2019-2020年高考生物大二輪復習 第一編 專題整合突破 專題9 現(xiàn)代生物科技 第1講 基因工程和細胞工程.doc
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2019-2020年高考生物大二輪復習 第一編 專題整合突破 專題9 現(xiàn)代生物科技 第1講 基因工程和細胞工程 1.農桿菌中含有一個大型的Ti質粒(如圖所示),在侵染植物細胞的過程中,其中的T-DNA片段轉入植物的基因組。若想用基因工程并通過農桿菌向某種植物中導入抗旱基因,以下分析不合理的是( ) A.若用Ti質粒作為抗旱基因的載體,目的基因的插入位置應該在T-DNA片段內,且要保證復制起始點和用于轉移T-DNA的基因片段不被破壞 B.將重組Ti質粒導入農桿菌中時,可以用Ca2+處理細菌 C.轉基因抗旱植物培育是否成功的最簡單檢測方法是看該植物是否具有抗旱性狀 D.若能夠在植物細胞中檢測到抗旱目的基因,則說明該基因工程項目獲得成功 答案 D 解析 若用Ti質粒作為抗旱基因的載體,目的基因的插入位置應該在T-DNA片段內,且要保證復制起始點、終止點和用于轉移T-DNA的基因片段不被破壞,否則不會成功;將重組Ti質粒導入農桿菌中時,可以用Ca2+處理細菌,便于完成轉化;轉基因抗旱植物培育是否成功的最簡單檢測方法是看該植物是否具有抗旱性狀;能夠在植物細胞中檢測到抗旱目的基因,并能成功表達出抗旱性狀,才說明基因工程項目獲得成功。 2.下圖表示利用基因工程生產胰島素的三種途徑,據(jù)圖判斷下列說法錯誤的是( ) A.選取的質粒要帶有標記基因 B.受體細胞A一般選用受精卵,過程③僅用到了胚胎移植技術 C.受體細胞B不選用卵細胞或受精卵,一般選用萵苣的體細胞 D.⑥常用的方法是用鈣離子處理大腸桿菌,使其易于吸收重組質粒M 答案 B 解析 為了將含有目的基因(胰島素基因)的細胞篩選出來,選取的質粒要帶有標記基因。將重組質粒導入受體細胞后,還要在體外進行動物細胞的培養(yǎng),形成早期胚胎。因此過程③還需動物細胞培養(yǎng)技術。因為培養(yǎng)卵細胞得到的是單倍體植物,受精卵位于植物的胚珠內,不易獲取,因此將重組質粒導入分裂能力較強的體細胞中。用鈣離子處理大腸桿菌,使大腸桿菌處于感受態(tài),易于重組質粒進入細菌體內。 3.圖中甲、乙、丙表示生物個體或結構,①~③表示相應過程,下列敘述與圖示不符的是 ( ) A.若甲為二倍體植株,乙為花粉粒,丙為單倍體,則③過程需要用秋水仙素處理 B.若甲為植物體一部分,乙為愈傷組織,丙為胚狀體,則①過程通常在避光的條件下進行 C.若甲為成熟哺乳動物個體,乙為配子,丙為受精卵,則基因重組發(fā)生在②過程中 D.若甲為成年母羊,乙為去核的卵母細胞,丙為重組細胞(胚胎),則③過程的核心技術是胚胎移植 答案 C 解析 二倍體的花粉離體培養(yǎng)得到單倍體,單倍體幼苗期用秋水仙素處理可獲得二倍體;A正確。離體的植物組織、器官或細胞通過脫分化形成愈傷組織過程中不需要光照,由愈傷組織通過再分化得到胚狀體,進而可發(fā)育成完整的植株;B正確?;蛑亟M發(fā)生在減數(shù)分裂形成配子過程中,即①過程中,C錯誤。由重組細胞(胚胎)得到個體需要進行胚胎移植;D正確。 4.Ⅰ.下圖是利用基因工程方法培育抗蟲棉的過程。請據(jù)圖回答相關問題: (1)從蘇云金芽孢桿菌的DNA上獲取抗蟲基因,需要用到的工具是________________,此工具主要是從________生物中分離純化出來的,它能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的________________鍵斷開。 (2)構建重組質粒時,常用Ti質粒作為載體,是因為Ti質粒上具有__________,它能把目的基因整合到受體細胞的________________上。 (3)E過程是利用________________技術完成的,要確定抗蟲基因導入棉花細胞后,是否賦予了棉花抗蟲特性,在個體水平上還需要做________實驗;若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產生了相應毒蛋白,在分子水平上可利用________________方法進行檢測。 (4)在轉基因綿羊培育過程中,可利用________法將目的基因導入該種生物的________中。 Ⅱ.請回答下面有關胚胎工程的問題: (1)哺乳動物的精子發(fā)生是在_______(場所)內完成的。該過程可以分為三個階段:第一階段位于曲細精管壁的精原細胞進行_______分裂,產生大量精原細胞,經(jīng)一系列變化后,進一步形成初級精母細胞;第二階段減數(shù)分裂;第三階段_______________。 (2)在受精階段,防止多精入卵的兩道屏障是_____和______。 答案 Ⅰ.(1)限制性核酸內切酶/限制酶 原核 磷酸二酯 (2)T-DNA/可轉移的DNA 染色體DNA (3)植物組織培養(yǎng) 抗蟲(或抗病)接種 抗原—抗體雜交 (4)顯微注射 受精卵 Ⅱ.(1)睪丸 有絲 精細胞變形形成精子/變形形成精子 (2)透明帶反應 卵細胞膜反應 解析?、?(1)獲取目的基因需要用限制酶將其切下來,限制酶主要是從原核生物中分離純化出來的。限制酶斷開的是磷酸二酯鍵。(2)Ti質粒上具有T-DNA,它能把目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上。(3)E過程:將棉花細胞培養(yǎng)成抗蟲棉,用到植物組織培養(yǎng)技術。對抗蟲棉的個體水平檢測要做抗蟲接種實驗。若要檢測毒蛋白的存在,可利用抗原-抗體雜交。(4)將目的基因導入動物細胞的方法是顯微注射技術,需導入到動物的受精卵中。Ⅱ.(1)精子的發(fā)生在睪丸內,減數(shù)分裂產生的精細胞變形形成精子。(2)防止多精入卵的兩道屏障是透明帶反應,卵細胞膜反應。 5.資料顯示:中國每年移植器官需求人數(shù)為150萬。中國每年器官移植手術量超過1萬例,器官供應比例不足百分之一。 2014年12月3日,中國人體器官捐獻與移植委員會負責人稱,從2015年1月1日起,中國將停止使用死囚作為移植供體來源。此舉受到人權組織的廣泛歡迎,但令中國移植器官短缺問題更加嚴重??蒲泄ぷ髡甙涯抗馔断蛄酥委熜钥寺〉难芯?。 (1)取病人體細胞的細胞核,移入一個已經(jīng)________的卵母細胞中,構成重組細胞。這個過程供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞,原因是_____________________。 (2)重組細胞需要經(jīng)過誘導分化,形成相應的組織、器官才可用于移植,這個過程采用的技術是______。培養(yǎng)液中通常要添加______等一些天然成分,而氣體環(huán)境中CO2的主要作用是________。培養(yǎng)過程中,為了清除代謝產物,防止對細胞造成危害,應定期_______。 (3)用此方式得到的器官進行移植的優(yōu)點是____________。 (4)中國政府不反對治療性克隆,但禁止______________。 答案 (1)去核 10代以內的細胞能保持正常的二倍體核型 (2)動物細胞培養(yǎng) 血清、血漿 維持培養(yǎng)液的pH 更換培養(yǎng)液 (3)不發(fā)生免疫排斥 (4)生殖性克隆 解析 (1)核移植時將人體細胞的細胞核,移入去核的卵母細胞中。由于10代以內的細胞能保持正常的二倍體核型,故供體細胞一般選10代以內的細胞。(2)重組細胞形成相應的組織、器官過程需用動物細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)過程防止代謝產物對細胞造成危害應定期更換培養(yǎng)液。(3)用此方式獲得的器官進行移植,其優(yōu)點是不發(fā)生免疫排斥反應。(4)中國政府禁止生殖性克隆。 6.回答下列有關基因工程的問題。 (1)用限制酶Hind Ⅲ、Bam H Ⅰ同時切割目的基因,可得到________個DNA片段。 (2)用限制酶Hind Ⅲ和Bam H Ⅰ切割Ti質粒,可得到________個DNA片段。 (3)過程①需要用到________酶。 (4)切割目的基因和質粒的酶與①過程的酶作用的化學鍵都是 ______________________________________________________。 (5)如果把目的基因直接注入植株細胞,一般會被植株細胞中的 ______________________________________________________。 (6)構建重組質粒時,常用Ti質粒作為載體,是因為Ti質粒上具有_____,它能把目的基因整合到受體細胞(植株細胞)的______上。 (7)將目的基因導入植物細胞,除采用上圖中的方法外,還可采用________法和花粉管通道法。 答案 (1)4 (2)2 (3)DNA連接 (4)磷酸二酯鍵 (5)核酸酶分解 (6)T-DNA(可移動的DNA) 染色體DNA (7)基因槍 解析 (1)由圖知用Hind Ⅲ、Bam H Ⅰ同時切割目的基因可得到4個DNA片段。用Hind Ⅲ和Bam HⅠ切割Ti質粒可得到2個DNA片段。(3)過程①連接兩個DNA片段用DNA連接酶。(4)限制酶和DNA連接酶作用的都是磷酸二酯鍵。(5)若將目的基因直接注入植物細胞,一般會被植物細胞中的核酸酶分解。(7)將目的基因導入植物細胞的方法是農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法。 7.如圖為基因工程的過程圖,請據(jù)圖分析回答下列問題: (1)圖中Ⅰ是________,酶A是________,酶B是________,除了質粒常用作運載體外,常用的還有________。 (2)如果要培養(yǎng)抗蟲棉,可以采用農桿菌轉化法將重組質粒導入受體細胞,選用的質粒為________質粒,上面含有________序列,能夠幫助把目的基因整合到宿主細胞的染色體上。獲得的Ⅲ(細胞)需要通過________技術培養(yǎng)成植株。如果要培養(yǎng)轉基因動物,Ⅱ通常為________,常用的將目的基因導入的方法是________,如果要利用細菌生產人的胰島素,常用________處理細菌,使其處于感受態(tài)。 答案 (1)目的基因 限制酶 DNA連接酶 動植物病毒和λ噬菌體的衍生物 (2)Ti T-DNA 植物組織培養(yǎng) 受精卵 顯微注射法 鈣離子 解析 本題主要考查基因工程的相關知識,意在考查考生的識記能力和對比分析能力。(1)圖中Ⅰ是目的基因,酶A是限制酶,酶B是DNA連接酶,運載體除了質粒外常用的還有動植物病毒和λ噬菌體的衍生物,Ⅱ是受體細胞。(2)如果要培養(yǎng)抗蟲棉,可以采用農桿菌轉化法將重組質粒導入受體細胞,選用的質粒為Ti質粒,上面含有T-DNA序列,能夠幫助把目的基因整合到宿主細胞的染色體上。獲得的Ⅲ(細胞)需要通過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)成植株。如果要培養(yǎng)轉基因動物,Ⅱ通常是受精卵,常用的將目的基因導入的方法是顯微注射法,如果要利用細菌生產人的胰島素,常用鈣離子處理使細菌處于感受態(tài)。 8.微載體是由天然葡聚糖等組成的顆粒,其直徑很小,常用于貼壁生長的細胞培養(yǎng)。微載體大規(guī)模細胞培養(yǎng)技術已廣泛應用于科研生產,其流程圖如下。 (1)微載體加入培養(yǎng)罐中后,通過攪動使其保持懸浮狀態(tài),這樣不僅能讓細胞與培養(yǎng)液充分接觸,而且便于細胞的________,所以選用的微載體顆粒直徑應盡可能小。 (2)圖中過程a的處理是____________。 (3)培養(yǎng)罐培養(yǎng)所需的條件是____________。 (4)在產生單克隆抗體過程中,雜交瘤細胞在加入培養(yǎng)罐前,需進行篩選,其目的是篩選出______________________________的細胞群。 (5)工程菌和動物細胞均能用于生產乙肝疫苗,它們的根本區(qū)別在于導入的受體不同,前者是導入能高效快速表達的________,而后者是導入倉鼠卵巢細胞。 答案 (1)附著(固著) (2)用胰蛋白酶分解成單個細胞 (3)充足的營養(yǎng)、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境、無菌無毒(答對任意三項即可) (4)既能產生特異性抗體,又能迅速大量繁殖 (5)工程菌(細菌、酵母菌等) 解析 本題主要考查動物細胞培養(yǎng)原理的應用,意在考查考生的理解能力。圖中過程a是用胰蛋白酶或(膠原蛋白酶)處理,將組織塊分解成單個細胞;培養(yǎng)罐培養(yǎng)所需條件,也就是細胞培養(yǎng)的條件,應從營養(yǎng)成分、溫度、pH、氧氣等方面回答;雜交瘤細胞在加入培養(yǎng)罐前需要進行篩選,其目的是獲得既能產生特異性抗體、又能迅速大量繁殖的細胞群;轉基因工程中,導入的“能高效快速表達”的受體細胞,一般是工程菌(或細菌、酵母菌等)。 9.在單克隆抗體制備過程中,篩選出雜交瘤細胞是關鍵步驟之一。已知細胞合成DNA有D途徑和S途徑兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人B淋巴細胞中有這兩種合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑,但能不斷分裂增殖。將這兩種細胞在培養(yǎng)皿中混合,加促融劑促進細胞融合,獲得雜種細胞并產生單克隆抗體。請回答下列問題: 骨髓瘤細胞 (1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞,兩種細胞膜也能“融合”在一起,這說明細胞膜具有________。此過程,常用的與誘導植物細胞融合相同的誘導劑是________,除了雜種細胞外,還有________種兩兩融合的細胞。 (2)上圖中②過程為動物細胞培養(yǎng)過程,培養(yǎng)液中還需通入氣體物質,其中通入CO2的目的是________________________。為了從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞,在③過程需向培養(yǎng)液中加入________,理由是在該培養(yǎng)液中,只有雜交瘤細胞可以利用________途徑合成DNA而實現(xiàn)分裂增殖。③過程表示篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞,因為雜交瘤細胞________(填“只有一種”或“不只一種”),且雜交瘤細胞不一定能產生________。 (3)雜交瘤細胞繁殖時進行的是________分裂。 (4)單克隆抗體注入體內后可以自動追蹤抗原(病原體或癌變細胞等)并與之結合,而絕不攻擊任何正常細胞,故稱為“生物導彈”,這利用的是_____________。 答案 (1)一定的流動性 聚乙二醇 2 (2)維持培養(yǎng)液的pH 氨基嘌呤 淋巴細胞中的S 不只一種 (特異性)抗體 (3)有絲 (4)抗原與抗體之間的結合具有高度特異性 解析 本題考查單克隆抗體的制備及對單克隆抗體的特點的掌握,意在考查考生的理解與分析能力。(1)動物細胞融合利用的是細胞膜具有一定的流動性,促融時常用的是聚乙二醇或滅活的病毒,但動植物都常用的是聚乙二醇。融合的細胞除雜交瘤細胞外,還有自身融合的細胞,如骨髓瘤細胞—骨髓瘤細胞。 (2) 細胞類型 合成DNA 途徑 能阻斷 的途徑 細胞能增殖 的類型 B淋巴細胞 D、S D 本身不能增殖 骨髓瘤細胞 D D 阻斷后不能增殖 雜交瘤細胞 D、S D 通過S途徑合 成DNA,增殖 B淋巴細胞- B淋巴細胞 D、S D 本身不能增殖 骨髓瘤細胞- 骨髓瘤細胞 D D 阻斷后不能增殖 由于抗原有多種抗原決定簇,因此經(jīng)一種抗原刺激,能產生多種B淋巴細胞(漿細胞),每種漿細胞只能產生一種特定的抗體。雜交瘤細胞由于是經(jīng)不同的細胞融合形成的,原先能表達的基因在雜交瘤細胞中不一定能表達,且雜交瘤細胞有多種,每一種只能產生一種特定的抗體,所以要進行鑒定并篩選。(3)雜交瘤細胞通過有絲分裂增殖。(4)“生物導彈”是利用抗體與抗原能特異性結合而設計的。 10.Bt毒蛋白基因是從蘇云金芽孢桿菌中分離出來的抗蟲基因,因其表達產物Bt毒蛋白具有殺蟲效果好、安全、高效等優(yōu)點而成為應用最為廣泛的基因。下圖是轉基因玉米的轉化過程圖,其中Hind Ⅲ、BamH Ⅰ和BstⅠ為限制性核酸內切酶。請分析回答: (1)圖中①處宜采用的限制性核酸內切酶有________、________;②處還需要________酶。 (2)③④過程被稱為________。 (3)檢測該轉基因玉米是否具有抗玉米螟的特性,可采用_____實驗來進行個體生物學水平的鑒定。 (4)生態(tài)環(huán)境中穩(wěn)定下來的轉基因作物,可能會在生態(tài)系統(tǒng)中通過食物鏈產生累積和富集效應,引起一定的轉基因污染,因此轉基因作物的種植推廣,還要從自然—經(jīng)濟—社會效益方面考慮,這遵循的生態(tài)工程建設的原理是_______________、______________。 答案 (1)Hind Ⅲ BamHⅠ(兩處答案順序可顛倒) DNA連接 (2)轉化(目的基因導入并表達) (3)抗蟲的接種 (4)協(xié)調與平衡原理 整體性原理 解析 本題以熱點材料轉基因生物為背景,主要考查基因工程的操作流程、基因工程所用的工具、獲取目的基因的方法、基因表達載體的構建、目的基因是否翻譯成蛋白質及生態(tài)工程的知識,意在考查考生對相關知識的理解能力和綜合運用能力。(1)通過與切割質粒的限制性內切酶的比較可知,①處宜采用的限制性內切酶為Hind Ⅲ和BamHⅠ;②處是基因表達載體的構建,需要DNA連接酶。(2)③④過程是將目的基因導入受體細胞,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程,該過程被稱為轉化。(3)檢測該轉基因玉米是否具有抗玉米螟的特性,可采用的個體生物學水平的鑒定方法是抗蟲的接種實驗。(4)推廣的轉基因作物,可能適應環(huán)境能力更強,會破壞生態(tài)系統(tǒng)的平衡,因此要推廣種植轉基因作物,需從生態(tài)工程建設角度考慮,遵循協(xié)調與平衡原理和整體性原理。- 配套講稿:
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