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第1講 微生物的利用和生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用,專題九 生物技術(shù)實(shí)踐,,2016高考導(dǎo)航,專題九 生物技術(shù)實(shí)踐,,1．構(gòu)建微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用網(wǎng)絡(luò),固體,液體,選擇,鑒別,灼燒,干熱,劃線分離法,涂布分離法,顯微鏡直接計(jì)數(shù),2．有關(guān)微生物實(shí)驗(yàn)的基本方法 (1)制備培養(yǎng)基：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。 (2)無(wú)菌技術(shù)：主要指______________。 (3)倒平板操作：待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板。 (4)劃線分離操作：劃線分離是通過______________________________________的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。,消毒和滅菌,接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線,(5)涂布分離法：先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后，分別涂布到__________________的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基表面形成____________。如圖：,瓊脂固體培養(yǎng)基,單個(gè)菌落,3．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) (1)分離——________培養(yǎng)基。 (2)計(jì)數(shù) ①篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 ②計(jì)數(shù)方法：活菌計(jì)數(shù)法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。 ③過程：制備固體培養(yǎng)基→制備細(xì)菌懸液→用涂布分離法分離細(xì)菌→將培養(yǎng)皿倒置，培養(yǎng)→觀察菌落數(shù)。 (3)鑒定方法：含酚紅指示劑、以________為唯一氮源的培養(yǎng)基→細(xì)菌→指示劑變紅，則該菌能分解尿素。,選擇,尿素,4．果酒、果醋、泡菜的制作原理及過程,酵母菌,醋桿菌,假絲酵母和乳酸菌,厭氧,需氧,有機(jī)酸,果酒,果醋,命題點(diǎn)1 微生物的培養(yǎng)與利用,70～75 ℃煮30分鐘(80 ℃煮15分鐘),牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞,B,3.4×106,偏小,個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成的,稀釋次數(shù)減少,伊紅美藍(lán),(金屬光澤的紫)黑色,1．培養(yǎng)基中主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 2．無(wú)菌技術(shù)包括消毒和滅菌 (1)無(wú)菌技術(shù)的選擇原則：考慮效果和被操作對(duì)象的承受能力。 (2)實(shí)驗(yàn)操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 3．選擇微生物接種方法的原則 (1)純化微生物：劃線分離法和涂布分離法均可。 (2)計(jì)數(shù)微生物：只能選擇涂布分離法。,4．選擇培養(yǎng)基：對(duì)微生物具有選擇作用的培養(yǎng)基。 5．微生物的鑒定需要配制鑒別培養(yǎng)基 (1)分解尿素的細(xì)菌可使添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基變紅。 (2)纖維素分解菌可在含有剛果紅的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出周圍存在透明圈的菌落。,氮源和無(wú)機(jī)鹽,只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖,細(xì)胞分裂素,母液,接種環(huán),①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始,目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì),不合理，缺少空白對(duì)照,無(wú)菌水,3,30～300,倒置,紅色環(huán)帶,酚紅指示劑,以尿素作為唯一氮源,(4)下列操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行的是(多選)( ) A．稱取葡萄糖、瓊脂糖等培養(yǎng)基成分 B．倒平板 C．涂布分離 D．微生物的培養(yǎng) (5)與LB全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)相比，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落的原因是_________________________________________________。,BC,土壤中能利用尿素的細(xì)菌在土壤菌群中只占極少數(shù)量,命題點(diǎn)2 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用,預(yù)分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基配方,(1)圖中方框內(nèi)應(yīng)該填寫的的實(shí)驗(yàn)步驟是__________________________，此步驟中起主要作用的微生物是____________，其發(fā)酵時(shí)________(需要/不需要)氧氣，適宜的發(fā)酵溫度范圍是________________。 (2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？________(能/不能)，原因是________________________________________________________________________________________________________。 (3)如果想進(jìn)一步對(duì)初步篩選得到的菌株進(jìn)行純化并計(jì)數(shù)，可采用的接種方法是________________。通常鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法是在培養(yǎng)基中加入 ____________指示劑。,醋酸發(fā)酵(或果醋發(fā)酵),醋桿菌,需要,30～35 ℃,不能,培養(yǎng)基還含蛋白胨做氮源(尿素不是唯一氮源)，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物,涂布分離法,酚紅,1．傳統(tǒng)發(fā)酵食品的發(fā)酵類型 (1)果酒制作和泡菜制作：無(wú)氧發(fā)酵，應(yīng)控制無(wú)氧條件。 (2)果醋制作：有氧發(fā)酵。 2．發(fā)酵菌種類型 (1)果酒制作和腐乳制作的發(fā)酵菌種：真菌。 (2)果醋制作和泡菜制作的發(fā)酵菌種：細(xì)菌。,果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層,酶的用量,附著在葡萄皮上的野生型酵母菌,18～25 ℃,醋酸,乙醛,醋酸,果酒制作需無(wú)氧條件，果醋制作需要充足的氧氣,消毒,乳酸菌是厭氧生物，密封后造成缺氧環(huán)境,防止雜菌進(jìn)入,(2)若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是___________________________________________________。 (3)加入“陳泡菜水”的作用是________________________。 (4)制作泡菜的過程中，有機(jī)物的干重將________，泡菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類將________。 (5)乳酸菌與釀制果醋的菌種在代謝方式上的主要區(qū)別是___________________________________________________。 (6)有位同學(xué)在家制作泡菜時(shí)，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是_____________________________________________。,大量的食鹽抑制了乳酸菌發(fā)酵(大量的食鹽殺死了乳酸菌),提供乳酸菌菌種(接種),減少,增加,乳酸菌是厭氧型細(xì)菌，醋桿菌是好氧型細(xì)菌,青霉素殺死了乳酸菌,