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2019-2020年高中生物 第一部分 微生物的利用 實(shí)驗(yàn)2 分離以尿素為氮源的微生物自我小測(cè) 浙科版選修1 1本實(shí)驗(yàn)中的尿素培養(yǎng)基屬于(　　) A．選擇培養(yǎng)基 B．鑒別培養(yǎng)基 C．半固體培養(yǎng)基 D．無氮培養(yǎng)基 2涂布分離細(xì)菌時(shí)使用的玻璃刮刀應(yīng)保存在70%酒精中，取出后又要放在酒精燈火焰上灼燒，這2步分別屬于什么技術(shù)(　　) A．滅菌、滅菌 B．消毒、消毒 C．滅菌、消毒 D．消毒、滅菌 3尿素又稱脲，它是什么有機(jī)物降解的產(chǎn)物…(　　) A．核酸 B．蛋白質(zhì) C．淀粉 D．脂肪 4本實(shí)驗(yàn)的土樣最好取自(　　) A．有大量植物生長(zhǎng)的地方取 B．臨水的地方取 C．有哺乳動(dòng)物排泄物的地方取 D．干燥、空曠的地方取 5分離以尿素為氮源的微生物所采用的分離方法是(　　) A．涂布分離法 B．劃線分離法 C．稀釋分離法 D．選擇分離法 6脲酶的化學(xué)本質(zhì)是(　　) A．脲 B．蛋白質(zhì) C．尿素 D．核酸 7下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是…(　　) A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂糖、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、瓊脂糖、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、瓊脂糖、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水 8有脲酶的細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn)著色環(huán)帶的原因是(　　) A．外泌的脲酶將尿素水解成氨，氨為堿性，使酚紅變?yōu)榧t色 B．外泌的脲酶呈堿性使酚紅變?yōu)榧t色 C．外泌的脲酶將酚紅分解成呈紅色的物質(zhì) D．酚紅與脲酶反應(yīng)后生成了呈紅色的物質(zhì) 9將下列的實(shí)驗(yàn)步驟按正確的順序排列(　　) ①將培養(yǎng)皿倒置于恒溫箱中培養(yǎng)24～48 h　②土壤取樣?、塾^察菌落數(shù)　④樣品稀釋制備細(xì)菌懸液?、輰⑾♂屢和坎嫉揭阅蛩貫槲ㄒ坏吹呐囵B(yǎng)基上 A．②④①⑤③ B．②①④⑤③ C．⑤①④②③ D．②④⑤①③ 10分析下面培養(yǎng)基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O 、葡萄糖、尿素、瓊脂糖。請(qǐng)完成問題： (1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是________和________。 (2)想一想這種培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？ 如果具有，又是如何進(jìn)行選擇的？ 11請(qǐng)將稀釋液的稀釋度在下圖中加以準(zhǔn)確標(biāo)注： 12本題探究如何從土壤中將自生固氮菌分離出來。請(qǐng)據(jù)題完成以下問題。 (1)實(shí)驗(yàn)原理：自生固氮菌是一種能利用空氣中的N2做為氮源的細(xì)菌。若用無菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，其培養(yǎng)基不需要添加________這類營(yíng)養(yǎng)要素，而其他細(xì)菌則不行。 農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥漿，接種到無菌培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長(zhǎng)繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離開來。 (2)材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛9 mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛90 mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。 (3)方法步驟： ①倒平板：分別將無菌培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，操作過程應(yīng)在火焰旁。 ②制備土壤稀釋液：取土樣10 g加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1 mL，轉(zhuǎn)至9 mL的無菌水的大試管中，依次稀釋到10－7稀釋度。 ③涂布：按照由10－7～10－3稀釋度的順序分別吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布，每個(gè)稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布________個(gè)平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布1個(gè)平板。 ④培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在28～30 ℃下培養(yǎng)3～4天。 ⑤細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。如果測(cè)試的平均值為50，則每克樣品中的菌落數(shù)是________。(稀釋度是10－5) (4)預(yù)測(cè)結(jié)果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)應(yīng)多于無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。請(qǐng)說明原因：______________________________________________________。 13(xx上海高考，39)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。 圖1 表1　培養(yǎng)基的組成 液體培養(yǎng)基 蛋白胨 牛肉膏 氯苯 氯化鈉 硝酸銨 無機(jī)鹽(無碳) 蒸餾水 Ⅰ號(hào) 10 g 5 g 5 mg 5 g — — 1 L Ⅱ號(hào) — — 50 mg 5 g 3 g 適量 1 L Ⅲ號(hào) — — 20～80 mg 5 g 3 g 適量 1 L (1)配制Ⅱ號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的________。 (2)培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是________。 (3)從用途上來說，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基和Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基分別屬于________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是________。 (4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體會(huì)變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱為________。 (5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線(如圖2)。從圖2可知，SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，其原因是________________________________________________________________________________。 圖2 參考答案 1答案：A　解析：尿素培養(yǎng)基可以將能利用尿素的微生物從別的微生物中選擇出來，所以A正確。 2答案：D　解析：消毒和滅菌是不同的。往往消毒比較溫和，僅僅消滅危害健康的致病菌；而滅菌就比較強(qiáng)烈，如高壓鍋、灼燒等，它是去除一切菌。本題前者屬消毒，后者屬滅菌。 3答案：B　解析：蛋白質(zhì)可降解為尿素(主要是脫氨基)，即脲。所以選B。 4答案：C　解析：由于人和其他哺乳動(dòng)物如家畜的尿中都含有尿素，因此含有哺乳動(dòng)物排泄物的土壤中就可能存在以尿素為氮源的微生物。 5答案：A　解析：微生物的分離方法多種多樣，本實(shí)驗(yàn)使用了涂布分離法。 6答案：B　解析：酶既有蛋白質(zhì)，又有RNA，但脲酶屬于蛋白質(zhì)。 7答案：A　解析：能分解尿素的微生物不需要再添加除尿素外的其他氮源，因此A是正確的。B選項(xiàng)缺少氮源，C中缺少了葡萄糖——碳源；D中是一個(gè)任何微生物都能存活的培養(yǎng)基，無法達(dá)到分離出能分解尿素的微生物的目的。 8答案：A　解析：本題考查到了顯色反應(yīng)的原理，這也是鑒別的原理。具體是有脲酶的細(xì)菌將脲酶分泌到細(xì)菌外，隨后脲酶將培養(yǎng)基中的尿素水解成氨，氨為堿性，遇酚紅變紅色。 9答案：D　解析：本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)步驟，具體順序?yàn)棰冖堍茛佗?，故選D。 10解析：碳源是提供碳元素的物質(zhì)，氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖，但是， 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對(duì)微生物有選擇作用。選擇的對(duì)象是能夠利用尿素的微生物。 答案：(1)葡萄糖　尿素 (2)有選擇作用。因?yàn)榇伺浞街心蛩厥俏ㄒ坏?，因此，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)。 11解析：由課本稀釋過程引申而來，1 mL菌液＋9 mL無菌水＝10 mL溶液。＝10－1，所以A：10－1，以此類推B、C。 答案：A：10－1　B：10－2　C：10－3 12解析：統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的原則是：選出菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。根據(jù)計(jì)算方法“每克樣品中的菌落數(shù)＝(CV)M”，則(500.1)105＝5107。無氮培養(yǎng)基里沒有氮源，只允許固氮菌生存，屬于選擇培養(yǎng)基，可分離出土壤中的固氮菌。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)全面，幾乎允許土壤中所有菌類生存。 答案：(1)氮源 (3)③3　⑤30～300　5107 (4)無氮培養(yǎng)基上能生存繁殖的僅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存。 13解析：(1)固體培養(yǎng)基是在制作培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂制成的。(2)在培養(yǎng)基的配制過程中，調(diào)pH時(shí)可能會(huì)使培養(yǎng)基污染，所以應(yīng)在調(diào)pH之后進(jìn)行滅菌。(3)Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中加入了大多數(shù)異養(yǎng)微生物可以利用的牛肉膏和蛋白胨，屬于通用培養(yǎng)基；而Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中沒有這兩種成分而且氯苯的量增至50 mg，為選擇培養(yǎng)基；硝酸銨是為微生物提供無機(jī)氮源的一種無機(jī)鹽。(4)在惡劣環(huán)境中細(xì)菌內(nèi)形成的休眠體為芽孢。(5)氯苯是Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基中的唯一碳源，在添加較少氯苯時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)所需碳源不足，較早停止生長(zhǎng)。 答案：(1)瓊脂　(2)先調(diào)pH，后滅菌　(3)通用　選擇　硝酸銨　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗盡 實(shí)驗(yàn)3　觀察土壤中能水解