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2019-2020年高考生物大一輪復習 第三單元 細胞的能量供應和利用 第8講 降低化學反應活化能的酶講義 　1.酶在代謝中的作用(Ⅱ)　2.實驗：探究影響酶活性的因素 [學生用書P51] 一、酶的作用與本質 1．酶催化作用的原理：降低化學反應的活化能。 2．酶的概念 　加熱能提高化學反應速度，其作用機理與酶相同嗎？ 提示：不同。加熱能提高反應物分子的能量，不能降低反應的活化能。 3．酶本質的探索[連一連] 二、酶的特性 1．高效性：催化效率約是無機催化劑的107～1013倍。 2．專一性：每一種酶只能催化一種或一類化學反應。 3．作用條件較溫和：在最適溫度和pH條件下，酶的活性最高。 　酶的來源與特性 活細胞內來合成，降低化能是本領， 高效專一需溫和，催化反應屬它行。 1．(必修1 P80圖5—2改編)如圖中曲線Ⅰ、Ⅱ分別表示物質A在無催化劑條件和有酶催化條件下生成物質P所需能量的變化過程。下列相關敘述正確的是(　　) A．ab段表示在無催化劑的條件下，物質A生成物質P需要的活化能 B．若將酶改為無機催化劑催化該反應，則a的高度將降低 C．若僅增加反應物A的量，則圖中曲線的原有形狀均發(fā)生改變 D．若曲線Ⅱ為最適酶促條件下的曲線，改變酶促條件后，a的高度將降低 答案：A 2．(必修1 P86基礎題T3改編)下圖為酶催化反應的過程示意圖，以數(shù)字編號的圖形分別表示反應物、酶、生成物等反應要素，其中表示酶的圖形編號是(　　) A．①　　　　　　　　 B．② C．③ D．④ 答案：A 3．思維診斷 (1)判斷下列關于酶的作用和本質的敘述 ①酶的基本組成單位是氨基酸和脫氧核糖核苷酸。() ②(xx啟東中學期末T11D)酶都能被蛋白酶水解而失去活性。() ③酶在催化反應前后，其分子結構不變。(√) ④酶通過為反應物供能和降低活化能來提高化學反應速率。() (2)判斷下列有關酶的特性的敘述 ①(xx青島市統(tǒng)考T20A)在測定唾液淀粉酶活性時，將溶液pH由3提升到6的過程中，該酶的活性將不斷上升。() ②(xx高考山東卷T4D)探究溫度對酶活性的影響時，將酶與底物溶液在室溫下混合后于不同溫度下保溫。() ③酶活性的變化與酶所處環(huán)境的改變無關。() ④用含蛋白酶的洗衣粉去除油漬，效果比其他類型加酶洗衣粉好。() ⑤高溫和低溫均能破壞酶的結構使其失去活性。() ⑥酶活性最高時的溫度不適合酶的保存。(√) 考點一　探究酶的本質及作用機理[學生用書P52] 1．酶的產生部位、本質、功能 內容 解釋 產生部位 一般來說，活細胞都能產生酶 活細胞(哺乳動物成熟紅細胞除外)一定能產生，可在細胞內、細胞外(或體外)發(fā)揮作用 酶的本質 大多數(shù)是蛋白質，少數(shù)是RNA 合成原料：氨基酸或核糖核苷酸 酶的功能 催化 反應前后酶量和化學性質不變 種類 按存在部位分 胞內酶：合成后在細胞內起作用，如有氧呼吸酶 胞外酶：合成后分泌到細胞外起作用，如消化酶 按功能分 水解酶：在物質水解時起催化作用 合成酶：在物質合成時起催化作用 2.酶的作用機理 酶和其他催化劑均能降低化學反應的活化能，分析如下： (1)圖中ac和bc段分別表示無催化劑和酶催化時反應進行所需要的活化能。 (2)若將酶變?yōu)闊o機催化劑，則b在縱軸上向上移動。用加熱的方法不能降低活化能，但會提供活化能。 某生物學家用蛋白酶去除大腸桿菌核糖體的蛋白質，處理后的核糖體仍可催化氨基酸的脫水縮合反應。據(jù)所給信息結合所學知識分析回答以下問題： (1)核糖體由________________構成，用蛋白酶去除大腸桿菌核糖體的蛋白質后，剩余的物質是________。 (2)題中信息可推知核糖體中能催化該反應的物質是________，而不是蛋白酶。 (3)蛋白酶是由活細胞合成的具有催化作用的有機物，用________試劑進行檢測可以呈現(xiàn)紫色反應。 (4)在一定溫度范圍內，溫度降低，酶活性降低，而酶促反應的活化能________(會或不會)降低。 [答案]　(1)蛋白質和RNA　RNA　(2)RNA　(3)雙縮脲 (4)不會 1．酶的催化作用實驗探究 對照組：反應物＋清水反應物不被分解； 實驗組：反應物＋等量的相應酶溶液反應物被分解。 2．用“試劑檢測法”鑒定酶的本質 (1)實驗原理和方法 (2)設計方案 項目 實驗組 對照組 材料 待測酶溶液 已知蛋白液(等量) 試劑 分別加入等量的雙縮脲試劑 現(xiàn)象 是否呈現(xiàn)紫色 呈現(xiàn)紫色 結論 呈現(xiàn)紫色說明該酶為蛋白質類，否則該酶不屬于蛋白質類 同理，也可利用吡羅紅能使RNA呈紅色來設計實驗驗證酶是RNA。 1．關于酶的敘述，錯誤的是(　　) A．同一種酶可存在于分化程度不同的活細胞中 B．低溫能降低酶活性的原因是其破壞了酶的空間結構 C．酶通過降低化學反應的活化能來提高化學反應速度 D．酶既可以作為催化劑，也可以作為另一個反應的底物 解析：選B。無論細胞分化到什么程度，某些基本的物質和能量代謝是所有細胞共有的，如DNA的轉錄、翻譯等，這些反應中涉及的酶就是分化程度不同的細胞(哺乳動物成熟的紅細胞除外)中所共有的酶，如RNA聚合酶等，故A項正確。酶的催化作用需要一個適宜的溫度，如果低于這個溫度，會使分子運動減弱，反應速度降低，表現(xiàn)為酶活性降低，但并沒有改變酶的空間結構，是一種可逆的過程，故B項錯誤。酶在生化反應中起著催化劑的作用，其作用機理是降低化學反應的活化能，提高了反應速度，故C項正確。絕大多數(shù)酶的化學本質是蛋白質，酶在一些化學反應中可作為催化劑，而在另一些化學反應中，則可能作為底物被相關蛋白酶分解，故D項正確。 2．(xx高考海南卷，15,2分)關于人體內激素和酶的敘述，錯誤的是(　　) A．激素的化學本質都是蛋白質 B．酶可以降低化學反應的活化能 C．高效性是酶的重要特性之一 D．激素與靶細胞結合可影響細胞的代謝 解析：選A。本題考查激素和酶的相關知識。激素的化學本質并非都是蛋白質，如性激素為固醇類，A錯誤；酶催化作用的實質是降低化學反應的活化能，B正確；酶具有高效性、專一性等重要特性，C正確；激素具有調節(jié)作用，激素與靶細胞結合后，可以調節(jié)靶細胞的代謝，D正確。 酶與動物激素的比較 項目 酶 動物激素 來源及作用場所 活細胞產生；細胞內或細胞外 專門的內分泌腺或特定部位細胞產生；細胞外發(fā)揮作用 化學本質 多數(shù)是蛋白質，少數(shù)是RNA 固醇類、多肽、蛋白質、氨基酸衍生物、脂質等 生理功能 催化作用 調節(jié)作用 共性 在生物體內均屬高效能物質，即含量少、作用大、生物代謝不可缺少 考點二　以曲線圖為載體，考查酶的特性及相應曲線模式圖的分析 [學生用書P53] 1．高效性 (1)與無機催化劑相比，酶的催化效率更高。 (2)酶只能縮短達到化學平衡所需的時間，不能改變化學反應的平衡點。 2．專一性 (1)物理模型 ①圖中A表示酶，B表示被A催化的底物，E、F表示B被分解后產生的物質，C、D表示不能被A催化的物質。 ②酶和被催化的反應物分子都有特定的結構。 (2)曲線模型 ①加入酶B的反應速率和無酶條件下的反應速率相同，說明酶B對此反應無催化作用。 ②而加入酶A的反應速率隨反應物濃度的增大明顯加快，說明酶A可催化該反應，即酶具有專一性。 3．酶的作用需要適宜的溫度和pH 在一定溫度(pH)范圍內，隨溫度(pH)的升高，酶的催化作用增強，超過這一范圍，酶的催化作用逐漸減弱。過酸、過堿、高溫都會使酶變性失活，而低溫只是抑制酶的活性，酶分子結構未被破壞，溫度升高可恢復活性。 4．底物濃度和酶濃度對酶促反應的影響 (1)圖甲：在其他條件適宜、酶量一定的情況下，酶促反應速率隨底物濃度增加而加快，但當?shù)孜镞_到一定濃度后，受酶數(shù)量限制，酶促反應速率不再增加。 (2)圖乙：在底物充足、其他條件適宜的情況下，酶促反應速率與酶濃度成正比。 用某種酶進行有關實驗的結果如圖所示。請回答以下問題： (1)由圖1可知加入某種酶后，蔗糖不分解，而麥芽糖被分解。該實驗結果說明酶具有________。 (2)由圖2可知該酶最適pH為____，則說明該酶________(一定，不一定)不是胃蛋白酶。 (3)圖3說明該酶的最適溫度________(確定、不確定)。20 ℃、30 ℃和40 ℃三種溫度條件中，________溫度條件下該反應速率最快。 (4)由圖4實驗結果可知________是該酶的激活劑。該實驗的自變量為________________。 [答案]　(1)專一性　(2)7　一定　(3)不確定　30 ℃　(4)Cl－　不同種類的離子和底物濃度 1．與酶活性相關的問題分析 (1)溫度和pH是通過影響酶活性而影響酶促反應速率的。 (2)底物濃度和酶濃度是通過影響底物與酶的接觸面積而影響酶促反應速率的，并不影響酶的活性。 (3)分析與酶有關的曲線時首先要弄清橫坐標、縱坐標表示的意義，其次再分析影響該曲線的因素有幾個，一般情況下，曲線未達到飽和時，影響因素是橫坐標的因素，達到飽和穩(wěn)定狀態(tài)后，限制因素是除橫坐標因素之外的其他因素。 2．多種因素對酶促反應的影響 (1)分析圖甲可知：反應溶液中溫度變化不影響酶的最適pH。 (2)分析圖乙可知：反應溶液中酸堿度的變化不影響酶的最適溫度。 　　　　　　以模式圖、曲線圖形式考查酶的特性 1．(xx湖南株洲月考)在3根試管中均加入等量的5%的過氧化氫溶液，再分別加入適量的二氧化錳、鮮豬肝研磨液、唾液，一段時間內測得底物含量變化如圖。則對圖的表述正確的是(　　) ①曲線B表示二氧化錳的催化作用，A與B的對照反映了無機催化劑的專一性特點 ②曲線C表示豬肝中過氧化氫酶的催化作用，A與C對照反映了酶的專一性特點 ③曲線C與B的對照可以說明酶的高效性 ④曲線A不下降的原因可能是唾液淀粉酶與該底物不能形成酶底復合物 A．①②　　　　　　　　 B．③④ C．①②④ D．②③④ 解析：選D。A為唾液的催化作用，B為二氧化錳的催化作用，A與B的對照不能反映無機催化劑的專一性特點，①錯誤；A為唾液的催化作用，C為豬肝中過氧化氫酶的催化作用，唾液中的唾液淀粉酶不能催化過氧化氫的分解，過氧化氫酶能催化過氧化氫的分解，A與C對照反映了酶的專一性特點，②正確；B為二氧化錳的催化作用，C為豬肝中過氧化氫酶的催化作用，與無機催化劑相比，酶具有高效性，③正確；A為唾液中的唾液淀粉酶的催化作用，由于唾液淀粉酶與該底物不能形成酶底復合物，底物的量沒有減少，④正確。 2. (xx江西吉安期中)為了研究溫度對酶活性的影響，某同學在試管中加入了某反應底物和相對應的酶，環(huán)境及其試管中物質的溫度都保持在10 ℃，利用右圖所示裝置對試管進行緩慢加熱，使溫度緩慢上升。根據(jù)此實驗該同學畫出了下面四個曲線圖，其中錯誤的是(　　) 解析：選C。在實驗過程中隨著溫度的升高，酶的活性先升高再下降，最后活性喪失，反應速率與酶活性的變化基本相同。生成物的積累量會逐漸增加，當酶失活時達到最大值；反應底物的剩余量則會逐漸減少，當酶失活時達到最小值。 　　　　　　酶特性的實驗驗證 3．(xx北京海淀區(qū)第二次練習)為了證明酶的作用具有專一性，某同學設計了如下5組實驗，分別選擇一定的試劑進行檢測，合理的實驗方案是(　　) 組別 ① ② ③ ④ ⑤ 酶 蛋白酶 蛋白酶 淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 反應物 蛋白質 淀粉 蛋白質 淀粉 麥芽糖 A.①和③對比，用雙縮脲試劑檢測 B．②和④對比，用碘液檢測 C．④和⑤對比，用斐林試劑檢測 D．③和④對比，用斐林試劑檢測 解析：選B。由于蛋白酶本身是蛋白質，遇雙縮脲試劑呈現(xiàn)紫色，不能斷定蛋白質是否被分解，A錯誤；淀粉酶能催化淀粉的水解，蛋白酶不能催化淀粉的水解，用碘液檢測，顏色反應不同，B正確；淀粉是非還原糖，在淀粉酶的作用下分解生成還原糖，麥芽糖是還原糖，用斐林試劑不能判斷麥芽糖是否分解，C錯誤；斐林試劑不能判斷蛋白質是否分解，D錯誤。 4．(xx山東泰安市期末)為驗證酶的高效性，進行如圖所示的實驗，以下描述正確的是(　　) A．加氯化鐵的試管必須加熱處理 B．兩試管加入催化劑的分子數(shù)相同 C．兩試管加入過氧化氫量不同 D．反應完成后，兩試管中產物數(shù)量相同 解析：選D。實驗中應遵循單一變量原則，若對加氯化鐵的試管進行加熱處理，則實驗存在兩個自變量。兩試管中，應加入等質量的催化劑，故加入無機催化劑氯化鐵的分子數(shù)遠多于加入生物催化劑過氧化氫酶的分子數(shù)。兩試管中的過氧化氫量屬于無關變量，應保持相同。兩試管中的過氧化氫量相同，反應完成后，兩試管中產物數(shù)量相同。 1．酶的專一性實驗方案設計 (1)方案一：用同一種酶催化兩種不同的底物 (2)方案二：用兩種不同的酶催化同一種底物 以上兩種實驗方案都用斐林試劑鑒定。 2．酶的高效性實驗方案設計 (1)實驗設計思路 (2)實驗中的單一變量：催化劑種類。 考點三　探究影響酶活性的因素[學生用書P54] 1．溫度對酶活性的影響 (1)原理解讀 ②溫度影響酶的活性，從而影響淀粉的水解，滴加碘液，根據(jù)是否出現(xiàn)藍色及藍色的深淺來判斷酶的活性。 (2)實驗設計思路 (3)實驗設計程序 　　　淀粉　　　　淀粉酶 ↓ ↓　　　　　　　　　 各自在所控制的溫度下處理一段時間 　　　　　↓ 淀粉與相應溫度的淀粉酶混合 　　　　　↓ 在各自所控制的溫度下保溫一段時間 　　　　　↓ 滴加碘液，觀察顏色變化 (4)注意事項 ①本實驗不宜選用過氧化氫酶催化過氧化氫分解，因為過氧化氫酶催化的底物過氧化氫在加熱的條件下分解也會加快。 ②在溫度對酶活性的影響實驗中，只能運用碘液檢測底物，不能利用斐林試劑檢驗產物的生成，因為利用斐林試劑檢測時需水浴加熱到50～65 ℃，導致低溫下的實驗組由于溫度變化，影響實驗結果。 2．pH對酶活性的影響 (1)原理解讀 ①H2O2H2O＋O2。 ②pH影響酶的活性，從而影響O2的生成量，可用點燃但無火焰的衛(wèi)生香燃燒的情況來檢驗O2生成量的多少。 (2)實驗設計 O2的產生速率 3．注意事項 (1)在探究酶活性的最適溫度時，需要把兩者先分別放在各自所需溫度下保溫一段時間。 (2)在探究酶活性的最適pH時，需先將酶置于不同環(huán)境條件下，然后再加入反應物，如可溶性淀粉液，切記不能在加入酶后，先加入反應物，再加入鹽酸或氫氧化鈉。 下面的表格分別是某興趣小組探究溫度對酶活性影響的實驗步驟和探究過氧化氫酶作用的最適pH的實驗結果。據(jù)此回答下列問題： 探究溫度對酶活性影響的實驗(實驗一) 實驗步驟 分組 甲組 乙組 丙組 ①淀粉酶溶液 1 mL 1 mL 1 mL ②可溶性淀粉溶液 5 mL 5 mL 5 mL ③控制溫度 0 ℃ 60 ℃ 90 ℃ ④將新鮮淀粉酶溶液與可溶性淀粉溶液混合后分別恒溫 ⑤測定單位時間內淀粉的________ 注：淀粉酶的最適溫度是60 ℃。 探究過氧化氫酶作用的最適pH的實驗(實驗二) 組別 A組 B組 C組 D組 E組 pH 5 6 7 8 9 H2O2溶液完全分解所需時間(秒) 300 180 90 192 284 (1)pH在實驗一中屬于________變量，而在實驗二中屬于________變量。 (2)實驗一中的對照組為________組。 (3)實驗一的①②③步驟為錯誤操作，正確的操作應該是________。第⑤步最好選用________(試劑)測定單位時間內________。 (4)如將實驗一的新鮮淀粉酶溶液和可溶性淀粉溶液換為新鮮肝臟研磨液和H2O2溶液，你認為是否科學？________，為什么？________________________________________________________________________。 (5)分析實驗二的結果，可得到的結論是：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________； 在該預實驗的基礎上要進一步探究該過氧化氫酶的最適pH，可在pH為________之間設置梯度。 (6)該組同學還做了反應速率與底物濃度關系的實驗。如圖坐標中已根據(jù)實驗二結果畫出D組中底物濃度與反應速率的曲線，請你在該坐標圖中畫出C組中底物濃度與反應速率的曲線。 [解析]　(1)實驗一探究的是溫度對酶活性的影響，因此自變量是溫度，因變量是酶活性，pH屬于無關變量；而實驗二是探究過氧化氫酶作用的最適pH，自變量是pH。(2)探究溫度對酶活性影響的實驗中，已知60 ℃是淀粉酶作用的最適溫度。因此乙組的實驗結果是另外兩組的參照，故為對照組。(3)探究溫度對酶活性影響的實驗中，應該先使酶和底物分別達到預設溫度，然后再將底物和酶混合進行反應，否則會影響實驗結果的準確性。因此，實驗一的①②③步驟為錯誤操作。淀粉遇碘液變藍，因此實驗一的第⑤步最好選用碘液測定單位時間內淀粉的剩余量，單位時間內淀粉的剩余量越多，說明酶活性越低。不用斐林試劑測定單位時間內生成物的量，因為斐林試劑需加熱才能與還原糖發(fā)生顯色反應，而加熱會影響自變量——溫度，進而影響實驗結果。(4)溫度會直接影響H2O2的分解，因此實驗一的新鮮淀粉酶溶液和可溶性淀粉溶液不能換為新鮮肝臟研磨液和H2O2溶液。(5)由實驗二的結果可知：在pH為5～7的范圍內隨pH的升高該過氧化氫酶活性升高，在pH為7～9的范圍內隨pH的升高該過氧化氫酶活性降低。在該預實驗的基礎上要進一步探究該過氧化氫酶的最適pH，可在pH為6～8之間設置梯度。(6)C組中酶活性比D組中酶活性高，據(jù)此可畫出C組中底物濃度與反應速率的曲線。 [答案]　(1)無關　自　(2)乙　(3)使新鮮淀粉酶溶液和可溶性淀粉溶液分別達到預設溫度后再混合(其他合理答案也可)　碘液　淀粉的剩余量　(4)不科學　因為溫度會直接影響H2O2的分解　(5)該過氧化氫酶的最適pH約為7，pH降低或升高酶活性均降低(或在pH為5～7的范圍內隨pH的升高該過氧化氫酶活性升高，在pH為7～9的范圍內隨pH的升高該過氧化氫酶活性降低)　6～8 (6) 環(huán)境因素對酶活性影響的實驗設計策略 (1)設計思路：采取對比的手段，將待探究的環(huán)境因素施加到實驗組上，將其與對照組比較，觀察酶促反應速率的變化，就可確定該環(huán)境因素對酶活性的影響。 (2)設計方案 項目 實驗組 對照組 材料 等量的同一種底物和等量的同種酶 試劑 待測的自變量 蒸餾水或其他無關變量 現(xiàn)象 反應速率快或慢 正常的反應速率 結論 反應速率快→對酶活性有促進作用；反應速率慢→對酶活性有抑制作用；反應速率沒有變化→無影響 (3)設置實驗步驟時，應注意 ①根據(jù)試題要求，確定單一變量，依據(jù)實驗變量進行合理分組。 ②根據(jù)實驗材料，結合實驗原理，確定實驗現(xiàn)象的觀測手段。 ③除單一變量外，確保其他實驗條件相同且適宜。 ④合理確定操作程序，確保程序合理、表達準確。 　　　　　　以探究設計與評價的形式，考查影響 酶活性的因素 1．下表為某同學探究影響酶活性因素的一組實驗，該實驗不能說明的是(　　) 甲 乙 丙 1 質量分數(shù)為2%的蔗糖溶液2 mL 質量分數(shù)為2%的蔗糖溶液2 mL 質量分數(shù)為2%的蔗糖溶液2 mL 2 蒸餾水1 mL 酵母提取液1 mL 稀釋唾液1 mL 3 37 ℃恒溫水浴，保溫10 min 4 斐林試劑1 mL 5 50～65 ℃溫水中加熱2 min 結果 藍色 磚紅色 藍色 A.酵母提取液含有蔗糖酶　　 B．酶具有專一性 C．蔗糖不是還原糖 D．高溫使酶失活 解析：選D。蔗糖在有關酶的作用下分解生成還原糖，還原糖與斐林試劑在水浴加熱的情況下，能生成磚紅色沉淀。根據(jù)乙組的實驗結果可知，酵母提取液含有蔗糖酶，A正確；乙組酵母提取液含有蔗糖酶，丙組稀釋的唾液中含有淀粉酶，乙組和丙組的實驗結果不同，能說明酶具有專一性，B正確；根據(jù)甲組的實驗結果可知蔗糖不是還原糖，C正確；實驗在37 ℃恒溫水浴中保溫10 min，蔗糖已充分反應，50～65 ℃是斐林試劑鑒定還原糖的條件，因此不能得出高溫使酶失活的結論，D錯誤。 2．(課標卷經典真題)某同學為了探究pH對人唾液淀粉酶活性的影響，設計了如下實驗步驟： ①在A、B、C、D、E 5支試管中分別加入pH 5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的適宜濃度緩沖液5 mL，再分別加入質量分數(shù)為1%的淀粉溶液1 mL，搖勻。 ②各試管中分別加入適宜濃度的唾液稀釋液1 mL，搖勻。 ③將5支試管放入70 ℃恒溫水浴中，保溫時間相同且合適。 ④取出各試管，分別加入斐林試劑2 mL，搖勻。 ⑤觀察各試管溶液的顏色，通過顏色深淺判斷唾液淀粉酶作用的最適pH。 上述實驗步驟中有2處錯誤，請更正并說明更正的理由(不考慮試劑的濃度和加入量、pH梯度以及實驗重復次數(shù))，以便實驗能得到正確的預期結果。 (1)________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：本題探究的是pH對酶活性的影響，因此pH是自變量，酶活性是因變量，溫度是無關變量，但溫度必須適宜，人唾液淀粉酶的最適溫度為37 ℃左右，70 ℃時會導致酶失活。斐林試劑由甲液NaOH和乙液CuSO4等量混合而成，且使用時必須加熱，如不加熱，則任何一組都不會發(fā)生顏色反應。 答案：(1)③中70 ℃應改為37 ℃。因為人唾液淀粉酶作用的最適溫度為37 ℃左右 (2)在觀察各試管中溶液的顏色之前應將各試管放在50～65 ℃水浴中一段時間。因為在高溫條件下斐林試劑與還原糖發(fā)生顏色反應。 以拓展實驗的形式考查影響酶活性的因素 3．(xx安徽模擬)下表是探究溫度對纖維素酶活性影響的實驗設計及結果： 試管 ① ② ③ 纖維素懸液(mL) 2 2 2 纖維素酶液(mL) 1 1 1 反應溫度(℃) 30 40 50 斐林試劑(mL) 2 2 2 磚紅色深淺 ＋＋ ＋＋＋ ＋ 注：“＋”的多少代表顏色深淺。 根據(jù)以上實驗設計及結果，以下說法不正確的是(　　) A．該實驗的自變量為溫度 B．該實驗檢測的因變量是還原糖的生成量 C．纖維素被水解成了還原糖 D．該纖維素酶的最適溫度為40 ℃ 解析：選D。由表格數(shù)據(jù)可以看出，溫度設置只有3個不同溫度，無法判斷該纖維素酶的最適溫度。 4．(xx皖北十二校聯(lián)考)低溫迫使植物細胞產生大量對細胞有害的過氧化產物，如脂質過氧化產物(MDA)。超氧化物歧化酶(SOD)能夠消除過氧化產物，從而增強植物的抗冷性。研究人員進行了“水楊酸對水稻幼苗抗冷性的影響”的實驗研究，實驗步驟及結果如表所示。請回答下列問題： 組別 處理 培養(yǎng)溫度 SOD活性[U/(gmin)] 1 25 ℃的蒸餾水澆灌 25 ℃ 7.3 2 ① ② 9.4 3 5 ℃的0.5 mmol/L水楊酸澆灌 5 ℃ 10.3 4 5 ℃的1.0 mmol/L水楊酸澆灌 5 ℃ 11.6 5 5 ℃的1.5 mmol/L水楊酸澆灌 5 ℃ 13.6 6 5 ℃的2.0 mmol/L水楊酸澆灌 5 ℃ 8.5 7 5 ℃的2.5 mmol/L水楊酸澆灌 5 ℃ 7.9 8 5 ℃的3.0 mmol/L水楊酸澆灌 5 ℃ 6.5 (1)表中①是____________________，②是__________。實驗設計時每組取50株水稻幼苗，而不是1株，目的是________________________________。 (2)本實驗需要控制的無關變量有________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________(至少寫兩點)。 (3)組別1和2對照可得結論是________________________________________________________________________ __________________________。組別2～8可得到的結論是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 在5 ℃條件下，2.0 mmol/L的水楊酸對水稻幼苗抗冷性的影響是________(填“增強”或“減弱”)。 (4)請根據(jù)5 ℃條件下的實驗結果完成水楊酸濃度與SOD活性關系的坐標折線圖。 解析：(1)2組與3～8組之間應形成對照，根據(jù)單因子變量原則，表中①應為5 ℃的蒸餾水澆灌、②是5 ℃。實驗對象多可避免偶然性，使實驗結果更準確。(2)除自變量以外，對實驗結果有影響的變量均為無關變量，比如蒸餾水和水楊酸的澆灌量、培養(yǎng)時間、幼苗發(fā)育情況等。(3)組別1與2之間的變量為溫度，且低溫時SOD活性較大，說明環(huán)境溫度降低時，水稻幼苗自身可增強抗冷性。分析2～8組SOD活性可知，在一定范圍內隨著水楊酸溶液濃度的增加，水稻的抗冷性增強，當水楊酸濃度增加到一定濃度時，水稻的抗冷性開始減弱。與2組比較可知，在5 ℃條件下，2.0 mmol/L的水楊酸對水稻幼苗抗冷性的影響是減弱。 答案：(1)5 ℃的蒸餾水澆灌　5 ℃　避免偶然性，減少誤差，使實驗結果更準確 (2)蒸餾水和水楊酸的澆灌量、光照強度、培養(yǎng)時間、幼苗的發(fā)育情況等 (3)環(huán)境溫度降低時，水稻幼苗自身可增強抗冷性　在一定范圍內隨水楊酸溶液濃度的增加，水稻幼苗的抗冷性增強；當水楊酸溶液濃度增加到一定程度時，水稻幼苗的抗冷性開始減弱(或水楊酸對水稻幼苗的抗冷性的影響具有兩重性、濃度為1.5 mmol/L左右的水楊酸溶液增強水稻幼苗抗冷性的效果最好)　減弱 (4)如圖 [學生用書P57] [核心體系構建] [填充]?、俚鞍踪|?、赗NA?、蹖Ｒ恍浴、芨咝浴、葑饔脳l件較溫和?、藿档突罨? [規(guī)范答題必備] 1．酶的本質：絕大多數(shù)酶是蛋白質，少數(shù)酶是RNA。 2．酶的作用及作用機理 (1)作用：催化作用。 (2)作用機理：降低化學反應的活化能。 3．酶的3個特性 (1)高效性。(2)專一性。(3)作用條件較溫和。 [學生用書P57] 1．(xx高考海南卷)關于生物體產生的酶的敘述，錯誤的是(　　) A．酶的化學本質是蛋白質或RNA B．脲酶能夠將尿素分解成氨和CO2 C．蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類 D．纖維素酶能夠降解植物細胞壁和細菌細胞壁 解析：選D。絕大多數(shù)酶是蛋白質，少數(shù)酶是RNA，A正確；脲酶能夠將尿素分解成氨和CO2，B正確；蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類，C正確；細菌細胞壁的主要成分是肽聚糖，纖維素酶不能降解細菌細胞壁，D錯誤。 2．(xx高考福建卷)用蛋白酶去除大腸桿菌核糖體的蛋白質，處理后的核糖體仍可催化氨基酸的脫水縮合反應。由此可推測核糖體中能催化該反應的物質是(　　) A．蛋白酶　　　　　　　　 B．RNA聚合酶 C．RNA D．逆轉錄酶 解析：選C。A項，蛋白酶在蛋白質水解成多肽的過程中起催化作用。B項，RNA聚合酶在轉錄的過程中起催化作用。C項，自然界中的酶大多數(shù)是蛋白質，少數(shù)是RNA。核糖體是由RNA和蛋白質組成的，用蛋白酶將其蛋白質除去后，處理后的核糖體仍可催化氨基酸發(fā)生脫水縮合反應，說明起催化作用的成分是RNA。D項，逆轉錄酶在逆轉錄(或反轉錄)過程中起催化作用。 3．(xx安徽六校聯(lián)考)如圖為酶與底物結合示意圖，下列有關敘述不正確的是(　　) A．酶的形狀在催化過程中會發(fā)生改變 B．底物與酶特定部位的結合具有專一性 C．此圖可表示1分子蔗糖經酶催化后產生2分子葡萄糖的過程 D．圖示過程能夠保證酶保持較高的催化活性 解析：選C。1分子蔗糖經酶催化后產生1分子葡萄糖和1分子果糖，C錯誤。 4．啤酒生產時，麥芽中多酚氧化酶(PPO)的作用會降低啤酒質量，因此，制備麥芽的過程中需降低其活性。如圖為不同pH和溫度對PPO活性影響的曲線。下列敘述錯誤的是(　　) A．PPO能催化多酚類物質的生化反應 B．相同溫度時，相同時間內pH為7.8的環(huán)境下酶促反應產物比pH為8.4時的少 C．在制備麥芽的過程中應將反應條件控制在溫度80 ℃、pH 8.4 D．高于90 ℃，若PPO發(fā)生熱變性，一定溫度范圍內溫度越高變性越快 解析：選C。本題考查與酶特性有關的曲線分析。PPO為多酚氧化酶，根據(jù)酶的專一性，可推知PPO能催化多酚類物質的生化反應。根據(jù)圖示，在相同溫度下，pH為8.4的條件下PPO活性最高，故pH為7.8的環(huán)境下，相同時間內酶促反應產物比pH為8.4時的少。由于麥芽中PPO的催化作用會降低啤酒質量，故制備麥芽的過程中PPO活性越低越好。若PPO發(fā)生熱變性，則在高于90 ℃時，一定溫度范圍內，隨著溫度的升高PPO變性越來越快。 5．(xx江西臨川一中月考)下列有關酶的實驗設計思路，正確的是(　　) A．利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和碘液驗證酶的專一性 B．利用過氧化氫和過氧化氫酶探究溫度對酶活性的影響 C．利用過氧化氫、鮮肝勻漿和二氧化錳溶液研究酶的高效性 D．利用胃蛋白酶、蛋清和pH分別為3、7、11的緩沖液驗證pH對酶活性的影響 解析：選C。A項中驗證酶的專一性實驗只能選擇斐林試劑作為鑒定試劑，而不能用碘液，A錯誤；過氧化氫隨溫度的升高分解速度加快，故不能利用過氧化氫來探究溫度對酶活性的影響，B錯誤；鮮肝勻漿含有過氧化氫酶，過氧化氫在不同的催化劑作用下分解的速率不同，C正確；胃蛋白酶的最適pH為1.5，因此所設置的pH應有一個低于最適pH、一個高于最適pH和一個最適pH的，D錯誤。 6．(xx高考重慶卷)小麥的穗發(fā)芽影響其產量和品質。某地引種的紅粒小麥的穗發(fā)芽率明顯低于當?shù)匕琢Ｐ←?。為探究淀粉酶活性與穗發(fā)芽率的關系，進行了如下實驗。 (1)取穗發(fā)芽時間相同、質量相等的紅、白粒小麥種子，分別加蒸餾水研磨、制成提取液(去淀粉)，并在適宜條件下進行實驗。實驗分組、步驟及結果如下： 　　　分組 步驟　　 紅粒管 白粒管 對照管 ① 加樣 0.5 mL提取液 0.5 mL提取液 C ② 加緩沖液(mL) 1 1 1 ③ 加淀粉溶液(mL) 1 1 1 ④ 37 ℃保溫適當時間，終止酶促反應，冷卻至常溫，加適量碘液顯色 顯色結果 ＋＋＋ ＋ ＋＋＋＋＋ 注：“＋”數(shù)目越多表示藍色越深。 步驟①中加入的C是____________，步驟②中加緩沖液的目的是________。顯色結果表明：淀粉酶活性較低的品種是________；據(jù)此推測：淀粉酶活性越低，穗發(fā)芽率越________。若步驟③中的淀粉溶液濃度適當減小，為保持顯色結果不變，則保溫時間應________。 (2)小麥淀粉酶包括α淀粉酶和β淀粉酶，為進一步探究其活性在穗發(fā)芽率差異中的作用，設計了如下實驗方案： X處理的作用是使________________。若Ⅰ中兩管顯色結果無明顯差異，且Ⅱ中的顯色結果為紅粒管顏色顯著____________白粒管(填“深于”或“淺于”)，則表明α淀粉酶活性是引起這兩種小麥穗發(fā)芽率差異的主要原因。 解析：(1)本實驗的自變量是小麥種子的提取液(去淀粉)，即提取液中酶的活性。步驟①對照管中可加入等量(0.5 mL)的蒸餾水作為空白對照。步驟②中加緩沖液的目的是控制pH，以保證酶的活性。顯色結果表明，淀粉酶活性越高，則藍色越淺；反之，則藍色越深，即紅粒小麥的淀粉酶活性較低，其穗發(fā)芽率也較低。若步驟③中淀粉溶液(反應底物)濃度適當減小，要使顯色結果不變，保溫時間應縮短，以縮短反應時間。(2)本實驗要探究兩種淀粉酶活性對穗發(fā)芽率的影響，則自變量為淀粉酶的種類，因變量仍為顯色結果。相對于實驗Ⅰ中使α淀粉酶失活(保留β淀粉酶活性)(作為對照)，實驗Ⅱ也應使β淀粉酶失活(保留α淀粉酶活性)。若實驗Ⅰ(α淀粉酶失活)中兩管顯色結果無明顯差異，且實驗Ⅱ(β淀粉酶失活)中顯色結果為紅粒管顏色顯著深于白粒管，則可以說明α淀粉酶活性對顯色結果造成了影響，即α淀粉酶活性是引起兩種小麥穗發(fā)芽率差異的主要原因。 答案：(1)0.5 mL蒸餾水　控制pH　紅粒小麥　低　縮短 (2)β淀粉酶失活　深于 [基礎題] 1．下列關于酶的說法，正確的是(　　) A．都是由氨基酸組成的 B．最適溫度都是37 ℃ C．只在活細胞內發(fā)揮作用 D．都能降低化學反應的活化能 解析：選D。多數(shù)酶的化學本質是蛋白質，少數(shù)是RNA，因此構成酶的基本單位是氨基酸或核糖核苷酸，A錯誤；不是所有酶的最適溫度都是37 ℃，一般來說，人體內酶的最適溫度是37 ℃，植物體內的酶最適溫度在40～50 ℃之間，B錯誤；酶可以在細胞內、外發(fā)揮作用，C錯誤；酶的催化機理是降低化學反應的活化能，D正確。 2．某研究小組在研究不同金屬離子對某水解酶活性的影響時，得到下圖結果。下列分析不正確的是(　　) A．Mn2＋降低了反應過程所必需的活化能 B．Co2＋或Mg2＋可能導致酶結構的改變使其活性降低 C．不同離子對酶的活性有提高或降低作用 D．該水解酶的用量是實驗的無關變量 解析：選A。從圖中可以看出，Mn2＋只是提高了某水解酶活性，但并不能降低反應過程所必需的活化能；Co2＋或Mg2＋可能導致酶結構的改變使某水解酶活性降低；從圖中可以看出，有的離子可以提高酶的活性，有的離子可以降低酶的活性；不同金屬離子是實驗的自變量，該水解酶的活性是實驗的因變量，該水解酶的用量是實驗的無關變量。 3．如下圖中的新鮮土豆片與H2O2接觸后，產生的現(xiàn)象及推測錯誤的是(　　) A．若有大量氣體產生，可推測新鮮土豆片中含有過氧化氫酶 B．若增加新鮮土豆片的數(shù)量，量筒中產生氣體的速度加快 C．一段時間后氣體量不再增加是因為土豆片的數(shù)量有限 D．為保證實驗的嚴謹性，需要控制溫度等無關變量 解析：選C。氣體量不再增加可能是H2O2被完全分解了。 4．如圖是人體內某種酶的活性曲線，這種酶可能催化下列哪一項化學反應(　　) A．葡萄糖合成糖原 B．氨基酸合成蛋白質 C．蛋白質分解成多肽 D．葡萄糖分解成二氧化碳和水 答案：C 5．酶作為一種生命活動的催化劑，在生物的新陳代謝、物質合成、能量轉化以及降解等各種反應中都起著重要作用，以下4種酶的作用對象或物質分別是(　　) ①蛋白酶　②RNA聚合酶?、垭拿浮、芙庑? A．脂肪酶、磷酸二酯鍵、肽鍵、氫鍵 B．淀粉酶、氫鍵、肽鍵、氫鍵 C．蛋白質、磷酸二酯鍵、氫鍵、氫鍵 D．蛋白質、磷酸二酯鍵、肽鍵、磷酸基團 解析：選A。蛋白酶能催化蛋白質分解。RNA聚合酶用于DNA轉錄生成RNA的過程中，形成磷酸二酯鍵。肽酶催化多肽中肽鍵的斷裂。解旋酶用于DNA分子復制過程中氫鍵的斷裂。 6．如圖表示某種酶催化某二糖的水解過程。據(jù)圖分析下列說法正確的是(　　) A．該過程可以表示麥芽糖的水解 B．反應前后酶的化學性質沒有發(fā)生改變 C．該酶也可以催化其他二糖的水解 D．該反應過程中的酶只能利用一次 解析：選B。由圖可知，該二糖由兩種不同的單糖構成，可能是蔗糖或乳糖。反應前后酶的化學性質沒有發(fā)生改變，該酶可以重復利用。酶具有專一性，該酶不能催化其他二糖的水解。 7．下表是某同學為驗證酶的專一性而設計的實驗方案，a～d代表試管，①～⑦代表實驗步驟。對該實驗方案的有關評價，錯誤的是(　　) a b c d ① 淀粉溶液 2 mL 蔗糖溶液 2 mL 唾液淀粉酶 溶液2 mL 唾液淀粉酶 溶液2 mL ② 50～65 ℃溫水中水浴加熱10 min ③ 將c倒入a，將d倒入b ④ 50～65 ℃溫水中水浴加熱10 min ⑤ 加入現(xiàn)配的斐林試劑溶液2 mL ⑥ 37 ℃恒溫水浴 ⑦ 觀察并記錄顏色變化 A.淀粉酶的用量屬于自變量 B．②和④會影響酶的活性 C．②④和⑥的溫度設置錯誤 D．④和⑤的順序有誤 解析：選A。從表格中的操作方法可以看出，唾液淀粉酶的作用底物才是自變量。該實驗的溫度控制錯誤。四組試管應溫度相等，酶加到底物后要保持恒溫，無需加熱，即②步驟錯誤。其實驗步驟應為①③⑥⑤④⑦。 8. (xx吉林大學附中一模)右圖表示在最適溫度和pH條件下，某種酶的催化反應速率與反應物濃度之間的關系。結合影響酶催化反應速率的因素分析，下列有關說法正確的是(　　) A．若在A點提高反應溫度，反應速率會加快 B．若在B點增加酶的濃度，反應速率不會加快 C．若在C點增加反應物濃度，反應速率將加快 D．反應物濃度是限制曲線AB段反應速率的主要因素 解析：選D。由于該圖是在最適溫度下繪制的，因此改變溫度會使酶活性降低，反應速率變慢，A錯誤；B點后反應速率不隨反應物濃度的增加而加快，說明反應物濃度不是限制因素，可能受酶濃度的限制，因此當在B點及以后提高酶的濃度，反應速率加快，提高反應物濃度，反應速率不會變化，B、C錯誤；從曲線圖可知，A點后B點前，隨著反應物濃度的增加，反應速率加快，說明此時的主要限制因素是反應物濃度，D正確。 9．(xx廣西桂林中學質檢)某生物興趣小組要設計實驗驗證酶的專一性。請根據(jù)題意回答問題： 備選實驗材料和用具：蛋白質塊，牛胰蛋白酶溶液，牛胰淀粉酶溶液，蒸餾水，雙縮脲試劑，試管若干，恒溫水浴鍋，時鐘等。 (1)該實驗的自變量是________________。 (2)實驗步驟： ①取兩支潔凈的相同試管，編號為甲、乙。 ②取5 mL牛胰蛋白酶溶液加到甲試管中，再取牛胰淀粉酶溶液加到乙試管中。 ③將兩支試管置于恒溫水浴鍋中，保溫(37 ℃)5分鐘。 ④分別加入等體積等質量的蛋白質塊，其他條件相同且適宜。 ⑤一段時間后，分別加入等量的雙縮脲試劑進行檢測，記錄實驗結果。 上述實驗步驟中，有兩處明顯錯誤，請找出這兩處錯誤并更正。 ①________________________________________________________________________。 ②________________________________________________________________________。 (3)如果想驗證過氧化氫酶具有高效性的特點，應該用過氧化氫酶和________對________進行催化效率比較。 解析：(1)探究酶的專一性，需要設計對照實驗，其實驗變量是酶的有無及種類或者是底物種類。(2)實驗步驟中加入到乙試管中的牛胰淀粉酶溶液沒有注明用量，不符合單一變量原則，兩支試管中都有蛋白質類酶，遇雙縮脲試劑呈紫色，因而兩支試管都有紫色，不能用雙縮脲試劑檢測。(3)驗證過氧化氫酶具有高效性的特點，應該用過氧化氫酶和Fe3＋對H2O2進行催化效率比較。 答案：(1)酶的有無及種類(或酶的有無及底物種類) (2)①不符合單一變量原則(或不符合等量原則)，應取5 mL牛胰淀粉酶溶液加到乙試管中 ②不能用雙縮脲試劑檢測，應直接觀察蛋白質塊體積的大小 (3)Fe3＋　H2O2 [提升題] 10．美國加州大學教授盧云峰做出一個納米級小籠子，可把分解酒精的酶(化學本質不是RNA)裝入其中，有了這身“防護服”，酶就不怕被消化液分解，可安心分解酒精分子。下列推測合理的是(　　) A．該成果中分解酒精的酶位于細胞質基質中 B．該酶進入人體后能分解體內無氧呼吸的產物 C．納米級小籠子可通過主動運輸?shù)姆绞奖晃者M入血液 D．“防護服”的主要功能是阻礙消化道內蛋白酶的作用 解析：選D。該成果中分解酒精的酶位于納米級小籠子中，隨著食物進入消化道分解酒精，A錯誤；該酶進入人體后能分解人體喝入的酒精，但是人體內無氧呼吸的產物乳酸不能被其分解，B錯誤；納米級小籠子不進入血液，直接進入消化道分解喝入的酒精，C錯誤；納米級小籠子可以防止消化道內蛋白酶將分解酒精的酶水解，D正確。 11．(xx徐州模擬)細胞代謝中某種酶與其底物、產物的關系如下圖所示，下列有關敘述正確的是(　　) A．酶1與產物B結合后失活，說明酶的功能由其氨基酸序列決定 B．酶1的變構位點和活性位點的結構取決于特定的氨基酸序列 C．酶1有兩種底物且能與產物B結合，因此酶1不具有專一性 D．酶1與產物B的相互作用不能防止細胞產生過多的產物A 解析：選B。酶的功能由其空間結構決定，其變構位點與活性位點均取決于酶的空間結構；酶1有兩種底物且能與產物B結合，不能說明酶沒有專一性；從圖中可知，酶1的活性與產物B的濃度有關，當產物B濃度高時，酶1無活性，因此酶1與產物B的相互作用能防止細胞內產生過多的產物A。 12．(xx銀川一中月考)酶促反應在細胞中往往不是獨立發(fā)生的，酶促反應的序列性使得不同的酶促反應彼此按一定順序相互聯(lián)系，如圖為嘧啶核苷酸的合成過程圖，請分析下列有關酶的論述，不正確的是(　　) A．若控制圖中某種酶的基因發(fā)生基因突變，則一定無法合成嘧啶核苷酸 B．若嘧啶核苷酸的數(shù)量過多，則“？”代表抑制酶1的活性 C．天冬氨酸和嘧啶核苷酸均可以與酶1結合，但效果不同 D．酶1～5可以在細胞內發(fā)揮作用，也可以在細胞外發(fā)揮作用 解析：選A。當控制題圖中某種酶的基因發(fā)生了基因突變時，該基因控制的性狀不一定改變，故突變后的基因可能仍能夠合成相應的酶；為了防止嘧啶核苷酸數(shù)量過多，“？”代表的是抑制酶1的活性；酶1與天冬氨酸結合催化天冬氨酸合成中間體A，嘧啶核苷酸與酶1結合抑制酶1的活性；只要提供適宜的條件，就能使酶發(fā)揮作用，因此酶促反應的場所可以是細胞內，也可以是細胞外。 13．研究化合物P對淀粉酶活性的影響時，得到如圖所示的實驗結果。下列有關敘述不正確的是(　　) A．底物濃度可影響酶促反應速率 B．若反應溫度不斷升高，則A點持續(xù)上移 C．P對該酶的活性有抑制作用 D．曲線①所代表的反應比曲線②所代表的反應先達到反應平衡 解析：選B。由圖可知，底物濃度在一定范圍內，酶促反應速率隨底物濃度的增加而加快；酶促反應都有適宜的溫度，超過這一溫度時，酶的活性會降低，酶促反應速率下降，A點不會持續(xù)上移；與僅有酶的曲線相比，加入化合物P后酶促反應速率降低，說明P對該酶的活性有抑制作用；從坐標圖可以看出，曲線①條件下比曲線②條件下反應速率高，故達到反應平衡所需的時間要短。 14．(xx貴陽監(jiān)測)實驗室中提供了新取的唾液(含唾液淀粉酶)、新鮮的肝臟研磨液、可溶性淀粉溶液、H2O2溶液、碘液及實驗所需的全部儀器、工具等(溶液濃度符合要求)。某研究性學習小組設計以下實驗方案探究溫度對酶活性的影響。據(jù)此回答下列問題： 步驟 組別 甲 乙 丙 A試管 B試管 C試管 D試管 E試管 F試管 1.加入底物 5 mL — 5 mL — 5 mL — 2.加入酶液 — 5滴 — 5滴 — 5滴 3.在一定溫度的溫水中水浴5分鐘 9 ℃ 9 ℃ ？ ？ 65 ℃ 65 ℃ 4.將__？__，繼續(xù)在相應溫度下水浴保溫 5分鐘 5分鐘 5分鐘 5.檢測 ？ ？ ？ 注：“—”表示該步不處理。 (1)步驟1應選擇________(填“H2O2溶液”或“淀粉溶液”)作為反應底物。 (2)步驟2加入的是含________酶的溶液；步驟3乙組C、D兩試管的水浴溫度應控制在________℃。 (3)請完善步驟4的操作：________________________________________________________________________。 (4)步驟5應選用________(填“碘液”或“帶火星的木條”)進行檢測。 解析：(1)本實驗自變量是溫度，而溫度會影響過氧化氫的分解，所以，步驟1中的底物應選擇淀粉溶液。(2)步驟2應加入的是含唾液淀粉酶的溶液。甲組的溫度為9 ℃，溫度較低，丙組的溫度為65 ℃，溫度較高，所以乙組溫度應設置為唾液淀粉酶的最適溫度，即在35～40 ℃范圍內。(3)在每組的兩支試管中分別加入底物和酶溶液保溫一段時間后，應將每組兩支試管中的溶液混合，然后在對應溫度下保溫。(4)因所用底物為淀粉，而淀粉遇碘會變藍，所以，檢測時應加入碘液。 答案：(1)淀粉溶液 (2)(唾液)淀粉　35～40 (3)每組的兩支試管的溶液混合 (4)碘液