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2019-2020年高考生物重點(diǎn)考點(diǎn)突破 生物技術(shù)實(shí)踐 一、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 1.（浙江省五校聯(lián)盟xx屆高三下學(xué)期第一次聯(lián)考）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 下面是有關(guān)微生物的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答： （1）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作。實(shí)驗(yàn)前所需的各種器材如三角燒瓶、培養(yǎng)皿等需要經(jīng)過(guò) 法滅菌。 （2）配置培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”的規(guī)律，通常在培養(yǎng)基中加入 作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還需要考慮溫度、滲透壓和 等條件。 （3）大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中，在LB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行 ，培養(yǎng)液經(jīng) 后，在LB固體培養(yǎng)基上進(jìn)行 ，并將培養(yǎng)皿 放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，可以獲得右圖效果。通常對(duì)獲得的純菌種可以依據(jù) 的形狀、大小等特征進(jìn)行初步的鑒定。 （4）微生物與人類的生活關(guān)系越來(lái)越密切，在制作果酒、果醋、泡菜的過(guò)程中，分別用到的主要微生物分別是 。 A．酵母菌、乳酸菌、乳酸菌 B．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 C．乳酸菌、醋酸菌、酵母菌 D．酵母菌、乳酸菌、醋酸菌 2.（余杭高級(jí)中學(xué)xx屆高三適應(yīng)性考試）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊(10分) （1）下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方： A組 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 葡萄糖 尿素 瓊脂糖 1.4g] 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g B組 蛋白胨 酵母提取物 氯化鈉 瓊脂 10.0g 5.0g 10.0g 20.0g （兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后，均用蒸餾水定容至1000ml） 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，常用 ① 組培養(yǎng)基，對(duì)該培養(yǎng)基通常采取 ② 滅菌；分離大腸桿菌常用劃線分離和涂布分離，其中涂布分離的優(yōu)點(diǎn)是 ③ 。 （2）在制備尿素固體培養(yǎng)基時(shí)，需加入瓊脂糖而不能用瓊脂配制的原因是 ④ 。在分離以尿素為唯一氮源的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中加入酚紅的目的是　　?、荨　　? A．篩選出能分解尿素的細(xì)菌 B．對(duì)分離的菌落作進(jìn)一步鑒定 C．培養(yǎng)基中的酚紅可作為細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng) D．若酚紅變藍(lán)就能認(rèn)定該菌能分解尿素 （3）果酒和果醋的制作充分利用了不同的微生物在特定的條件下的代謝產(chǎn)物，在果酒制作中利用 ⑥ 在無(wú)氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，當(dāng)發(fā)酵瓶中停止 ⑦ ，即表示發(fā)酵完畢；在果醋制作中利用 ⑧ 在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸，發(fā)酵過(guò)程中每天用pH試紙檢測(cè)流出液的pH監(jiān)控發(fā)酵進(jìn)行的情況，等到流出液的pH ⑨ 時(shí)停止實(shí)驗(yàn)。 3.（浙大附中xx屆高三5月模擬考試）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 大腸桿菌是生活在人和高等動(dòng)物體內(nèi)的一種常見(jiàn)細(xì)菌，在飲用水的檢測(cè)中常用它作為水源是否受到污染的指示菌，在遺傳學(xué)上常作為實(shí)驗(yàn)材料，在基因工程中常用它作為受體細(xì)胞，為人類的健康和科學(xué)技術(shù)的發(fā)展做出了許多貢獻(xiàn)。請(qǐng)回答下列有關(guān)大腸桿菌的問(wèn)題： （1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮 ① 、 ② 和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、 ③ 等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。 （2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行 ④ ；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能損傷DNA的結(jié)構(gòu)，還能 ⑤ 。 （3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間， ⑥ 。 （4）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，下列對(duì)操作過(guò)程說(shuō)法不妥的是 ⑦ 。 A．嚴(yán)格操作、多次重復(fù) B．保證待測(cè)樣品稀釋的濃度比較合適 C．倒平板培養(yǎng) D．計(jì)數(shù)所有菌落，取其平均值 （5） 通常對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小、硬度和顏色等 ⑧ 對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定（或分類）。 （6） 若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò) ⑨ 處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 二、分離以尿素為氮源的微生物 1.（杭州市xx屆高三第二次教學(xué)質(zhì)量檢測(cè)）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊(10分) 下圖是“分離以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)的基本流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： （1）A過(guò)程配制的培養(yǎng)基有 ① 和 ② 。配制過(guò)程中要用 ③ 作為培養(yǎng)基的凝固劑。 （2）B過(guò)程，需要利用 ④ 法滅菌，尿素溶液用 ⑤ 使之無(wú)菌。 （3）E過(guò)程用到的工具為 ⑥ ，使用前需浸泡在70%酒精中 ⑦ 。 （4）F過(guò)程發(fā)現(xiàn)有脲酶的細(xì)菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)著色環(huán)帶，是因?yàn)榕囵B(yǎng)基中指示劑 ⑧ 變紅。 （5）稀釋倍數(shù)適當(dāng)，與實(shí)際活菌數(shù)相比，用涂布分離法測(cè)定得到的活菌數(shù) ⑨ 。 A.多 B.少 C.相等 D.幾乎為零 2.（浙江省名校新高考研究聯(lián)盟xx屆高三第二次聯(lián)考）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） （1）下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方： A組 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 葡萄糖 尿素 瓊脂糖 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g B組 蛋白胨 酵母提取物 氯化鈉 瓊脂 10.0g 5.0g 10.0g 20.0g （兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后，均用蒸餾水定容至1000ml） 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，常用 ① 組培養(yǎng)基，對(duì)該培養(yǎng)基通常采取 ② 滅菌；分離大腸桿菌常用劃線分離和涂布分離，其中涂布分離的優(yōu)點(diǎn)是 ③ 。 （2）在制備尿素固體培養(yǎng)基時(shí)，需加入瓊脂糖而不能用瓊脂配制的原因是 ④ 。在分離以尿素為唯一氮源的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中加入酚紅的目的是　　?、荨　　? A．篩選出能分解尿素的細(xì)菌 B．對(duì)分離的菌落作進(jìn)一步鑒定 C．培養(yǎng)基中的酚紅可作為細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng) D．若酚紅變藍(lán)就能認(rèn)定該菌能分解尿素 （3）果酒和果醋的制作充分利用了不同的微生物在特定的條件下的代謝產(chǎn)物，在果酒制作中利用 ⑥ 在無(wú)氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，當(dāng)發(fā)酵瓶中停止 ⑦ ，即表示發(fā)酵完畢；在果醋制作中利用 ⑧ 在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸，發(fā)酵過(guò)程中每天用pH試紙檢測(cè)流出液的pH監(jiān)控發(fā)酵進(jìn)行的情況，等到流出液的pH ⑨ 時(shí)停止實(shí)驗(yàn)。 3.（浙江省普通高等學(xué)校xx屆高三招生適應(yīng)性考試） “生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 根據(jù)下列實(shí)驗(yàn)操作的流程，回答相關(guān)問(wèn)題： A 制備培養(yǎng)基 → → 倒平板 B 稱土樣→梯度稀釋菌液→ → → 培養(yǎng) → 觀察、計(jì)數(shù)、鑒別。 （1）步驟A為 ① ，步驟B為 ② 。然后將培養(yǎng)皿 ③ 放到37℃的恒溫箱中培養(yǎng) （2）要判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可設(shè)置 ④ 作為對(duì)照。 （3）用土壤稀釋液來(lái)分離以尿素為氮源的微生物，取土壤稀釋液分別加到 ⑤ 和 ⑥ 的培養(yǎng)皿中，用玻璃刮刀在酒精燈火焰旁將菌液涂布到整個(gè)平面上。培養(yǎng)24～48h。某些細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn)著色環(huán)帶的原因是 ⑦ ，使得培養(yǎng)基中的酚紅指示劑變?yōu)榧t色。 （4）在做分離以尿素為氮源的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲同學(xué)從某個(gè)培養(yǎng)基中篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)在對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基中只篩選出大約50個(gè)菌落。出現(xiàn)甲同學(xué)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的原因可能是 ⑧ ①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基污染 ③由于操作失誤 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ 三、果汁中的果膠和果膠酶 我國(guó)水果生產(chǎn)發(fā)展迅速，由于收獲的季節(jié)性強(qiáng)，易造成積壓，腐爛變質(zhì)，為了解決上述問(wèn)題且滿足不同人群的需求，可以加工制作果汁、果酒、果醋等。 在果汁生產(chǎn)中用到果膠酶，某課題研究小組為了探究果膠酶的某些特性，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)： (1)實(shí)驗(yàn)方法：如圖中所示的順序進(jìn)行操作。 (2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行了相同時(shí)間的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖所示： ①中自變量是溫度，除此之外還可用 表示。 A、酶的濃度 B、蘋果泥的量 C、水的加入量 D、pH ②圖中的縱坐標(biāo)還可用 來(lái)表示。 ③實(shí)驗(yàn)小組改變了實(shí)驗(yàn)條件后重復(fù)做實(shí)驗(yàn)，得到曲線乙，蘋果汁的澄清度最高點(diǎn)對(duì)應(yīng)的橫坐標(biāo)是同一位置的原因是 。 ④步驟b中在果膠酶和蘋果泥混合前，將兩者分裝在不同試管中，恒溫的目的是 。 四、淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè) （鎮(zhèn)海中學(xué)xx屆高三年級(jí)五月份模擬考試）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） (1) 環(huán)衛(wèi)部門要檢測(cè)某地飲用水的大腸桿菌超標(biāo)問(wèn)題，通常采用 ① 法。用此法分離時(shí)，需要將待測(cè)水樣稀釋若干倍，再取 ② mL稀釋度不同的待測(cè)樣品加在固體培養(yǎng)基上，用 ③ 涂布在培養(yǎng)基平面上，蓋好培養(yǎng)皿并將培養(yǎng)皿倒置，在37oC恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)l2—24小時(shí)，可以得到相互分開(kāi)的菌落。計(jì)數(shù)時(shí)為了減小誤差，每個(gè)水樣 ④ 。 （2）下圖為裝有固定化酶a的實(shí)驗(yàn)裝置。其中b是反應(yīng)柱，c是催化底物。若裝置中的固定化酶為a—淀粉酶，則通常是利用吸附法進(jìn)行固定的，介質(zhì)一般為 ⑤ 。利用該裝置進(jìn)行淀粉水解實(shí)驗(yàn)時(shí)，在漏斗中加入反應(yīng)液后的操作是 ⑥ ，以保證反應(yīng)充分。對(duì)流出的液體用 ⑦ 檢測(cè)，若呈現(xiàn) ⑧ 色，說(shuō)明淀粉被水解成糊精。 (2)下圖4支試管分別代表4種微生物在半固體培養(yǎng)基(瓊脂含量3.5g/L)中的生長(zhǎng)狀態(tài)，最可能是大腸桿菌生長(zhǎng)狀態(tài)的是 ⑨ 。 A.溫度?? B.水分?? C.pH? D.營(yíng)養(yǎng) 五、果酒及果醋的制作 1.（xx年高考模擬沖刺（提優(yōu)）測(cè)試二）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊(10分) 如圖簡(jiǎn)單表示了葡萄酒的釀制過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析： （1）在上述葡萄酒的釀制過(guò)程，甲裝置中酵母菌的呼吸類型主要是為 ① 。在果酒制作過(guò)程中，一般要先用KMnO4溶液浸泡葡萄一段時(shí)間，這樣做的目的是　　　?、凇　　?。 （2）下列敘述中不正確的是（ ③ ） A．在甲中進(jìn)行攪拌是為了增加氧溶量 B．在乙中，酵母菌數(shù)量將快速增長(zhǎng)，然后維持穩(wěn)定 C．甲與乙放出的氣體主要是二氧化碳 D．揭開(kāi)丙容器的蓋子，可能會(huì)有醋酸產(chǎn)生 （3）在配制酵母斜面培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑，如 ④ 。培養(yǎng)基配好后，置于高壓蒸汽鍋內(nèi)．在壓強(qiáng)為0.1MPa(1kg／cm2)、溫度為 ⑤ ℃的條件下，維持一段時(shí)問(wèn)，可達(dá)到滅菌的目的。 （4）果醋是最受歡迎的飲料之一，其生產(chǎn)過(guò)程中利用了 ⑥ 的發(fā)酵作用。在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中，果醋制作往往在果酒的基礎(chǔ)上進(jìn)行，其相關(guān)的反應(yīng)式為： ⑦ 。 （5）果汁在年輕人群體中有相當(dāng)大的消費(fèi)群體。利用葡萄等水果可以生產(chǎn)出各種風(fēng)味的果汁。果汁生產(chǎn)的原料來(lái)源是水果粉碎后的果肉漿。要獲得澄清的果汁需要用到 ⑧ 。 （6）泡菜是又一廣受歡迎的大眾食品，在泡菜的腌制過(guò)程起作用的主要是 ⑨ 和乳酸菌，在無(wú)氧條件下，微生物利用菜中的糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵．產(chǎn)生 ⑩ 等發(fā)酵產(chǎn)物。 2.（浙江省六校xx屆高三第一次聯(lián)考）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 從自然界獲得純種的釀酒酵母，基本程序是：配制培養(yǎng)基—接種—培養(yǎng)—觀察記錄—純化培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列有關(guān)的問(wèn)題： （1）酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基？（ ） A．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 B．麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 C．無(wú)土載培培養(yǎng)基 D．MS培養(yǎng)基 （2）采用平板劃線法接種時(shí)，開(kāi)始接種時(shí)要灼燒接種環(huán)，目的是 。要把接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫箱培養(yǎng)，設(shè)置“未接種的培養(yǎng)基”的目的是 。 （3）將得到的純種釀酒酵母接種到葡萄汁中發(fā)酵，如何獲得酒精含量更高的果酒？ 。 （4）把從酵母細(xì)胞中提取的淀粉酶固定在尼龍布上制成固定化酶，與傳統(tǒng)酶應(yīng)用技術(shù)相比，此技術(shù)最顯著的優(yōu)點(diǎn)是 。 （5）某實(shí)驗(yàn)小組欲按上述方法從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，應(yīng)將菌液涂布接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30℃條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈 狀態(tài)放置；篩選時(shí)應(yīng)將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是出現(xiàn)透明圈，則說(shuō)明此種菌能夠 。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用 法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。 六、泡菜的腌制和亞硝酸鹽的測(cè)定 1.（寧波市五校xx屆高三適應(yīng)性考試）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 回答下列有關(guān)發(fā)酵食品加工的問(wèn)題。請(qǐng)?jiān)跇?biāo)有序號(hào)的空白處填空，并將序號(hào)及相應(yīng)答案寫(xiě)在答題紙上： （1）在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，菌種的來(lái)源主要是附在葡萄皮上的 。提高果酒的品質(zhì)，也可以直接在果汁中加入人工培養(yǎng)的菌種。要篩選得到純凈菌種，通常在固體培養(yǎng)基上劃線分離，分離的方法有 和 。 （2）為提高果酒的品質(zhì)及節(jié)約生產(chǎn)成本，廠家已嘗試選用海藻酸鈉作 包埋各種酶制劑，這種技術(shù)叫做 。 （3）果醋是利用 將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸，醋酸發(fā)酵時(shí)，要向發(fā)酵瓶中通入空氣的原因是 ，通空氣的玻璃管中要塞入脫脂棉，用以過(guò)濾空氣，其目的是 。 （4）制作泡菜過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生 等有害物質(zhì)，該物質(zhì)與某些化學(xué)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)后形成紫紅色產(chǎn)物，可以通過(guò) 法估測(cè)出其在泡菜樣品中的含量。 2.（浙江金華十校xx屆高三模擬考試）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 微生物與人類的生活、健康有著密切的聯(lián)系。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題。 （1）在果醋、泡菜和果酒的制作過(guò)程中，均利用相應(yīng)微生物的代謝特點(diǎn)進(jìn)行條件控制，其中需要提供氧氣的是 ① 的制作。泡菜腌制原理是 ② 和 ③ 等主要微生物利用菜中的 ④ 和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)。 （2）根據(jù)微生物的特點(diǎn)，可以利用相應(yīng)的培養(yǎng)基進(jìn)行分離或培養(yǎng)，例如用 ⑤ 培養(yǎng)基分離能產(chǎn)生脲酶的微生物，用 ⑥ 培養(yǎng)基培養(yǎng)蘋果青霉，可提高果膠酶的產(chǎn)量。 （3）在微生物培養(yǎng)或分離過(guò)程中，下列操作不恰當(dāng)?shù)氖? ⑦ A．在超凈臺(tái)中進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)該關(guān)閉紫外燈 B．?dāng)U大培養(yǎng)時(shí)必需保證氧氣的供應(yīng) C．控制液體培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度 D．空白的培養(yǎng)基平板需進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn) （4）利用固體培養(yǎng)基可以進(jìn)行微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)，兩者的培養(yǎng)基明顯不同的是 ⑧ A．需要添加瓊脂 B．需要添加有機(jī)物 C．需要添加激素 D．需要滅菌處理 七、植物的組織培養(yǎng) 1.（臺(tái)州中學(xué)xx屆高三調(diào)研）題號(hào)：17“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 請(qǐng)?jiān)跇?biāo)有序號(hào)的空白處填空，并將序號(hào)及相應(yīng)答案寫(xiě)在答題紙上： (1) 植物組織培養(yǎng)就是取離體植物組織，在 ① 條件下接種到三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的條件，使之產(chǎn)生 ② ，或進(jìn)而生根發(fā)芽。經(jīng)常使用 ③ 培養(yǎng)基，首先用 ④ 相對(duì)較多的培養(yǎng)基，使長(zhǎng)出較多的 ⑤ 。 (2)若使用自然生長(zhǎng)的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)，一般先消毒，不需要用到的溶液有 （ ⑥ ） A．70%酒精 B．5%次氯酸鈉 C．無(wú)菌水 D．蒸餾水 (3)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基必須無(wú)菌，如：用于大腸桿菌的培養(yǎng)和分離的培養(yǎng)基通常用 ⑦ 滅菌；而用于分離以尿素為氮源的微生物的培養(yǎng)基添加尿素后不能用這個(gè)方法滅菌，原因是： ⑧ 。接種后的培養(yǎng)皿 ⑨ 放在37℃的恒溫箱中培養(yǎng)。 2.（寧波市xx屆高三模擬考試） “生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） （1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)植物樣本進(jìn)行消毒，可將植物樣本先放入70%酒精中浸泡l0min，再放入5% ① 溶液中浸泡5min，并重復(fù)一次，最后用無(wú)菌水沖洗。培養(yǎng)基除了含有必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和凝固物質(zhì)外，還必須加入 ② 。消毒后的植物樣本要先后培養(yǎng)在 ③ 培養(yǎng)基和 ④ 培養(yǎng)基中，在合適條件下可培養(yǎng)得到幼苗。幼苗在定植前需經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的鍛煉，即逐漸降低幼苗生活環(huán)境中的 ⑤ ，以使幼苗能適應(yīng)自然環(huán)境。 （2）分離純化所需酵母菌可采用右圖所示兩種方法，圖A的分離方法是 ⑥ 。利用獲得的突變菌和葡萄汁進(jìn)行酒精發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，發(fā)酵過(guò)程中下列方法不能防止雜菌入侵的是（ ⑦ ） A．彎曲玻璃管中加水封口 B．發(fā)酵液中添加某種抑制物如抗菌素 C．發(fā)酵過(guò)程必須保證所有用具都是清潔的 D．人工接種發(fā)酵的葡萄需經(jīng)高錳酸鉀浸泡消毒 （3）在酵母菌數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)中，在某一稀釋倍數(shù)下，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，與事實(shí)更加接近的是 ⑧ 。 A．一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是23 B．兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是22和26，取平均值24 C．三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是2 1、5和52，取平均值26 D．四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25 3.（溫州中學(xué)xx屆高三第三次模擬）“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊(10分) 下面是有關(guān)植物組織培養(yǎng)和大腸桿菌的培養(yǎng)和分離相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答： （1）MS培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基，其母液由大量元素、微量元素和有機(jī)成分組成。MS培養(yǎng)基含有十幾多種化合物，配制不方便也難稱量準(zhǔn)確，可將培養(yǎng)基中的各種成分 ① 分別稱量，配成母液。用時(shí)稀釋。 （2）補(bǔ)充下面菊花組織培養(yǎng)步驟： 制備MS固體培養(yǎng)基 ② 接種 生芽 生根 ③ 定植 （3）(1)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)中，先用LB ④ 進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，再在LB固體平面培養(yǎng)基上進(jìn)行 ⑤ 分離。 （4）補(bǔ)充下面大腸桿菌培養(yǎng)和分離的步驟： 培養(yǎng)基的配制 ⑥ 、超凈工作臺(tái)倒平板、接種 液體培養(yǎng)、分離培養(yǎng)、 ⑦ （5）補(bǔ)充下的操作流程的空白： 參考答案 浙江省五校聯(lián)盟xx屆高三下學(xué)期第一次聯(lián)考“生物技術(shù)實(shí)踐” (1)高壓蒸汽 (2)蛋白胨和酵母提取物 PH (3)擴(kuò)大培養(yǎng) 稀釋 接種 倒置 菌落 (4)B 余杭高級(jí)中學(xué)xx屆高三適應(yīng)性考試 “生物技術(shù)實(shí)踐”模塊 1. ①B ②高壓蒸汽滅菌 ③單菌落更易分開(kāi) 2. ④瓊脂中含有一定量的含氮物質(zhì) ⑤B 3．⑥酵母菌 ⑦出現(xiàn)氣泡 ⑧醋桿菌 ⑨不再減小 浙大附中xx屆高三5月模擬考試 ①溫度 ②酸堿度（PH值） ③生活周期短（或繁殖快）(2) ④滅菌 ⑤使蛋白質(zhì)變性 (3) ⑥觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 (4) ⑦ D (5) ⑧菌落特征 (6) ⑨滅菌 杭州市xx屆高三第二次教學(xué)質(zhì)量檢測(cè) 浙江省名校新高考研究聯(lián)盟xx屆高三第二次聯(lián)考 “生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） 1. ①B ②高壓蒸汽滅菌 ③單菌落更易分開(kāi) 2. ④瓊脂中含有一定量的含氮物質(zhì) ⑤B 3．⑥酵母菌 ⑦出現(xiàn)氣泡 ⑧醋桿菌 ⑨不再減小 浙江省普通高等學(xué)校xx屆高三招生適應(yīng)性考試 果汁中的果膠和果膠酶 答案：(2)①D ②蘋果汁的體積 ③同一種酶的最適溫度是一定的，不會(huì)因酶的濃度、底物量不同而改變 ④保證底物和酶在混合時(shí)的溫度是相同的 鎮(zhèn)海中學(xué)xx屆高三年級(jí)五月份模擬考試“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊 ①涂布分離 ②0.1 ③玻璃刮刀 ④至少要做三組平行實(shí)驗(yàn)，取其平均值 ⑤石英砂 ⑥打開(kāi)活塞1和2，并控制流速 ⑦碘—碘化鉀 ⑧紅 ⑨D xx年高考模擬沖刺（提優(yōu)）測(cè)試二 浙江省六校xx屆高三第一次聯(lián)考“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分） （除第1小題2分外其余每空1分，共10分） （1）B （2）滅菌 檢驗(yàn)培養(yǎng)基（過(guò)程）是否被污染 （3）往葡萄汁中加入適量的蔗糖 （4）可以重復(fù)使用（產(chǎn)品易純化） （5）淀粉 倒置 分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解 （平板）劃線 寧波市五校xx屆高三適應(yīng)性考試 （1）野生酵母菌（酵母菌） 劃線分離法 涂布分離法 （2）載體 固定化酶技術(shù) （3）醋桿菌 醋酸發(fā)酵是一個(gè)氧化過(guò)程，需要氧氣（強(qiáng)調(diào)過(guò)程需要氧氣） 防止微生物進(jìn)入 （4）亞硝酸 光電比色法 浙江金華十校xx屆高三模擬考試 臺(tái)州中學(xué)xx屆高三調(diào)研17．“生物技術(shù)實(shí)踐”模塊（10分）(1) ①無(wú)菌 ②愈傷組織 ③MS ④細(xì)胞分裂素 ⑤叢狀苗 ⑥D(zhuǎn) ⑦高壓蒸汽滅菌法 ⑧培養(yǎng)基的尿素容易受熱分解 ⑨倒置 （⑥2分，其他每空1分，共10分） 寧波市xx屆高三模擬考試 溫州中學(xué)xx屆高三第三次模擬題號(hào)17： ① 擴(kuò)大一定倍數(shù) 。 ②外植體消毒 ③移栽鍛煉 ④液體 ⑤劃線 ⑥ 滅菌 ⑦菌種保存 ⑧蘸取菌液 ⑨灼燒接種環(huán)