高考生物一輪復習 植物組織培養(yǎng)與酶的應用課件.ppt
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高考總復習生物,,選修1 生物技術實踐 學案40 植物組織培養(yǎng)與酶的應用,一、植物組織培養(yǎng)技術,基礎回顧,MS培養(yǎng)基,生長素,細胞分裂素,MS培養(yǎng)基,外植體,移栽,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,基礎回顧,(2)月季的花藥培養(yǎng)過程。 ①過程:材料的選取→材料的___________→接種和培養(yǎng)→________。 ②要挑選完全________的花蕾,確定花粉發(fā)育時期最常用的方法是________法。 3.影響花藥培養(yǎng)的因素: (1)主要因素:____________和______________。 (2)其他因素:親本植株的________、材料的____________及接種________等。,消毒,鑒定和篩選,未開放,醋酸洋紅,材料的選擇,培養(yǎng)基的組成,生長條件,低溫預處理,密度,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,4.實驗操作: (1)材料的選取:月季花藥培養(yǎng)一般選擇________期,細胞核由中央移向細胞一側的時期。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法是________法。 (2)接種:消毒后的花蕾,在無菌條件下除去____________,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。剝離花藥時盡量不要損傷________。 (3)培養(yǎng):溫度控制在__________左右,幼小植株形成后才需要________。如果花藥開裂釋放出胚狀體,必須在花藥開裂后盡快將______________。,基礎回顧,單核,醋酸洋紅,萼片和花瓣,花藥,25 ℃,光照,幼小植株分開,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,二、果膠酶在果汁生產中的作用,基礎回顧,多聚半乳糖醛酸酶,果膠分解酶,細胞壁,化學反應,反應速度,溫度,酶的抑制劑,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,3.研究溫度對果膠酶活性影響的實驗。 (1)實驗方案:確定__________→探討控制溫度的方法和措施。 (2)實驗程序:制備水果泥→制備果膠酶→水果泥與果膠酶分別____________→將水果泥和果膠酶____________→過濾出果汁→記錄果汁量→改變不同溫度后,重復上面實驗。 (3)實驗結果:記錄實驗數(shù)據(jù),并填入表格。 (4)得出結論:獲得的果汁越多,或果汁越澄清,表明果膠酶的活性______。,基礎回顧,溫度梯度,水浴保溫,混合保溫,越高,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,三、探討加酶洗衣粉的洗滌效果,基礎回顧,1.梳理加酶洗衣粉的去污機理。,蛋白質,小分子的肽,甘油,脂肪酸,麥芽糖,葡萄糖,纖維,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,2.探究不同種類加酶洗衣粉的洗滌效果。 (1)實驗原理:酶的催化作用具有________,復合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多,與單一加酶洗衣粉相比,對各種污漬都有較好的洗滌效果。 (2)實驗變量。 ①自變量:__________________。 ②無關變量:其他條件相同且適宜(如__________、__________等)。,基礎回顧,專一性,加酶洗衣粉的種類,溫度,pH,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(3)實驗步驟。,基礎回顧,500 mL,奶漬布,37 ℃,已消失,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,四、酵母細胞的固定化,基礎回顧,1.固定化酶的應用實例。 如用葡萄糖異構酶,將________轉化為果糖。固定化酶技術在反應柱上的孔應該滿足__________無法通過,__________自由出入。 2.固定化細胞技術。 (1)概念:利用________________方法將酶或細胞固定在__________的技術。 (2)方法:包埋法、________法和物理吸附法。,葡萄糖,酶顆粒,反應溶液,物理或化學,一定空間內,化學結合,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(3)實驗操作: 酵母細胞的______ 配制物質的濃度為0.05 mol/L的CaCl2溶液 ↓ 配制________溶液 ↓ 海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合 ↓ ______酵母細胞,基礎回顧,活化,海藻酸鈉,固定化,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,考點1 植物組織培養(yǎng),要點探究,1.植物組織培養(yǎng)技術和花藥離體培養(yǎng)技術的異同。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,2.植物激素與組織培養(yǎng)。 生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素,其作用及特點: (1)在生長素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。 (2)使用順序不同,結果不同,具體如下:,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(2)營養(yǎng):常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。 (3)環(huán)境條件:pH、溫度、光照等條件。如菊花的組織培養(yǎng)所需pH為5.8左右,溫度為18~22 ℃,光照條件為每日用日光燈照射12 h。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,特別提醒 實驗操作中易錯的幾個問題。 (1)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實驗中,應選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝;月季的花藥培養(yǎng)實驗中,應選擇花粉發(fā)育過程中的單核期的花粉進行培養(yǎng)。 (2)外植體消毒:所用消毒劑為體積分數(shù)為70%的酒精和質量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是無菌水。 (3)培養(yǎng)過程:在初期,菊花的組織培養(yǎng)需光照,月季的花藥培養(yǎng)不需光照;而在后期均需光照。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,【例?】 下列關于影響植物組織培養(yǎng)的因素的敘述不正確的是( ) A.幼嫩組織較成熟組織易培養(yǎng)成功 B.給外植體消毒用70%的酒精 C.接種花藥后一段時間內不需要光照,但幼小植株形成后需要光照 D.生長素與細胞分裂素含量之比較高時有利于芽的分化,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,解析:生長素與細胞分裂素含量之比較高時,有利于根的分化;較低時,有利于芽的分化;二者相當時,促進愈傷組織的生長。 答案:D,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,考點2 探究果膠酶活性的影響因素及其用量,要點探究,1.實驗原則。 遵循單一變量原則、對照性原則,嚴格控制變量,盡量減少無關變量的影響。 2.實驗原理。 果膠酶受溫度或pH的影響,在最適溫度或pH時,活性最高,果肉的出汁率、果汁的澄清度都與果膠酶的活性大小成正比。 3.設計實驗。 (1)探究最適溫度時,pH為無關變量,最好是最適pH;探究最適pH時,溫度為無關變量,最好是最適溫度。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(2)探究果膠酶的最適用量時,最適用量是在溫度、pH等適宜條件下測出來的,如果無關變量改變,最適用量也會發(fā)生變化。 特別提醒 (1)果膠酶盡量使用純酶制劑,或不含抑制物的粗酶制劑。 (2)如果隨著酶用量增加,過濾到的果汁體積也增加,這說明酶用量不足。 (3)當酶用量增加到某個值后,增加酶用量,果汁體積不再變化,說明酶用量已經(jīng)足夠,這個數(shù)值就是酶的最適用量。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,【例?】 某實驗小組為探究果膠酶的最適溫度,設計了以下實驗: ①用攪拌器攪拌制備一定量的蘋果泥備用。 ②配制質量分數(shù)為2%的果膠酶溶液備用。 ③按以下操作步驟進行:,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(1)該實驗的自變量是______________,因變量是_________________________________________________。 (2)請?zhí)顚懕砀裰凶帜杆淼臄?shù)值,并解釋原因。 ______________________________________________。 (3)為使效果更明顯,本實驗還要考慮其他因素對酶的影響,請列舉三點: ________________________、_________________________、________________________________________。 (4)本實驗檢測因變量的方法有兩種:______________________________、________________。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,解析:(1)實驗目的是探究果膠酶的最適溫度,因此實驗的自變量是溫度,要檢測的因變量是濾出的果汁量和果汁的澄清度。 (2)6支試管中加入的果泥和果膠酶的量都要相等,因為除自變量以外,其他無關變量要相等。 (3)影響酶活性的因素還有pH和酶與底物的混合程度等方面。 (4)實驗的因變量是果膠酶的活性,可通過比較出汁量和果汁的澄清度來檢測。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,答案:(1)溫度 果汁澄清度或出果汁量 (2)A、B、C、D、E均為8,F(xiàn)、G、H、I、J均為2,這樣可保證除自變量不同以外,其他無關變量都相同 (3)本實驗應將反應混合物調到果膠酶的最適pH 為了使果膠酶與果泥能充分接觸,應盡量將水果泥粉碎 在反應中適當攪拌(其余合理也正確) (4)測果汁澄清度 比較出汁量,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,考點3 探究加酶洗衣粉的洗滌效果實驗中的變量分析,要點探究,1.分析不同溫度對加酶洗衣粉洗滌效果的影響實驗。 (1)實驗變量:水溫,必須設置溫度梯度。 (2)無關變量:水量與水質、洗衣粉用量、衣物質料與大小、浸泡與洗滌時間等,應該保持不變。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,特別提醒 一般設置溫度梯度差為5 ℃較為適宜,洗滌效果最好的溫度不一定是該酶催化的最適溫度,若要測出最適溫度,則應將溫度梯度差縮小到更小(1 ℃)。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,2.分析不同種類洗衣粉對同一污漬或不同污漬洗滌效果的實驗。 (1)實驗原理:酶的催化作用具有專一性,復合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多,與單一加酶洗衣粉相比,對各種污漬都有較好的洗滌效果。 (2)實驗變量: ①自變量:不同種類的加酶洗衣粉。 ②無關變量:其他條件相同且適宜(如溫度、pH等)。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,特別提醒 加酶洗衣粉保存和使用的五個“不”。 (1)不是所有的衣物都適宜用加酶洗衣粉洗滌:堿性蛋白酶能使蛋白質水解,羊毛、蠶絲等富含蛋白質類織物就不能用加酶洗衣粉來洗滌,以免受到破壞。 (2)不是任何條件下加酶洗衣粉的洗滌效果都好于普通洗衣粉:酶活性的發(fā)揮需要適宜的溫度、pH等,必須提供適宜酶活性發(fā)揮的條件,加酶洗衣粉的洗滌效果才能好于普通洗衣粉。 (3)加酶洗衣粉不適宜長時間儲存:加酶洗衣粉中的酶制劑是經(jīng)過特殊處理的,儲存時間太長,防護措施容易失效,導致酶失活,洗滌效果大大減弱。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(4)加酶洗衣粉不適宜與其他洗滌劑共用:加酶洗衣粉常常會與其他洗滌劑中的三聚磷酸鹽反應降低酶的活性,甚至使酶失活。 (5)加酶洗衣粉不是對人體無害:添加了堿性蛋白酶的洗衣粉可以分解人體皮膚表面的蛋白質,使人患過敏性皮炎、濕疹等,因此應避免與這類洗衣粉長時間接觸。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,【例?】 某學生進行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”的課題研究。他的實驗設計如下: ①設置兩組實驗,分別使用蛋白酶洗衣粉和復合酶洗衣粉 ②兩組實驗的洗衣粉用量、被洗滌的衣物量、衣物質地、污染物性質和量、被污染的時間、洗滌時間、洗滌方式等全部設置相同 ③根據(jù)污漬去除程度得出結果 對這個實驗的評價,正確的是( ) A.未設置對照實驗 B.無關變量設置太多,要點探究,A,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,C.沒有自變量 D.因變量不能描述,要點探究,解析:實驗課題是“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”,因此設置的兩組實驗應該是:一組用普通洗衣粉作對照組,另一組用加酶洗衣粉作實驗組。如果設置三組也正確,一組用普通洗衣粉作對照組,實驗組設置使用蛋白酶洗衣粉和復合酶洗衣粉。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,名師點睛 加酶洗衣粉的洗滌效果的探究 (1)判斷加酶洗衣粉洗滌效果的方法:可在洗滌后比較污物的殘留狀況,如已消失、顏色變淺、面積縮小等。 (2)加酶洗衣粉的洗滌效果的探究方法:實驗設計遵循的原則是對照原則和單一變量原則,如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果有何不同時,以控制洗衣粉的種類為變量,其他條件完全一致;同時,普通洗衣粉處理污物與加酶洗衣粉處理污物形成對照實驗。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(3)變量的分析和控制:影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有水溫、水量、水質、洗衣粉的用量、衣物的材質、衣物大小、浸泡時間、洗滌的方式和洗滌的時間等。在選擇適宜的變量作為探究課題的時候,應注意切合實際,如選擇水溫時,我們可以選擇一年中冬季、春季、秋季和夏季的實際常溫5 ℃、15 ℃、25 ℃和35 ℃進行實驗。,要點探究,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,考點4 固定化酶和固定化細胞,要點探究,1.固定化酶和固定化細胞技術。 (1)概念:利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術。 (2)方法及適用對象:,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,一般來講,酶更適合用化學結合和物理吸附法固定化,而細胞多采用包埋法固定化,這是因為個大的細胞難以被吸附或結合,而個小的酶則易從包埋材料中漏出。 2.直接使用酶、固定化酶、固定化細胞的比較:,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,(續(xù)表),要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,特別提醒 混淆固定化酶與固定化細胞 1.固定化細胞使用的都是活細胞,因而為了保證其生長、增殖的需要,應該為其提供一定的營養(yǎng)物質。 2.固定化細胞由于保證了細胞的完整性,因而酶的環(huán)境改變小,所以對酶的活性影響最小。,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,高考命題角度 高考對此類問題常結合酵母細胞的固定化,考查固定化酶與固定化細胞技術的區(qū)別和聯(lián)系。,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,【例?】 下列有關固定化酶和固定化細胞的說法中,正確的是( ) A.某種固定化酶的優(yōu)勢在于能催化一系列生化反應 B.固定化細胞技術只能固定一種酶 C.固定化酶和固定化細胞都能反復使用,但酶的活性迅速下降 D.固定化細胞常用包埋法,固定化酶常用物理吸附法,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,解析:固定化酶的優(yōu)勢在于酶能夠多次利用;細胞內有多種酶,固定化細胞技術不只固定一種酶;固定化酶和固定化細胞都能反復使用,但酶的活性不是迅速下降。 答案:D,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,名師點睛 固定化酵母細胞制備的三個注意事項 (1)配制海藻酸鈉溶液:要用酒精燈加熱,邊加熱邊攪拌,同時注意要用小火或間斷加熱。 (2)海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合:要將溶化好的海藻酸鈉溶液先冷卻至室溫,然后再加入已活化的酵母細胞,防止高溫燙傷甚至殺死酵母細胞。 (3)固定化酵母細胞:要以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,不能注入溶液中,防止形成的凝膠珠形狀不規(guī)則。,要點探究,,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,提能演練,1.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關敘述,錯誤的是( ) A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對細胞的傷害 B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導劑,可獲得染色體加倍的細胞 C.出芽是細胞再分化的結果,受基因選擇性表達的調控 D.生根時,培養(yǎng)基通常應含α-萘乙酸等生長素類調節(jié)劑,B,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,高分秘笈,解析:消毒劑的使用既要殺死表面微生物,又防止傷害組織細胞,影響組織培養(yǎng),A正確;植物細胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質體的誘導融合,帶有細胞壁的愈傷組織細胞不能誘導融合形成染色體加倍的細胞,B錯誤;出芽和生根都是細胞再分化的結果,其實質是基因的選擇性表達,C正確;α-萘乙酸為生長素類似物,可誘導愈傷組織生根,D正確。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,高分秘笈,2.酶在大規(guī)模產業(yè)化應用中的核心問題是固定化技術,而酶固定化所依據(jù)的基本原理在于酶具有( ) A.熱穩(wěn)定性 B.催化高效性 C.催化特異性 D.可反復使用性,D,解析:固定化酶指通過物理或化學的方法,將水溶性酶與非水溶性載體結合,既能與反應物接觸又能與產物分離,與直接使用酶相比,除催化效率高、特異性強外,還可反復使用酶;酶的熱穩(wěn)定性一般都不強。D正確。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,高分秘笈,3.(2014·山東卷)玉米是重要的糧食作物,經(jīng)深加工可生產酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:,,(1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產物可被酵母菌利用發(fā)酵生產酒精。培養(yǎng)酵母菌時,該水解產物為酵母菌的生長提供________。發(fā)酵過程中檢測酵母菌數(shù)量可采用____________________法或稀釋涂布平板法計數(shù)。,碳源,顯微鏡直接計數(shù),基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,提能演練,(2)玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構酶的作用下轉化成果糖。利用____________技術可使葡萄糖異構酶重復利用,從而降低生產成本。 (3)利用PCR技術擴增葡萄糖異構酶基因時,需用耐高溫的___________________催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、________________和___________三步。,固定化酶,(Taq)DNA聚合酶,(低溫)復性(或退火),(中溫)延伸,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,高分秘笈,解析:(1)培養(yǎng)酵母菌時,玉米秸稈中的纖維素的水解產物為酵母菌的生長提供碳源。檢測酵母菌數(shù)量可采用顯微鏡直接計數(shù)法或稀釋涂布平板法計數(shù)。 (3)利用固定化酶技術可使葡萄糖異構酶重復利用,從而降低生產成本。(4)利用PCR技術擴增葡萄糖異構酶基因時,需用耐高溫的(Taq)DNA聚合酶催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、(低溫)復性(或退火);(中溫)延伸三步。,基礎回顧 要點探究 提能演練,欄目鏈接,- 配套講稿:
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