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2019-2020年高考生物二輪復(fù)習(xí)基因工程與克隆技術(shù)學(xué)前診斷 考點(diǎn)一 基因工程與蛋白質(zhì)工程 (3)用基因工程方法制備血紅蛋白時(shí)，可先提取早期紅細(xì)胞中的____________，以其作為模板，在______________酶的作用下反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。cDNA與載體需在____________________酶的作用下，拼接構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入受體菌后進(jìn)行表達(dá)。 (4)檢測(cè)受體菌是否已合成血紅蛋白，可從受體菌中提取________，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行__________雜交，若出現(xiàn)雜交帶，則表明該受體菌已合成血紅蛋白。 解析：(1)基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段，遺傳信息儲(chǔ)存在基因堿基對(duì)的排列順序中。(2)蛋白質(zhì)工程是指通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求，故題中所述不屬于蛋白質(zhì)工程。(3)利用逆轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因時(shí)，需先提取mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。cDNA與載體需要在限制酶和DNA連接酶的作用下拼接構(gòu)建成基因表達(dá)載體，才可導(dǎo)入受體菌。(4)檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，需要從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交。 答案：(1)堿基對(duì)　(2)不屬于　沒(méi)有對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造　(3)mRNA　逆轉(zhuǎn)錄　限制酶和DNA連接　(4)蛋白質(zhì)　抗原—抗體 2．下圖是科學(xué)家利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的部分過(guò)程。請(qǐng)結(jié)合相關(guān)知識(shí)回答問(wèn)題： (1)除圖示方法獲得目的基因(人胰島素基因)外，還可通過(guò)__________的方法獲得目的基因。 (2)圖示所獲得的人胰島素基因在大腸桿菌中不能表達(dá)，需要質(zhì)粒為其提供________________等調(diào)控因子；質(zhì)粒含有一個(gè)或多個(gè)__________切割位點(diǎn)，供目的基因插入其中；質(zhì)粒上還含有______，供重組DNA的鑒定和選擇。 (3)圖中切割人胰島素基因和質(zhì)粒的酶(酶A)相同，其目的是________________。將重組DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌前，常需用________處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。 (4)由于大腸桿菌中沒(méi)有________________________等結(jié)構(gòu)，其內(nèi)合成的人胰島素沒(méi)有活性，需要經(jīng)過(guò)再加工。解析：(1)獲得目的基因的方法除題圖所示方法外，還有人工合成法。(2)圖示所獲得的人胰島素基因由于不含啟動(dòng)子和終止子，因此需要載體——質(zhì)粒提供。質(zhì)粒上還應(yīng)含有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供目的基因插入其中；質(zhì)粒上還含有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。(3)用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，以便獲得相同的末端。將重組DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌前，需用Ca2＋處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。(4)由于大腸桿菌中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等結(jié)構(gòu)，其內(nèi)合成的人胰島素沒(méi)有活性，需要經(jīng)過(guò)再加工。 答案：(1)人工合成　(2)啟動(dòng)子、終止子　限制酶　標(biāo)記基因　(3)獲得相同的末端　Ca2＋　(4)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體 3．(xx天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。 (1)為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取______合成總cDNA，然后以cDNA為模板，使用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。 (2)啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是________(填寫(xiě)字母，單選)。 A．人血細(xì)胞啟動(dòng)子　　　 　B．水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子 C．大腸桿菌啟動(dòng)子 D．農(nóng)桿菌啟動(dòng)子 (3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，需添加酚類(lèi)物質(zhì)，其目的是________________________________________________________________________。 (4)人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過(guò)膜系統(tǒng)加工形成正確空間結(jié)構(gòu)才有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優(yōu)勢(shì)是____________________________________ ________________________。 (5)為證明rHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)rHSA與______的生物學(xué)功能一致。 解析：(1)要想合成總cDNA，需要采集人的血液獲得總RNA。由于DNA的復(fù)制只能從脫氧核苷酸單鏈的5′端向3′端延伸，因而引物均應(yīng)結(jié)合在DNA單鏈的3′端，而DNA的兩條鏈反向平行，由此可以確定引物在另一條脫氧核苷酸單鏈的位置和方向。(2)若要從水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)獲得目的產(chǎn)物，需要控制該目的基因只在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。由題干中的信息“啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性”可知，此處需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子。(3)酚類(lèi)物質(zhì)能吸引農(nóng)桿菌，因此在水稻受體細(xì)胞中添加該類(lèi)物質(zhì)，能吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因的成功轉(zhuǎn)化。(4)途徑Ⅰ和Ⅱ的主要區(qū)別是途徑Ⅰ的受體細(xì)胞是真核細(xì)胞，途徑Ⅱ的受體細(xì)胞是原核細(xì)胞。由于人體合成的初始HSA多肽需要經(jīng)膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才有生物活性，所以選擇途徑Ⅰ獲取rHSA更具有優(yōu)勢(shì)。(5)rHSA是基因工程的產(chǎn)物，其是否具有醫(yī)用價(jià)值，還需要在個(gè)體水平上進(jìn)一步確認(rèn)其與HSA的生物學(xué)功能是否一致。 答案：(1)總RNA(或mRNA) (2)B　(3)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化　(4)水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始rHSA多肽進(jìn)行高效加工　(5)HSA 4.(xx江蘇高考)下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： 限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ 識(shí)別序 列及切 割位點(diǎn) 圖1 圖2 (1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用__________________兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過(guò)________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入處于________態(tài)的大腸桿菌。 (2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加________，平板上長(zhǎng)出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中________________________________________________________________________。 (3)若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為_(kāi)_______________________，對(duì)于該部位，這兩種酶________(填“都能”“都不能”或“只有一種能”)切開(kāi)。 (4)若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得________種大小不同的DNA片段。 解析：(1)基因工程中選擇合適的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因時(shí)，應(yīng)保留目的基因和至少一個(gè)標(biāo)記基因結(jié)構(gòu)的完整性，即遵循“目的基因切兩側(cè)，標(biāo)記基因留一個(gè)”的基本原則，最好選擇切割產(chǎn)生不同末端的兩種限制酶同時(shí)切割質(zhì)粒和目的基因，以避免目的基因的反向插入帶來(lái)的不正常表達(dá)，因此據(jù)圖分析應(yīng)選擇的限制酶為BclⅠ和HindⅢ，切割后質(zhì)粒上保留的四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因。酶切后的載體和目的基因通過(guò)DNA連接酶的作用形成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒需要導(dǎo)入Ca2＋處理后的處于感受態(tài)的大腸桿菌(處于感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞膜的通透性大大增加，便于重組質(zhì)粒進(jìn)入)。(2)由上述分析可知，為了篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)先配制含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基，平板上長(zhǎng)出的菌落為導(dǎo)入普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落，進(jìn)一步鑒定出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可利用PCR擴(kuò)增的方式，結(jié)合電泳技術(shù)來(lái)分析處理。DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，在PCR過(guò)程中，當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶只能從引物的3′端延伸DNA鏈，因此應(yīng)選擇引物甲和引物丙。(3)因?yàn)锽clⅠ和BamHⅠ酶切產(chǎn)生的黏性末端相同，所以可以被DNA連接酶連接，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為，但是連接后形成的DNA中不再具有BclⅠ和BamHⅠ的識(shí)別序列，連接部位不能被這兩種酶切開(kāi)。(4)由圖可知，能被限制酶BclⅠ和BamHⅠ切割的序列也能被Sau3AⅠ識(shí)別并切割，因此圖中質(zhì)粒上存在3個(gè)Sau3AⅠ的切割位點(diǎn)，若將3個(gè)切割位點(diǎn)之間的DNA片段分別編號(hào)為a、b和c，則完全酶切(3個(gè)切割位點(diǎn)均被切割)會(huì)產(chǎn)生3種大小的DNA片段，即為a、b和c；考慮只切1個(gè)切割位點(diǎn)，有三種情況，都產(chǎn)生一種大小的DNA片段，即大小均為a＋b＋c；考慮切2個(gè)切割位點(diǎn)，則會(huì)產(chǎn)生a＋b、c、a＋c、b、b＋c、a幾種不同大小的DNA片段。綜上所述，若用Sau3AⅠ識(shí)別并切割圖中質(zhì)粒，最多可獲得7種大小的DNA片段，即為a＋b＋c、a＋b、a＋c、b＋c、a、b、c。 答案：(1)BclⅠ和HindⅢ　連接　感受　(2)四環(huán)素　引物甲和引物丙　(3) 都不能　(4)7 5．多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠，使細(xì)胞壁破損。成熟的番茄果實(shí)PG的合成量顯著增加，能使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程的方法減少PG基因的表達(dá)，可延長(zhǎng)番茄的保質(zhì)期?？茖W(xué)家將PG基因接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細(xì)胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)轉(zhuǎn)基因番茄的培育過(guò)程中涉及的工程手段所依據(jù)的生物學(xué)原理是______________________________。對(duì)該農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行銷(xiāo)售時(shí)需進(jìn)行標(biāo)注，以維護(hù)消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的__________和__________。一些消費(fèi)者擔(dān)心轉(zhuǎn)基因番茄的安全性，主要表現(xiàn)在________________________________________________________________________ (至少答出一點(diǎn)。) (2)將PG基因接到Ti質(zhì)粒上，屬于基因工程操作流程中的________________________________________________________________________。 (3)將含有目的基因的番茄細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因番茄植株，需經(jīng)過(guò)____________和____________的過(guò)程。若想獲得轉(zhuǎn)基因番茄的人工種子，需以植物組織培養(yǎng)得到的______________________________________等為材料，經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝而得到。 解析：(1)轉(zhuǎn)基因番茄的培養(yǎng)過(guò)程用到的工程手段有基因工程和植物細(xì)胞工程，應(yīng)用的原理分別是基因重組和植物細(xì)胞的全能性；我國(guó)的《基因工程安全管理辦法》是為了維護(hù)消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的知情權(quán)和選擇權(quán)。一些消費(fèi)者認(rèn)為不能對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的安全性掉以輕心，主要表現(xiàn)在擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)、擔(dān)心出現(xiàn)新的過(guò)敏原、擔(dān)心營(yíng)養(yǎng)成分的改變等。(2)將PG基因接到Ti質(zhì)粒上，屬于基因工程的核心步驟，即基因表達(dá)載體的構(gòu)建。(3)植物組織培養(yǎng)過(guò)程需經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程。所謂人工種子，就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。 答案：(1)基因重組和植物細(xì)胞的全能性　知情權(quán)　選擇權(quán)　擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)(或擔(dān)心出現(xiàn)新的過(guò)敏原、擔(dān)心營(yíng)養(yǎng)成分改變等)　(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建　(3)脫分化　再分化　胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽 考點(diǎn)二 克隆技術(shù) 6.研究小組用土壤農(nóng)桿菌與陸地棉葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體共同培養(yǎng)獲得了轉(zhuǎn)基因陸地棉，過(guò)程如下。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)圖a表示從已經(jīng)消毒的葉片中剪取部分植物組織細(xì)胞，圖b表示制備原生質(zhì)體，培養(yǎng)皿中要加纖維素酶和果膠酶，其原因是_____________________________________________。 (2)圖c表示用培養(yǎng)基培養(yǎng)原生質(zhì)體，培養(yǎng)基中加入了適宜濃度的蔗糖，其主要作用是_____________________和__________________。培養(yǎng)一段時(shí)間后，將其與土壤農(nóng)桿菌混合培養(yǎng)，使重組Ti質(zhì)粒進(jìn)入________________，重組Ti質(zhì)粒上______________段攜帶了目的基因，可以整合到植物細(xì)胞的 __________________上。然后通過(guò)離心(圖d)的方法，除去多余的土壤農(nóng)桿菌。 (3)圖e表示將原生質(zhì)體培養(yǎng)成愈傷組織，然后將其轉(zhuǎn)移到含有一定抗生素的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)(圖f)，抗生素的作用是_______________________________。 (4)將愈傷組織轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)(圖g)，同時(shí)注意調(diào)整植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和含量，其原因是______________________________________，最終獲得完整的植株(圖h)。 解析：圖示是通過(guò)土壤農(nóng)桿菌與植物細(xì)胞原生質(zhì)體共培養(yǎng)的方法獲得轉(zhuǎn)基因植物的過(guò)程。a為獲取植物細(xì)胞；b為去除細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體的過(guò)程；c為用培養(yǎng)基培養(yǎng)原生質(zhì)體；d為土壤農(nóng)桿菌與植物細(xì)胞原生質(zhì)體共培養(yǎng)；e表示脫分化過(guò)程；f表示用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選培養(yǎng)；g表示再分化過(guò)程；h表示轉(zhuǎn)基因植物幼苗。(1)圖b表示用纖維素酶和果膠酶兩種酶來(lái)制備原生質(zhì)體，原因是植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，纖維素酶和果膠酶可除去細(xì)胞壁。(2)圖c表示用培養(yǎng)基培養(yǎng)原生質(zhì)體，培養(yǎng)基中加入了適宜濃度的蔗糖，其主要作用是為原生質(zhì)體提供碳源和能源和調(diào)節(jié)滲透壓維持原生質(zhì)體的形態(tài)，將其與土壤農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，使攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒的TDNA進(jìn)入植物細(xì)胞，整合到植物細(xì)胞的染色體(染色體DNA)上，然后通過(guò)離心的方法，除去多余的土壤農(nóng)桿菌。(3)圖e表示將原生質(zhì)體培養(yǎng)成愈傷組織，然后將其轉(zhuǎn)移到含有一定抗生素的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)(圖f)，抗生素的作用是篩選出含目的基因的植物細(xì)胞。(4)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和含量會(huì)影響愈傷組織的分化，故將愈傷組織轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)(圖g)，同時(shí)注意調(diào)整植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和含量。 答案：(1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，纖維素酶和果膠酶可除去細(xì)胞壁　(2)為原生質(zhì)體提供碳源和能源　調(diào)節(jié)滲透壓維持原生質(zhì)體的形狀　原生質(zhì)體(植物細(xì)胞)　TDNA　染色體(染色體DNA)　(3)篩選出含目的基因的植物細(xì)胞　(4)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和含量會(huì)影響愈傷組織的分化 7．(xx永州三校聯(lián)考)下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。 (1)圖中①過(guò)程是________________。對(duì)動(dòng)物細(xì)胞來(lái)說(shuō)，②過(guò)程獨(dú)有的方法是________________。③過(guò)程的目的是____________。④過(guò)程的目的是獲得________________________________。 (2)在培養(yǎng)過(guò)程中為防止雜菌感染，應(yīng)向培養(yǎng)液中添加__________；其體外培養(yǎng)需用CO2培養(yǎng)箱，其中CO2的主要作用是______________。 (3)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的______中使其增殖。 (4)單克隆抗體與傳統(tǒng)抗體相比，其優(yōu)點(diǎn)是__________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：②過(guò)程表示誘導(dǎo)漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，動(dòng)物細(xì)胞特有的誘導(dǎo)融合方法是用滅活的病毒處理。單克隆抗體制備過(guò)程中需兩步篩選：③是利用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞，④過(guò)程是利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要提供無(wú)菌、無(wú)毒條件，還需要一定的氣體環(huán)境。雜交瘤細(xì)胞可在小鼠腹水中進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)。 答案：(1)向老鼠體中注射特定抗原　滅活的病毒處理　篩選雜交瘤細(xì)胞　能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞　(2)抗生素　維持培養(yǎng)液的pH　(3)腹水　(4)特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備 8．下圖所示為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，動(dòng)物細(xì)胞增殖情況的變化曲線(xiàn)(圖中B、D兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選后繼續(xù)培養(yǎng))，請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問(wèn)題： (1)OA段的培養(yǎng)稱(chēng)為_(kāi)_______培養(yǎng)，AB段可能發(fā)生了____________現(xiàn)象，需要用________酶處理，以使組織細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，就細(xì)胞增殖、分化來(lái)說(shuō)，動(dòng)植物細(xì)胞都要進(jìn)行____________，不同的是植物細(xì)胞還要進(jìn)行______________________________。 (3)為制備單克隆抗體，需將________注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取________細(xì)胞，同時(shí)可選取圖中________點(diǎn)的細(xì)胞與該細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞，所選取細(xì)胞的細(xì)胞膜上的________比正常細(xì)胞顯著減少。為篩選出能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細(xì)胞，可用________培養(yǎng)基達(dá)到目的。 解析：據(jù)圖中不同階段細(xì)胞的增殖代數(shù)可知，AB段細(xì)胞不再增殖，但此時(shí)細(xì)胞仍有增殖能力，所以此時(shí)可能發(fā)生了接觸抑制，故OA段為原代培養(yǎng)；D點(diǎn)細(xì)胞增殖代數(shù)達(dá)到了60次以上，故此時(shí)細(xì)胞發(fā)生了癌變，獲得了無(wú)限增殖的能力。 答案：(1)原代　接觸抑制　胰蛋白　(2)增殖(或分裂)　脫分化和再分化　(3)抗原　漿　D　糖蛋白　選擇 9．DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本，利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。 親本藻 優(yōu)勢(shì)代 謝類(lèi)型 生長(zhǎng)速率 [g/(Ld)] 固體培養(yǎng)基 上藻落直徑 DHA含 量(‰) A藻 自養(yǎng) 0.06 小 0.7 B藻 異養(yǎng) 0.14 大 無(wú) 據(jù)表回答： (1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻____________________與B藻________________的優(yōu)點(diǎn)。 (2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻，其目的是獲得________________。 (3)通過(guò)以下三步篩選融合藻，步驟________可淘汰B藻，步驟________可淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落，再通過(guò)步驟________獲取生產(chǎn)所需的融合藻。 步驟a：觀(guān)察藻落的大??； 步驟b：用不含有機(jī)碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)； 步驟c：測(cè)定DHA含量。 (4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖。 ①甲組條件下，融合藻產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器是__________；丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是________。 ②與甲、丙兩組相比，乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快，原因是在該培養(yǎng)條件下________________________________________________________________________。 甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高，但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件，其原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)據(jù)表可知，A藻具有自養(yǎng)和能產(chǎn)生DHA的優(yōu)點(diǎn)，B藻具有能快速生長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，故選育的融合藻應(yīng)同時(shí)具有兩者優(yōu)點(diǎn)。(2)植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁，用纖維素酶處理可以去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。(3)B藻為異養(yǎng)型，在不含有機(jī)碳源的培養(yǎng)基上無(wú)法生存；藻落的大小和生長(zhǎng)速率成正比；選育的融合藻除了自養(yǎng)、生長(zhǎng)快速的優(yōu)點(diǎn)外，還要能產(chǎn)生DHA。(4)①甲組融合藻有光照，既可進(jìn)行細(xì)胞呼吸也可進(jìn)行光合作用，因此葉綠體和線(xiàn)粒體中均可以產(chǎn)生[H]；丙組黑暗處理，融合藻不能進(jìn)行光合作用，所以產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器只有線(xiàn)粒體。解答本題時(shí)應(yīng)注意細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中也能產(chǎn)生ATP，但是不屬于細(xì)胞器。②融合藻同時(shí)具有A藻和B藻的特點(diǎn)，所以既能自養(yǎng)又能異養(yǎng)，在乙組條件下，融合藻可同時(shí)進(jìn)行自養(yǎng)和異養(yǎng)，故生長(zhǎng)速率較快。在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)考慮成本，相比甲組，乙組消耗葡萄糖，提高了成本，培養(yǎng)液中富含葡萄糖還易引起雜菌生長(zhǎng)。 答案：(1)產(chǎn)生DHA，自養(yǎng)特性　快速生長(zhǎng)　(2)原生質(zhì)體　(3)b　a　c　(4)①線(xiàn)粒體、葉綠體　線(xiàn)粒體?、谌诤显寮饶芄饽茏责B(yǎng)又能異養(yǎng)　融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能生長(zhǎng)，不需添加葡萄糖，可降低成本，也可防止雜菌生長(zhǎng)