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酵母菌細(xì)胞的固定化技術(shù),配制CaCl2溶液,配制海藻酸鈉溶液,將海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合,固定化酵母細(xì)胞,,酵母細(xì)胞的活化,一、基本步驟：,,,,第一步：酵母細(xì)胞的活化,由于缺水，酵母處于休眠狀態(tài),,加水 活化,,活化的干酵母,第二步：配制0.05mol/L的CaCl2,① 過程,稱取無水CaCl2 0.83g，放入200ml的燒杯中，加入150ml的蒸餾水，使其充分溶解，待用,② 目的,使膠體聚沉,③注意事項(xiàng),溶解物質(zhì)要徹底，勿用自來水溶解，以防自來水中各種離子影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,第三步：配制海藻酸鈉溶液,① 過程,稱取0.2g海藻酸鈉，放入40ml蒸餾水，用酒精燈小火間斷加熱至完全溶化。,②注意事項(xiàng),為什么要小火間斷加熱？,防止海藻酸鈉焦糊。,為什么說該步驟是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵步驟？,,濃度太高：,得不到規(guī)則的凝膠珠,濃度太低：,固定的酵母菌太少,第四步：將海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合,① 過程,將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入以活化的酵母細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢?，再轉(zhuǎn)移至注射器中,②注意事項(xiàng),,為什么要冷卻至室溫？,防止高溫殺死酵母菌。,第五步：固定化酵母細(xì)胞,① 過程,以恒定的速度緩慢的將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，浸泡30min左右。,②注意事項(xiàng),為什么要浸泡30分鐘？,以便凝膠珠形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),球形或橢球形，淺黃色,二、用固定化酵母發(fā)酵,,1.將固定好的酵母細(xì)胞（凝膠珠）用_______沖洗2~3次。,2.發(fā)酵時(shí)的溫度就為_______，時(shí)間_______（底物為葡萄糖）,3.將凝膠珠加入用于發(fā)酵的葡萄糖溶液后會發(fā)現(xiàn)有______ 產(chǎn)生，同時(shí)有_____味散發(fā)。,蒸餾水,25℃,24h,氣泡,酒精,