的測(cè)定+液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》編制說(shuō)明》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物源性食品中獸藥殘留量的測(cè)定+液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》編制說(shuō)明（22頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1 廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《 動(dòng)物源性食品 中獸藥殘留 量的 測(cè)定 液相色譜 質(zhì)譜 法》 (征求意見(jiàn)稿 ) 編制說(shuō)明 一、 項(xiàng)目來(lái)源 根據(jù) 《 廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局關(guān)于下達(dá) 2015 年第 二批廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制定（修訂）項(xiàng)目計(jì)劃的通知》（桂質(zhì)監(jiān)函[2015]183 號(hào)）文件要求，由廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院承擔(dān)《動(dòng)物源性食品 中獸藥殘留 量的 測(cè)定 液相色譜 質(zhì)譜法》廣西地方標(biāo)準(zhǔn)的制定工作。本標(biāo)準(zhǔn)同時(shí)也是國(guó)家質(zhì)檢總局課題《動(dòng)物源性食品中獸藥殘留檢測(cè)方法的研究》的科研成果之一。 二、項(xiàng)目背景 藥物在預(yù)防、治療動(dòng)物 疾病中起到積極作用，但 同時(shí)又帶來(lái)了藥物殘留問(wèn)題。我國(guó)是一個(gè) 動(dòng)物源性食品消耗 大國(guó)，隨著養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，越來(lái)越多的藥物被應(yīng)用于 動(dòng)物源性食品養(yǎng)殖 業(yè)生產(chǎn)中，這些藥物的使用幾乎貫穿養(yǎng)殖的全過(guò)程。由于部分養(yǎng)殖戶(hù)不遵守休藥期規(guī)定及未正確使用藥物，造成藥物在 動(dòng)物源性食品中高水平殘留。藥物殘留通過(guò)食物鏈長(zhǎng)期富集而對(duì)人體造成諸如 "三致作用 "、毒性損傷、激素樣作用等危害，嚴(yán)重威脅人體健康，已成為人類(lèi)的隱形殺手。近幾年我國(guó)出口的 動(dòng)物源性食品 因藥物殘留問(wèn)題也屢遭禁運(yùn)。我國(guó)從保障人民群眾健康， 動(dòng)物源性食品養(yǎng)殖業(yè)要持續(xù)健康發(fā)展， 動(dòng)物源性食品 要進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)等 方面的 2 需要，必須要嚴(yán)格控制藥物的使用。 常規(guī)的獸藥殘留檢測(cè)方法有微生物法、酶聯(lián)免疫法和儀器法。微生物法檢測(cè)靈敏度低、準(zhǔn)確性差、檢測(cè)速度慢；酶聯(lián)免疫法雖可以快速、高靈敏度檢測(cè)樣品 , 但不能同時(shí)檢測(cè)多種獸藥；儀器法準(zhǔn)確度高、譜圖明晰、可一次檢測(cè)多種獸藥殘留。目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于獸藥殘留檢測(cè)的報(bào)道多集中于同一類(lèi)獸藥殘留的同時(shí)檢測(cè)，如抗生素類(lèi)藥物、喹諾酮類(lèi)藥物以及磺胺類(lèi)藥物等。而不同類(lèi)獸藥多殘留同時(shí)檢測(cè)的方法，國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家已有相關(guān)報(bào)道 [4]，但是我國(guó)目前國(guó)內(nèi)報(bào)道還很少 [5]。 三、標(biāo)準(zhǔn)制定的目的意義 隨著許多發(fā)達(dá)國(guó)家對(duì)動(dòng) 物性食品中獸藥最高殘留限量規(guī)定越來(lái)越低 , 獸藥殘留分析對(duì)象、樣本數(shù)量的大大增加 , 迫切需要發(fā)展簡(jiǎn)捷、快速、靈敏 , 能同時(shí)處理測(cè)定大批量樣品的獸藥多殘留分析技術(shù)及標(biāo)準(zhǔn)。 動(dòng)物源性食品 中獸藥殘留的主要特點(diǎn)是樣品基質(zhì)復(fù)雜 , 殘留水平低、 干擾物質(zhì)多。不同類(lèi)的獸藥由于極性不同 , 化學(xué)性質(zhì)也不同 , 使得同時(shí)提取、凈化、檢測(cè)多類(lèi)獸藥殘留比較困難。目前我國(guó)已制定的獸藥殘留檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)均是對(duì)某一種或某一類(lèi)獸藥進(jìn)行檢測(cè)分析，如水產(chǎn)品中青霉素類(lèi)藥物多殘留的測(cè)定（ 9682動(dòng)物源食品中激素多殘留檢測(cè)方法（ 21981動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類(lèi)獸藥殘留檢測(cè)方法（ 21317等。但是，對(duì)于多種不同結(jié)構(gòu)類(lèi)型的獸藥進(jìn)行同 3 時(shí)檢測(cè)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)還很少見(jiàn)。美國(guó)、日本等多數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家已有多種獸藥殘留量同時(shí)檢測(cè)方法的報(bào)道。 我國(guó)目前大多數(shù)獸藥殘留檢測(cè)是采用過(guò)凈化小柱的方法進(jìn)行前處理，雖然可以得到相對(duì)單一、干凈的目標(biāo)物，但是凈化小柱成本不容忽視，并且一種檢測(cè)方法只能檢測(cè)一類(lèi)結(jié)構(gòu)的獸藥殘留。起草小組認(rèn)為，使用凈化小柱的目的主要是避免基質(zhì)干擾，不同結(jié)構(gòu)的獸藥極性不同，在色譜柱上是可以得到有效分離的。另外，目前液相色譜 全可以彌補(bǔ)即使化合物在色譜柱上出峰時(shí)間相近，但可以通過(guò)質(zhì)譜解析化合物分子離子特征峰的方式對(duì)化合物進(jìn)行識(shí)別。因此，起草小組認(rèn)為，通過(guò)改進(jìn)前處理方式，完全可以開(kāi)發(fā)出不使用凈化小柱，一次檢測(cè)多種不同結(jié)構(gòu)獸藥殘留的高效、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。 廣西產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院依據(jù) 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部 發(fā)布的第 193 號(hào) 公告 《 食品動(dòng)物禁用的獸藥及其它化合物清單 》 ，針對(duì)公告中標(biāo)出的分屬于 5 類(lèi)不同結(jié)構(gòu)的 8 種不同名稱(chēng)的獸藥殘留量進(jìn)行同時(shí)測(cè)定研究。這 8 種獸藥分別為：氯霉素、玉米赤霉醇、克倫特羅、沙丁 胺醇、西馬特羅、甲硝唑、二甲硝唑和氯丙嗪。 氯霉素屬于酰胺醇類(lèi)抗生素藥物，對(duì) 動(dòng)物源性食品 有很好的廣譜殺菌作用；克倫特羅、沙丁胺醇、西馬特羅同屬于 β 提高動(dòng)物屠后肌肉 生深色肉；甲硝唑 、二甲硝唑同屬于硝基咪唑類(lèi)抗生素藥物，具有廣譜抗厭氧菌和抗原蟲(chóng)作用；氯丙嗪屬于二甲胺類(lèi)抗精神病藥物，可用于控制動(dòng)物 4 精神躁動(dòng)；玉米赤霉醇屬于雌激素類(lèi)藥物，對(duì)動(dòng)植物有增重增產(chǎn)作用。 四、國(guó)內(nèi)相關(guān)法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)情況的說(shuō)明 本標(biāo)準(zhǔn)的格式根據(jù) 規(guī)定編寫(xiě)，引用文件完全符合相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，所引用 的規(guī)范性文件都是現(xiàn)行有效，與現(xiàn)行法律、法規(guī)和有關(guān)國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)相一致。 本標(biāo)準(zhǔn)中 5 類(lèi)不同獸藥單獨(dú)的檢出方法有較多報(bào)道，但是，目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)本標(biāo)準(zhǔn)制定的 8 種 5 類(lèi)禁用獸藥殘留量的同時(shí)檢測(cè)相關(guān)方法的報(bào)道。 五、標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容 本方法采用正己烷飽和乙腈在超聲波條件下對(duì)樣品進(jìn)行提取，提取液經(jīng)離心分離，殘?jiān)谜和轱柡图状?+水溶液溶解，經(jīng)乙腈飽和正己烷液液分配脫脂，液相色譜 物源性食品 中 8 種混合禁用獸藥殘留，取得了較好的檢測(cè)效果。本標(biāo)準(zhǔn)充分考慮了檢測(cè)方法的適用性及采用主要儀器設(shè)備的先進(jìn)性、可靠性和實(shí)用性 。對(duì) 生鮮 動(dòng)物源性食品 中 8 種獸藥殘留量同時(shí)測(cè)定方法進(jìn)行系統(tǒng)研究，主要包括色譜及質(zhì)譜條件的優(yōu)化和前處理提取條件的研究。 （一）色譜及質(zhì)譜條件的優(yōu)化 1 色譜參考條件 譜柱的選擇： 鑒于本方法分離的組分多而且是殘留級(jí)別的微量檢測(cè)，選擇 5 分離度高的色譜分離柱是首要的工作，本方法所使用的超高效液相色譜系統(tǒng)，壓力可達(dá) 15000 用較細(xì)顆粒粒徑固定相的色譜柱，比傳統(tǒng) 以在很高的線速度、流速和反壓下進(jìn)行高效的分離工作，并獲得快速、高分離度的分離，提高靈敏度，減少基 質(zhì)干擾。 起草小組分別選用 4種不同規(guī)格的色譜柱分離 8種獸藥殘留，考察分離結(jié)果。具體色譜柱規(guī)格是： 柱 1： 20 100柱 2： 18(100柱 3： 18(100柱 4： 18(100本標(biāo)準(zhǔn)所選 8 種獸藥分屬于 5 類(lèi)不同結(jié)構(gòu)類(lèi)型，如何尋求并確定一種高效的色譜柱，將各組分 較好分開(kāi)是本課題的難題之一。在篩選色譜柱的實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn) 20 種組分分開(kāi)，但是沙丁胺醇組分的峰與西馬特羅組分的峰有疊加，玉米赤霉醇組分的峰與氯丙嗪組分的峰有疊加，加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)表明，使用該柱氯丙嗪回收率只有 70%以下。 18 柱不能將玉米赤霉醇組分的峰與氯丙嗪組分的峰分開(kāi)，并且對(duì)于大部分組分而言，峰形都不理想。 18 柱不能將沙丁胺醇組分的峰與甲硝唑組分的峰分開(kāi)。 18可以有效的將 8 種組分完全分 開(kāi)，且各組分峰形均很好， 8種獸藥加標(biāo)回收率可在 80%間。綜合考察峰形、分離度及靈敏度，最后 6 選用 18柱。 動(dòng)相的選擇： 由于電噴霧電離質(zhì)譜的離子化是在溶液狀態(tài)中進(jìn)行，因此流動(dòng)相的組成和添加劑的使用除了會(huì)影響目標(biāo)化合物的分離（保留時(shí)間和峰形）外，還會(huì)直接影響到目標(biāo)化合物的離子化效率，從而影響到目標(biāo)化合物的檢測(cè)靈敏度。分別采用甲醇 酸銨水溶液、甲醇 醇 酸水溶液、乙腈 腈 酸水溶液作為流動(dòng)相考察了不同有機(jī)相組成對(duì) 離子化的影響，同時(shí)比較了水相中不同酸堿含量對(duì)靈敏度的影響。由于電離模式的不同，氯霉素和玉米赤霉醇在負(fù)離子模式下，靈敏度最高?？藗愄亓_、沙丁胺醇、西馬特羅、甲硝唑、二甲硝唑和氯丙嗪在正離子模式下，靈敏度最高。我們考察了不同電離模式下，流動(dòng)相組成對(duì)目標(biāo)物靈敏度的影響。實(shí)驗(yàn)表明，正離子模式下，以甲醇 酸水溶液作為流動(dòng)相的靈敏度。不同水相的結(jié)果比較表明， 酸添加量的靈敏度高于其他添加劑。 酸銨的添加明顯會(huì)導(dǎo)致甲硝唑與地美硝唑的離子 抑制效應(yīng)，降低了靈敏度；正離子模式下，以純水作為流動(dòng)相，不僅導(dǎo)致氯丙嗪組分拖峰嚴(yán)重，靈敏度降低，而且甲硝唑組分與沙丁胺醇組分的出峰時(shí)間重合，氯霉素組分與克倫特羅組分的出峰時(shí)間重合。但在負(fù)離子模式下，甲醇 米赤霉醇的靈敏度。因此，本方法選用了甲醇和 酸水溶液作為正離子模 7 式下的流動(dòng)相，甲醇和水溶液作為負(fù)離子模式下的流動(dòng)相，并優(yōu)化得到了最佳的洗脫程序。在相應(yīng)洗脫程序下， 8種獸藥能得到較好的分離度和色譜峰形。 考色譜條件 色譜柱： 18柱（ 100柱溫：35℃，樣品溫度： 25℃，進(jìn)樣體積： 20 離子模式下流動(dòng)相A 為含 甲酸水溶液，流動(dòng)相 B 為甲醇，流速為 0.3 mL/表 1）。線性流動(dòng)相梯度洗脫條件見(jiàn)表 1。負(fù)離子模式下流動(dòng)相 A 為含水溶液，流動(dòng)相 B 為甲醇，流速為 0.3 mL/表 2）。 表 1 正離子模式流動(dòng)相梯度洗脫程序 時(shí)間 / 醇 / % 甲酸水溶液 / % 0 90 起始 0 30 6 0 30 6 5 5 6 5 5 6 0 90 6 0 90 6 表 2 負(fù)離子模式流動(dòng)相梯度洗脫程序 時(shí)間 / 醇 / % 水溶液 / % 0 90 起始 0 90 5 5 5 5 5 5 5 0 90 5 0 90 5 2 質(zhì)譜條件的選擇： 電離模式：采用 描；正離子模式儀器參數(shù)：氣簾氣：40，碰撞氣：中，離子噴霧電壓： 4500V，離子源溫度： 550℃， 8 離子源氣 1： 55，離子源氣 2： 55；接口加熱器：開(kāi)；采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè) 離子模式儀器參數(shù)：氣簾氣： 40，碰撞氣：中，離子噴霧電壓： 子源溫度： 550℃，離子源氣 1： 55，離子源氣 2： 55；接口加熱器：開(kāi)；采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè) 體參數(shù)如表 3 所示。 表 3 8 種禁用獸藥保留時(shí)間與多反應(yīng)監(jiān)測(cè)條件 序號(hào) 中文名稱(chēng) 英文名稱(chēng) 保留時(shí)間 定性離子對(duì) 定量離子對(duì) 去簇電壓 碰撞能量 （ （ m/z） （ m/z） （ V） （ V） 1 氯霉素 80 80 玉米赤霉醇 80 29 克倫特羅 0 0 38 0 38 4 沙丁胺醇 0 26 0 西馬特羅 0 70 22 31 6 甲硝唑 0 0 31 7 地美硝唑 2 2 38 8 氯丙嗪 0 0 66 采用流動(dòng)注射泵連續(xù)進(jìn)樣，對(duì) 8 種獸藥各組分的質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，在正離子和負(fù)離子模式下進(jìn)行全掃描，結(jié)果表明：在正離子模式下，克倫特羅、沙丁胺醇、西馬特羅、甲硝唑、地美硝唑、氯丙嗪全掃描的分子離子 [M+H]+最理想。在負(fù)離子模式下，氯霉素、玉米赤霉醇全掃描的分子離 子 [最理想。同時(shí)分別對(duì)50 ng/單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分子離子全掃描，然后以分子離子 9 為母離子，對(duì)其子離子進(jìn)行掃描 ,找到兩至三個(gè)相應(yīng)信號(hào)穩(wěn)定的子離子作為定性子離子，相應(yīng)信號(hào)較強(qiáng)的子離子作為定量子離子，并優(yōu)化得到每種獸藥的母離子和子離子所需的最佳錐孔電壓和碰撞能量。最后以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（ 式對(duì) 8 種獸藥殘留進(jìn)行掃描。 （二）提取條件的優(yōu)化 由于是多種不同種類(lèi)及結(jié)構(gòu)的獸藥，不同型號(hào)的固相小柱對(duì)不同結(jié)構(gòu)的化合物吸附能力不同，因此樣品采用液液萃取法凈化。 正己烷可用于除油等非極性雜質(zhì)，但是單純用正己烷除 油容易造成損失，本實(shí)驗(yàn)采取乙腈飽和正己烷溶液與乙腈一起對(duì)樣品進(jìn)行液液分離，減少獸藥提取損失。采用甲醇水飽和的正己烷溶液二次萃取也是同樣道理。經(jīng)過(guò)該方法凈化后，樣品提取溶液顏色明顯變淺，雜質(zhì)大大減少，能有效延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，減少樣品的離子抑制干擾，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。 （三）定量和定性方式的確定 目前常用的定量方式有外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法和基質(zhì)校正三種定量方法，在本標(biāo)準(zhǔn)的制定過(guò)程中，分別試驗(yàn)了這三種方式，由于實(shí)際樣品中存在較強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)，普通外標(biāo)法使得回收率非常低，不能達(dá)到相關(guān)要求；內(nèi)標(biāo)法回收率很好，但成本較高；基 質(zhì)校正法既克服了基質(zhì)效應(yīng)，又降低了檢測(cè)成本。所以本標(biāo)準(zhǔn)最終選擇基質(zhì)校正法作為定量方法。 （四）方法線性范圍和檢出限 準(zhǔn)備空白（陰性）樣品（魚(yú)肉），取約 品，制備成 10 含 8 種混合獸藥 ng/0.1 ng/0.5 ng/1 ng/ ng/10 ng/操作規(guī)范進(jìn)行操作。以添加濃度為橫坐標(biāo)，以響應(yīng)值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 用（ ng/準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣分析，結(jié)果表明，克倫特羅、沙丁胺醇、西馬特羅、氯霉素、氯丙嗪在（ ng/硝唑、地美硝唑、玉米赤酶醇在（ ng/準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)均大于 性良好。方法檢出限（ 空白樣品基質(zhì)稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度出峰時(shí)，取信噪比 S/N = 3 計(jì)算得出。定量限（ 以空白樣品基質(zhì)稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度出峰時(shí)，取信噪比 S/N = 10 計(jì)算得出。 8 種禁用獸藥的檢出限在（ ng/ 4），可以滿足獸藥殘留痕量分析的需求。 表 4 方法檢出限、定量限、線性范圍、線性方程和相關(guān)系數(shù) 序號(hào) 中文 名稱(chēng) 性范圍 線性方程 相關(guān)系數(shù) （ ng/ 氯丙嗪 10.0 y=05x+03 克倫特羅 10.0 y=05x+04 沙丁胺醇 10.0 y=05x+04 4 西馬特羅 10.0 y=05x+03 5 甲硝唑 10.0 y=05x+04 地美硝唑 10.0 y=05x+04 玉米赤霉醇 10.0 y=05x+03 氯霉素 10.0 y=05x+03 五） 本標(biāo)準(zhǔn)中各獸藥檢出限與我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中獸藥檢 11 出限比較 本標(biāo)準(zhǔn)氯霉素、克倫特羅、沙丁胺醇、氯丙嗪和玉米赤霉醇的檢出 限為 g/馬特羅、甲硝唑和地美硝唑的檢出限為 g/方法進(jìn)樣量為 20 μL。本標(biāo)準(zhǔn)方法中克倫特羅、沙丁胺醇、 氯丙嗪、地美硝唑等 4 種獸藥殘留量檢出限等同于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)， 玉米赤霉醇 1 種獸藥殘留量檢出限略高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，西馬特羅、甲硝唑和氯霉素 等 3 種獸藥殘留量檢出限略低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（見(jiàn)表 5）。 表 5 國(guó)家現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢出限與本標(biāo)準(zhǔn)檢出限比較一覽表 序號(hào) 檢測(cè)項(xiàng)目 檢 測(cè) 標(biāo) 準(zhǔn) 檢測(cè)方法 檢出限 ,μg/標(biāo)準(zhǔn)檢出限 ,μg/ 氯霉素 20756 《可食動(dòng)物肌肉、肝臟和水 產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考?xì)埩袅康臏y(cè)定 液相色譜 S 2 玉米赤霉 醇 23218動(dòng)物源性食品中玉米赤霉醇?xì)埩袅康臏y(cè)定 液相色譜 S 3 西馬特羅 22286動(dòng)物源性食品中多種 β液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》 S 4 沙丁胺醇 5 克倫特羅 6 甲硝唑 21318動(dòng)物源性食品中硝基咪唑殘留量檢驗(yàn)方法》 S 7 地美硝唑 8 氯丙嗪 20763豬腎和肌肉組織中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安殘留量的測(cè)定 液相色譜 S 本 標(biāo)準(zhǔn)制定的方法可同時(shí)測(cè)定 8 種 5 類(lèi)不同結(jié)構(gòu)的 獸藥殘留量，與我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)相比：在檢測(cè)成本上減少了凈化小柱的使用，降低檢測(cè)成 本；在檢驗(yàn)效率上，減少檢測(cè) 5 類(lèi)不同結(jié)構(gòu)獸 12 藥的人工、溶劑試劑等費(fèi)用，有效提高檢驗(yàn)效率。本標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布，對(duì)推動(dòng)我國(guó) 動(dòng)物源性食品 禁用獸藥快速檢測(cè)及監(jiān)管具有十分重要的意義。 （五）檢測(cè)方法的回收率實(shí)驗(yàn) 為了驗(yàn)證本標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可靠性，我們對(duì)草魚(yú)、對(duì)蝦、花蛤 、雞和 豬肉 5 份不同樣品進(jìn)行了加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表 6。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明 ,方法的回收率在 73%范圍內(nèi) ,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度 于 間，靈敏度滿足國(guó)內(nèi)外獸藥殘留檢測(cè)要求，定量結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 13 表 6 8 種獸藥加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果 獸藥名稱(chēng) 動(dòng)物源性食品種類(lèi) 添加濃度 /（ μg/ 測(cè)定值 /（ μg/ 回收率/(%) 添加濃度 /（ μg/ 測(cè)定值 /（ μg/ 回收率/(%) 添加濃度 /（ μg/ 測(cè)定值 /（ μg/ 回收率/(%) %） 1 氯霉素 草魚(yú) 80% 93% 7% 對(duì)蝦 74% 90% 9% 花 蛤 82% 97% 7% 雞 4% 7% 00% 肉 8% 02% 3% 玉米赤霉醇 草魚(yú) 92% 101% 16% 對(duì)蝦 90% 104% 24% 花蛤 94% 89% 01% 雞 86% 96% 9% 豬肉 98% 04% 6% 3 克倫特羅 草魚(yú) 96% 99% 03% 對(duì)蝦 106% 103% 0% 花蛤 82% 89% 01% 雞 6% 1% 6% 肉 8% 00% 9% 4 沙丁胺醇 草魚(yú) 73% 88% 4% 對(duì)蝦 96% 93% 6% 花蛤 80% 89% 7% 雞 8% 5% 7% 肉 4% 1% 6% 14 獸藥名稱(chēng) 動(dòng)物源性食品種類(lèi) 添加濃度 /（ μg/ 測(cè)定值 /（ μg/ 回收率/(%) 添加濃度 /（ μg/ 測(cè)定值 /（ μg/ 回收率/(%) 添加濃度 /（ μg/ 測(cè)定值 /（ μg/ 回收率/(%) %） 5 西馬特羅 草魚(yú) 80% 87% 4% 對(duì)蝦 107% 98% 3% 花蛤 96% 98% 00% 雞 08% 04% 8% 肉 8% 94% 9% 6 甲硝唑 草魚(yú) 96% 94% 6% 對(duì)蝦 98% 93% 0% 花蛤 91% 101% 96% 雞 00% 6% 8% 肉 5% 7% 9% 7 地美硝唑 草魚(yú) 100% 98% 06% 對(duì)蝦 98% 98% 89% 花蛤 97% 105% 5% 雞 2% 7% 7% 肉 06% 5% 4% 8 氯丙嗪 草魚(yú) 88% 110% 5% 對(duì)蝦 96% 110% 22% 花蛤 86% 84% 4% 雞 2% 7% 8% 肉 4% 01% 0% 15 （六）樣品的實(shí)際檢測(cè) 采用本檢測(cè)方法對(duì)不同 生鮮 動(dòng)物源性 樣品進(jìn)行檢測(cè)，分別檢測(cè)了黃骨魚(yú)、鯉魚(yú)、牡礪 、牛肉、黑土豬肉、土雞 、西洋鴨、雞蛋 等樣品 47個(gè)，均未檢出目標(biāo)獸藥殘留。 （七）不同檢測(cè)單位驗(yàn)證 外送 實(shí)驗(yàn)樣品到廣西壯族自治區(qū)分析測(cè)試研究中心檢測(cè)，自治區(qū)分析測(cè)試中心 按照該方法在豬肉中添加 5 μg/品回收率為 86% 8 種獸藥檢出限分別為：氯霉素、玉米赤霉醇、克倫特羅、沙丁胺醇、氯丙嗪的檢出限為 g/馬特羅、甲硝唑、地美硝唑的檢出限為 g/使用該方法進(jìn)行豬肉中 8種獸藥殘留檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為未檢出。 驗(yàn)證報(bào)告見(jiàn)附件 1。 本測(cè)定方法經(jīng)過(guò)廣西壯族自治區(qū)分析測(cè)試中心試驗(yàn)驗(yàn)證，檢測(cè) 結(jié)果基本一致，表明本檢測(cè)方法確實(shí)可行，檢測(cè)數(shù)據(jù)充足、可靠。 五、結(jié)論 為了驗(yàn)證本檢測(cè)方法可行，根據(jù)多批不同來(lái)源的實(shí)際樣品測(cè)定結(jié)果，對(duì)本試驗(yàn)的方法進(jìn)行反復(fù)比較選擇和試驗(yàn)，經(jīng)多次試驗(yàn)以及多批次樣品檢測(cè)驗(yàn)證，制定出本方法標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定出 動(dòng)物源性食品 中氯丙嗪、克倫特羅、沙丁胺、西馬特羅、甲硝唑、地美硝唑、玉米赤霉醇和氯霉素等 8 種獸藥殘留含量的液相色譜 質(zhì)譜法 測(cè)定方法。主要試驗(yàn)方法的依據(jù) 16 為參照國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，精密度和回收率符合規(guī)范要求，試驗(yàn)操作符合國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。 六、 主要參考文獻(xiàn)（引用的法律法規(guī)和有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)） 1、 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ 6682696;1987） 2、 3016 水產(chǎn)品抽樣方法 3、 763肉、豬肝、豬尿抽樣方法 4、 (a) 藥等同時(shí)檢測(cè)方法Ⅰ（畜、水產(chǎn)品）》。 (b) 藥等同時(shí)檢測(cè) 方法 Ⅱ（畜、水產(chǎn)品） 》 5、 (a)王舒婷，慕慧，張艷偉，楊云，獸藥多殘留分析中前處理與檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展，中國(guó)獸藥雜志， 2008， 42，43 (b)曹湛，武力，向蓉，曾振靈，獸藥殘留分析技術(shù)研究進(jìn)展，中國(guó)畜牧獸醫(yī)， 2008， 35， 95 《動(dòng)物源性食品中獸藥殘留量的測(cè)定 液相色譜 質(zhì)譜法》編制小組 2016年 3 月 28日 17 附件 1 18 19 20 21 22