高三生物第二輪復習 專題八 第1講 微生物的利用和生物技術在食品加工中的應用課件 新人教版.ppt
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專題八 生物技術實踐,1.微生物的實驗室培養(yǎng)。 2.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)。 3.果酒及果醋的制作。 4.胡蘿卜素的提取。,考綱要求,,,,技術在食品加工中的應用,構建網(wǎng)絡,,,欄目索引,,,考點一 微生物的利用,考點二 果酒和果醋的制作,考點三 胡蘿卜素的提取,,考點一 微生物的利用,重點提煉,命題視角,題組一 從微生物的實驗室培養(yǎng)進行命題,題組二 從微生物培養(yǎng)基的組成成分及純化 方法進行命題,重點提煉,,,1.有關微生物實驗的基本方法 (1)制備培養(yǎng)基:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。 (2)無菌技術:主要指消毒和滅菌。 (3)倒平板操作:待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時,在酒精燈火焰附近倒平板。 (4)平板劃線法:是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。,(5)稀釋涂布平板法:先將菌液進行一系列的梯度稀釋后涂布平板,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如圖:,,2.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) (1)分離——選擇培養(yǎng)基。 (2)計數(shù) ①篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 ②計數(shù)方法:稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。 ③過程:土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察。 (3)鑒定方法:含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基→細菌→指示劑變紅,則該菌能分解尿素。,1.在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間,這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基上的細菌含量(2014新課標Ⅱ,39(1)改編)( ) 2.某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(2013江蘇,18C)( ) 3.純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法(2011新課標,39(2)改編)( ) 4.在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌(2011重慶,2A)( ),,,√,,5.檢測土壤中細菌總數(shù)實驗操作中,確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)(2009安徽,6D)( ) 6.培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌(2013江蘇,18A改編)( ),,,命題視角,,,題組一 從微生物的實驗室培養(yǎng)進行命題,1.(2014新課標Ⅱ,39)為了調查某河流的水質狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}: (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是____________________________;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為______________。,(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過________滅菌,在第二次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是______________________。 (3)示意圖A和B中,________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。,(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高__________的利用率。,解析 (1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,可在涂布接種前,隨機取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有(39+38+37)/3=38個活菌,則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1=380,則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380100=3.8104,則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041 000=3.8107。 (2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,以達到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。,(3)比較圖A和圖B可以看出:A培養(yǎng)基中細菌的分布呈線性,是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結果;B培養(yǎng)基中細菌均勻分布,是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。 (4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量,還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高了營養(yǎng)物質的利用率,因此振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。 答案 (1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8107 (2)灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 (3)B (4)溶解氧 營養(yǎng)物質,題組二 從微生物培養(yǎng)基的組成成分及純化方法進行命題 2.(2014四川,10)有機農藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。,,,(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質有碳源、水、__________四類,該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是________________________。 (2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和________________,這些植物激素一般需要事先單獨配制成________保存?zhèn)溆谩?(3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是________。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有__________________________________。,(4)為探究苯磺隆的降解機制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設是______________________,該實驗設計是否合理?為什么?________________________。 解析 (1)微生物生長繁殖需要的主要營養(yǎng)物質包括碳源、氮源、水和無機鹽四類。根據(jù)題意可知,土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力,該實驗的目的是探索其降解機制,因此,需要分離出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物,故選擇培養(yǎng)時為了排除其他碳源的干擾,培養(yǎng)基中唯一碳源只能是苯磺隆。,(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基需要添加生長素和細胞分裂素,用于調節(jié)植物細胞脫分化和再分化;這些植物激素一般需要事先單獨配制成母液保存?zhèn)溆谩?(3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是無菌接種環(huán)。劃線的平板培養(yǎng)后,發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域的劃線上不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,而其他劃線上有菌落。造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個:一是接種環(huán)灼燒后未冷卻,菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡;二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時未從第一區(qū)域末端開始。,(4)根據(jù)圖乙所示實驗中的上清液加入蛋白酶溶液推測,實驗目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白質,實驗設計不合理之處是缺少不加蛋白酶溶液、其他條件同圖乙的空白對照。 答案 (1)氮源和無機鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖 (2)細胞分裂素 母液 (3)接種環(huán) ①接種環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端開始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質 不合理,缺少空白對照,用選擇培養(yǎng)基分離微生物的方法 (1)在基礎培養(yǎng)基中加入抗性物質。舉例:①加高濃度食鹽分離金黃色葡萄球菌;②加青霉素分離酵母菌和細菌。 (2)通過改變培養(yǎng)基的成分。舉例:①培養(yǎng)基中缺乏氮源時,可分離自生固氮微生物,非自生固氮微生物因缺乏氮源而無法生存。②培養(yǎng)基中若缺乏有機碳源則異養(yǎng)微生物無法生存,而自養(yǎng)微生物可利用空氣中的CO2制造有機物生存。,總結提升,,,(3)利用培養(yǎng)基的特定成分。舉例:①當石油是唯一碳源時,可抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,從而分離出能消除石油污染的微生物。②當纖維素為唯一碳源時,分離纖維素分解菌。,,考點二 果酒和果醋的 制作,重點提煉,命題視角,題組 從果酒、果醋的制作原理和方法進行命題,重點提煉,,,果酒、果醋的制作,1.醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產生醋酸(2014廣東,4A)( ) 2.酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產生酒精(2014廣東,4B)( ) 3.某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。先供氧進行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵(2012江蘇,14B改編)( ),錯混診斷,,,,√,,4.在制作果醋時,如果條件適宜,醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸(2012江蘇,21B改編)( ) 5.在家庭中用鮮葡萄制作果酒時,讓發(fā)酵裝置接受光照并放在45 ℃處(2010北京,1AD改編)( ),√,,命題視角,,,題組 從果酒、果醋的制作原理和方法進行命題,1.(2014江蘇,24改編)某同學設計了如圖所示的發(fā) 酵裝置,下列有關敘述不正確的是( ) A.該裝置可阻止空氣進入,用于果酒發(fā)酵 B.該裝置便于果酒發(fā)酵中產生的氣體排出 C.去除彎管中的水,該裝置可滿足果醋發(fā)酵時底層發(fā)酵液中大 量醋酸菌的呼吸 D.去除彎管中的水后,該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似,解析 A項,該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進入,能用于果酒發(fā)酵。 B項,果酒發(fā)酵產生的CO2可溶解在彎管的水中,CO2量多時可進一步通過水排出。 C項,醋酸菌是好氧菌,因沒有將無菌空氣通入發(fā)酵液中,故去除彎管中的水后也不能滿足底層發(fā)酵液中醋酸菌有氧呼吸的需求。 D項,去除彎管中的水后,該裝置的彎管部分既能排出CO2,也能防止空氣中的微生物進入,與巴斯德的鵝頸瓶作用類似。 答案 C,2.下圖是果醋和果酒的發(fā)酵裝置,相關描述錯誤的是( ) A.出料口可以用來取樣 B.排氣口能排出酒精發(fā)酵時產生的二氧化碳 C.充氣口在醋酸發(fā)酵時要連接充氣泵進行充氣 D.充氣口的開關始終要處于打開狀態(tài),解析 醋酸菌是需氧型微生物,釀制果醋時需一直充氣維持有氧環(huán)境。而酵母菌是兼性厭氧菌,釀造果酒時,先通過充氣口充氣使酵母菌大量繁殖,然后關閉充氣口,造成無氧環(huán)境,使酵母菌發(fā)酵產生酒精。所以D選項充氣口的開關始終要處于打開狀態(tài)是錯誤的。 答案 D,總結提升,,,1.果酒和果醋發(fā)酵裝置的設計思路 (1)酵母菌繁殖需要氧氣,醋酸菌是好氧細菌,則果酒制作前期和果醋制作整個過程都需要氧氣;酵母菌產生酒精時是厭氧的,則在充氣口處應該設置開關。 (2)發(fā)酵過程中產生CO2,需要設置排氣口;為了防止空氣中微生物污染,排氣口應該連接一個長而彎曲的膠管。 (3)為便于取樣及監(jiān)測發(fā)酵情況,需要設置出料口。,2.制作果酒、果醋菌種的比較,,考點三 胡蘿卜素的 提取,重點提煉,命題視角,題組 從提取胡蘿卜的原理、方法進行命題,重點提煉,,,1.胡蘿卜素的提取 (1)胡蘿卜素的性質:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶劑。 (2)實驗設計 ①方法:萃取法,石油醚最適宜作萃取劑。 ②實驗流程,(3)鑒定方法:紙層析法。 2.萃取過程的注意事項 (1)避免明火加熱,采用水浴加熱——防止引起燃燒、爆炸。 (2)在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置——防止有機溶劑揮發(fā)。 (3)萃取液的濃縮可直接使用蒸餾裝置,濃縮前要進行過濾。,1.用萃取法提取薄荷油時,采用的溶劑是酒精,原理是薄荷油易溶于有機溶劑酒精中(2011海南,30(2)改編)( ) 2.用萃取法提取胡蘿卜素的主要步驟是:干燥、粉碎、萃取、濃縮、過濾( ) 3.在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過程中,溫度過高和時間過長會導致胡蘿卜素分解(2008寧夏,37(3)改編)( ) 4.提取的胡蘿卜素可通過紙層析法進行鑒定,在鑒定過程中不需要對照(2008寧夏,37(4)改編)( ),錯混診斷,,,√,,√,,題組 從提取胡蘿卜素的原理、方法進行命題 (2014山東,34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:,命題視角,,,(1)篩選產胡蘿卜素的酵母菌R時,可選用____________或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時需先灼燒接種環(huán),其目的是____________________________________________。,(2)培養(yǎng)酵母菌R時,培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供____________和____________。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程應控制好溫度和________________以防止胡蘿卜素的分解;萃取過程中宜采用________________方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進行過濾,其目的是________________。 (4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過程中需用胡蘿卜素標準品作為______________________________。,解析 (1)接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法,接種過程為了避免其他雜菌的污染,要做無菌操作,所以接種前需對接種環(huán)滅菌操作。 (2)蔗糖主要提供碳源,當然也可以作為能源物質,硝酸鹽含氮元素,可提供氮源。 (3)溫度過高、干燥時間過長會導致胡蘿卜素分解;由于萃取劑往往有揮發(fā)性,直接加熱時揮發(fā)出來的有機溶劑遇明火易爆炸;萃取后需將原料中的固體物濾去。,(4)提取出來的胡蘿卜素往往不是純的,用標準樣品主要起一個對照的作用。 答案 (1)稀釋涂布平板法 殺滅接種環(huán)上的微生物 (2)碳源 氮源 (3)干燥時間 水浴加熱 濾去萃取后的固體物 (4)對照,胡蘿卜素粗品鑒定過程中的5個易錯點 (1)層析時沒有選擇干凈的濾紙,導致實驗現(xiàn)象不明顯:為了防止操作時對濾紙的污染,應盡量避免用手直接接觸濾紙,可以戴手套進行操作。 (2)點樣時點樣圓點太大(直徑大于2 mm),導致最終在濾紙上形成一條線,無法辨認被提取的色素:點樣圓點的直徑應為2 mm。,技法訓練,,,(3)將點好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時不能將濾紙兩邊相互接觸:以避免由于毛細管現(xiàn)象導致溶劑沿濾紙兩邊的移動加快,溶劑前沿不齊,影響結果。 (4)層析液沒及樣品原點,色素溶解于層析液中,造成實驗失敗:層析液不可沒及樣品原點,以免色素溶解于層析液中,使鑒定失敗。 (5)沒設置標準樣品作對照:層析液中是否提取到胡蘿卜素,可通過與標準樣品中的β-胡蘿卜素作對比予以確認。,- 配套講稿:
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