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2019-2020年高考生物一輪復(fù)習(xí) 專(zhuān)題二 克隆技術(shù)教案（含解析）新人教版選修3 1．植物組織培養(yǎng) Ⅱ 2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和體細(xì)胞克隆 Ⅰ 3．動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體 Ⅱ 考綱解讀 1．植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程及應(yīng)用 2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的制備及應(yīng)用 3．動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)與有毒物質(zhì)的檢測(cè) 知識(shí)點(diǎn)一　植物組織培養(yǎng)技術(shù) 看一看：在誘導(dǎo)愈傷組織分化時(shí)哪些物質(zhì)起作用？ 想一想：什么是人工種子？它有什么優(yōu)點(diǎn)？ 議一議：如何通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)有毒物質(zhì)毒性的大小？ 知識(shí)點(diǎn)二　動(dòng)物克隆技術(shù) 　議一議：鼠的單克隆抗體能否用于人體疾病的治療？ 1． 如何區(qū)分植物的組織培養(yǎng)與動(dòng)物培養(yǎng) 項(xiàng)目 原理 培養(yǎng)基 結(jié)果 培養(yǎng)目的 過(guò)程 植物 組織 培養(yǎng) 細(xì)胞的全能性 固體；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素 培養(yǎng)成植株 快速繁殖無(wú)病毒植株等 脫分化再分化 動(dòng)物 細(xì)胞 培養(yǎng) 細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖 液體；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、動(dòng)物血清等 培養(yǎng)成細(xì)胞株或細(xì)胞系 獲得細(xì)胞產(chǎn)物或細(xì)胞系 原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng) 2.克隆與組織培養(yǎng)、試管嬰兒 克隆 組織培養(yǎng) 試管嬰兒 生殖方式 無(wú)性 無(wú)性 有性 遺傳物質(zhì)來(lái)源 2個(gè)親本 1個(gè)親本 2個(gè)親本 性別決定 提供核親本 一般沒(méi)有 精子類(lèi)型 用 途 優(yōu)良種畜快速繁育，可選擇性別 快速繁殖無(wú)病毒植株　 解決不孕不育 在單克隆抗體的制備過(guò)程中，兩次篩選的目的不同 　(1)由于B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合方式有多種，因此第一次篩選的目的是選出雜交瘤細(xì)胞，淘汰掉未融合的或同種細(xì)胞融合的細(xì)胞。 (2)由于從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞可能有多種，因此第一次篩選到的雜交瘤細(xì)胞可能有多種，通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)進(jìn)行第二次篩選，以選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。自我校對(duì)： ①無(wú)菌和人工控制?、陔x體　③愈傷組織?、苤参锛?xì)胞的全能性　⑤離體?、抻鷤M織?、咴俜只、嚯s種細(xì)胞　⑨雜種細(xì)胞　纖維素酶和果膠酶　?纖維素酶和果膠酶　?原生質(zhì)體　?脫分化　?愈傷組織　?人工種子　?花藥　?純合二倍體　?極大地縮短了育種年限，節(jié)約了人力物力　?無(wú)菌、無(wú)毒　?營(yíng)養(yǎng)　溫度、pH　氣體環(huán)境　兩個(gè)　DNA　雜交　遠(yuǎn)緣　B細(xì)胞—B細(xì)胞　雜交瘤細(xì)胞 骨髓瘤—骨髓瘤細(xì)胞　雜交瘤細(xì)胞　產(chǎn)生專(zhuān)一抗體　單克隆抗體　生物導(dǎo)彈 看一看：植物激素在愈傷組織的分化中起重要作用，生長(zhǎng)素用于誘導(dǎo)細(xì)胞的分裂和根的分化。細(xì)胞分裂素是促進(jìn)細(xì)胞的分裂和不定芽的分化。 想一想：①人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，包裝上人工薄膜制成。 ②它的優(yōu)點(diǎn)是可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制。 議一議：用含有一定濃度有毒物質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)液和正常細(xì)胞培養(yǎng)液同時(shí)培養(yǎng)正常細(xì)胞，通過(guò)對(duì)照觀察變異細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)來(lái)確定其毒性強(qiáng)弱。 議一議：不能。因?yàn)樾∈蟮腂淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體與人體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是不同的。 ,植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 技術(shù)內(nèi)容項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 原理 細(xì)胞的全能性 細(xì)胞的增殖 培養(yǎng)基 成分 礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和有機(jī)添加劑(如甘氨酸、瓊脂等)，屬于固體培養(yǎng)基 葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等，屬于液體培養(yǎng)基 取材 較幼嫩的細(xì)胞、組織、器官 動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織 培養(yǎng)過(guò)程 培養(yǎng)結(jié)果 可以獲得植株，也可以獲得大量細(xì)胞 只能獲得大量細(xì)胞，不能得到生物個(gè)體 應(yīng)　用 ①植物快速繁殖與脫毒植物培養(yǎng) ②生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品 ③制造人工種子 ④用于轉(zhuǎn)基因植物的培育 ①生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品 ②培養(yǎng)皮膚移植的材料 ③檢測(cè)有毒物質(zhì) ④用于生理、病理、藥理學(xué)的研究 相同點(diǎn) ①都需人工條件下的無(wú)菌操作 ②都是合成培養(yǎng)基 ③都需適宜的溫度、pH等條件 提醒?、僦参锝M織培養(yǎng)需要生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，其中生長(zhǎng)素可誘導(dǎo)愈傷組織生根，細(xì)胞分裂素可促進(jìn)愈傷組織生芽。 ②在動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)中，細(xì)胞可能癌變。 ③兩種技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中都進(jìn)行了有絲分裂，都是無(wú)性繁殖，都可稱(chēng)克隆，都不涉及減數(shù)分裂。 ④植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞，不形成新個(gè)體，故不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。 本考點(diǎn)多與基因工程綜合在一起考查，以非選擇題的形式進(jìn)行命題，近年高考單科試卷也多有涉及，也多與必修內(nèi)容綜合在一起考查。 【典例1】?(xx江蘇)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　)。 A．愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞 B．二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 C．用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 D．植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得 解析　本題考查植物細(xì)胞工程，同時(shí)考查綜合分析與遷移能力。愈傷組織細(xì)胞是一團(tuán)排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的、具分生能力的薄壁細(xì)胞，不具有特定的結(jié)構(gòu)和功能。二倍體植株的花粉中只含一個(gè)染色體組，培養(yǎng)得到的個(gè)體為單倍體，高度不育，幼苗用秋水仙素處理后得到的植株才能穩(wěn)定遺傳。人工種子中包裹的不能是愈傷組織。用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選出所需要的突變體類(lèi)型。 答案　D 【訓(xùn)練1】?動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別在于(　　)。 A．培養(yǎng)基不同 B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 C．動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能 D．動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能 解析　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，通常含有水、礦質(zhì)元素、激素、蔗糖、氨基酸、瓊脂等。可見(jiàn)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基是不相同的。 答案　A ,植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗體制備) 理論基礎(chǔ)(原理) 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖 融合前 處理 酶解法(纖維素酶、果膠酶)去除細(xì)胞壁 注射特定抗原使正常小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng) 促融 方法 ①物理法：離心、振動(dòng)、電刺激等； ②生物法：滅活的病毒 ①物化法：與植物細(xì)胞融合相同； ②化學(xué)法：聚乙二醇(PEG) 過(guò) 程 第 一 步 原生質(zhì)體的制備(酶解法) 正常小鼠免疫處理 第 二 步 原生質(zhì)體融合(物化法) 動(dòng)物細(xì)胞融合 第 三 步 雜種細(xì)胞的篩選與培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng) 第 四 步 雜種植株誘導(dǎo)與鑒定 單克隆抗體的提純 意義和用途 ①克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合范圍； ②突破有性雜交的母系遺傳，獲得細(xì)胞質(zhì)基因的雜合子，研究細(xì)胞質(zhì)遺傳 ①制備單克隆抗體； ②診斷、治療和預(yù)防疾病，例如： a.腫瘤定位診斷，放射性抗體→腫瘤； b.生物導(dǎo)彈治療，抗體→抗癌藥物→腫瘤 提醒　(1)在細(xì)胞融合時(shí)，可出現(xiàn)多種雜種細(xì)胞，如B細(xì)胞—B細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞。 (2)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交，均需對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行篩選，但篩選的方法不同，前者可用免疫法，后者可用機(jī)械方法、生理學(xué)或遺傳學(xué)方法。 (3)各項(xiàng)技術(shù)在使用中一般要借助于其他某種技術(shù)的協(xié)助，如動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植、核移植等，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。 本考點(diǎn)內(nèi)容是高考命題的熱點(diǎn)內(nèi)容，特別是單克隆抗體的制備是高考命題的熱點(diǎn)，復(fù)習(xí)中應(yīng)引起重視。 【典例2】?(xx福建卷)[生物—現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題] 紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來(lái)源極為有限，目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來(lái)自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO)，其簡(jiǎn)要生產(chǎn)流程如右圖。 請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)圖中①所指的是________技術(shù)。 (2)圖中②所指的物質(zhì)是________，③所指的物質(zhì)是________。 (3)培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換________。 (4)檢測(cè)rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的________細(xì)胞，可由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成。 解析　(1)核DNA的體外擴(kuò)增是利用PCR技術(shù)。(2)由圖示分析：從人胚胎干細(xì)胞提取出②，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄可形成cDNA，可知②為翻譯EPO的模板mRNA，③為rhEPO。(3)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，清除代謝廢物。(4)由rhEPO免疫過(guò)的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，可以篩選出能夠分泌抗rhEPO的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。 答案　(1)PCR　(2)mRNA　rhEPO　(3)培養(yǎng)液　(4)雜交瘤 【訓(xùn)練2】?(xx金華模擬)下列有關(guān)植物體細(xì)胞雜交的敘述，不正確的是(　　)。 A．用酶解法去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體 B．誘導(dǎo)兩種植物的原生質(zhì)體融合，進(jìn)而形成雜種細(xì)胞 C．植物體細(xì)胞雜交的最終目的是獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物 D．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服不同種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 解析　去除植物細(xì)胞壁可以用纖維素酶和果膠酶；原生質(zhì)體融合后再產(chǎn)生出細(xì)胞壁標(biāo)志著雜種細(xì)胞的形成；植物體細(xì)胞雜交的目的是為了獲得雜種植株；植物體細(xì)胞雜交不經(jīng)過(guò)有性生殖過(guò)程，所以可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。 答案　C 【訓(xùn)練3】?(xx濰坊模擬)下列關(guān)于單克隆抗體制備過(guò)程的敘述，正確的是(　　)。 A．制備過(guò)程中不需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B．雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞與癌細(xì)胞的所有特點(diǎn) C．經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞即可用于單克隆抗體的生產(chǎn) D．單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑 解析　單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞并經(jīng)專(zhuān)一抗體檢測(cè)后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體，雜交瘤細(xì)胞能無(wú)限繁殖但不具有癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。 答案　D ,動(dòng)物體細(xì)胞核移植與克隆動(dòng)物 1．原理 動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。 2．供核細(xì)胞 一般選優(yōu)良動(dòng)物的傳代培養(yǎng)10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞。 3．受體細(xì)胞 去核的MⅡ期卵母細(xì)胞。 4．過(guò)程 胚胎代孕個(gè)體→生出與供體遺傳物質(zhì)相同的個(gè)體 本考點(diǎn)內(nèi)容在高考中單獨(dú)考查較少，但在高考命題中多以此內(nèi)容為背景進(jìn)行命題考查其它方面知識(shí)。 【典例3】?日本研究人員依靠體細(xì)胞克隆技術(shù)進(jìn)行反復(fù)“拷貝”，成功培育出第四代克隆豬。這個(gè)研究小組培育的第一代克隆豬于xx年4月誕生，此后，他們又從長(zhǎng)大的克隆豬唾液腺中提取細(xì)胞，將細(xì)胞核植入未受精的卵子中，依次培育出第二代和第三代克隆豬。研究人員發(fā)現(xiàn)，豬與人類(lèi)身體構(gòu)造相似，克隆豬可作為研究人類(lèi)疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。根據(jù)材料回答下列問(wèn)題。 (1)第四代克隆豬利用了動(dòng)物細(xì)胞核的________性。 (2)在細(xì)胞核植入受體卵母細(xì)胞之前，要用顯微針去除卵母細(xì)胞的________，再將唾液腺細(xì)胞核注入。獲得的重組胚胎需要體外培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)不僅要有無(wú)機(jī)鹽類(lèi)和有機(jī)鹽類(lèi)，而且還要有________________等營(yíng)養(yǎng)成分及________等物質(zhì)。當(dāng)發(fā)育到囊胚期時(shí)，將其移植到受體雌性動(dòng)物體內(nèi)。 (3)研究顯示，利用克隆技術(shù)根本無(wú)法培育出完全相同的個(gè)體，究其原因，除了發(fā)育過(guò)程中的環(huán)境因素的影響外，還可能有________________等原因。 (4)如果希望克隆豬都能生產(chǎn)人體胰島素，那么需要利用________技術(shù)，把________________拼接到豬的核基因中。轉(zhuǎn)基因是否成功都可以用________檢測(cè)。 解析　體細(xì)胞核移植技術(shù)利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能箼；在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移入受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹２溉閯?dòng)物胚胎的培養(yǎng)液成分一般都比較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽類(lèi)外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分以及血清等物質(zhì)?？寺〖夹g(shù)根本無(wú)法培育出完全相同的個(gè)體，原因可能是在細(xì)胞分裂過(guò)程中發(fā)生基因突變或個(gè)體發(fā)育中受細(xì)胞質(zhì)基因及環(huán)境的影響。基因探針技術(shù)的原理是DNA分子雜交，可用于疾病診斷、生物檢測(cè)等。 答案　(1)全能　(2)細(xì)胞核　維生素、激素、氨基酸、核苷酸　動(dòng)物血清　(3)細(xì)胞分裂過(guò)程中可能發(fā)生基因突變或卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)也有遺傳物質(zhì)DNA，也控制后代的性狀表達(dá)　(4)基因工程　人的胰島素基因　基因探針 【訓(xùn)練4】?在克隆羊多利的過(guò)程中，下列哪項(xiàng)技術(shù)沒(méi)有運(yùn)用到(　　)。 A．細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B．細(xì)胞核移植技術(shù) C．胚胎移植技術(shù) D．基因工程技術(shù) 解析　克隆技術(shù)需利用核移植以產(chǎn)生重組細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成早期胚胎后，需移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育成個(gè)體。 答案　D 1．(xx江蘇卷)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)。 A．蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì) B．體細(xì)胞雜交技術(shù)可以用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體 C．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培養(yǎng) 解析　克隆動(dòng)物應(yīng)用的是細(xì)胞核移植技術(shù)，所以B選項(xiàng)敘述錯(cuò)誤。 答案　B 2．(xx廣東卷)新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)(或儀器)與應(yīng)用匹配正確的是(雙選)(　　)。 A．PCR技術(shù)——擴(kuò)增蛋白質(zhì) B．雜交瘤技術(shù)——制備單克隆抗體 C．光學(xué)顯微鏡——觀察葉綠體的基粒 D．花粉離體培養(yǎng)——培育單倍體植物 解析　本題主要考查學(xué)生的理解能力。PCR技術(shù)只能用來(lái)擴(kuò)增核酸，不能用來(lái)擴(kuò)增蛋白質(zhì)；利用光學(xué)顯微鏡無(wú)法觀察到葉綠體中的基粒。 答案　BD 3．(xx浙江卷)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　)。 A．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 B．克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變 C．二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的 D．惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng) 解析　本題主要考查細(xì)胞工程的有關(guān)知識(shí)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，原代培養(yǎng)到一定程度后要進(jìn)行傳代，因?yàn)榧?xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象，當(dāng)細(xì)胞接觸時(shí)就會(huì)停止分裂(在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行的為有絲分裂，所以培養(yǎng)出來(lái)的多數(shù)細(xì)胞基因型相同)，但是細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中，傳代次數(shù)也是有限的，一般為50次就會(huì)死亡，留下來(lái)的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞，遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，具有不死性，不再保留接觸抑制現(xiàn)象，仍能進(jìn)行傳代培養(yǎng)，所以答案為D。 答案　D 4．(xx全國(guó)卷Ⅰ)下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交或植物細(xì)胞質(zhì)遺傳的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)。 A．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠(yuǎn)緣雜種 B．不同種植物原生質(zhì)體融合的過(guò)程屬于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程 C．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型一致 D．兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來(lái)自母本的多于來(lái)自父本的 解析　植物體細(xì)胞雜交可以用兩種不同的植物細(xì)胞，從而可克服生殖隔離的限制，植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程，實(shí)際上是不同植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合的過(guò)程。紫茉莉枝葉的性狀的遺傳是細(xì)胞質(zhì)遺傳，兩個(gè)不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1枝葉的表現(xiàn)型應(yīng)與母本一致，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來(lái)自母本的多于來(lái)自父本的，因?yàn)槭芫阎械募?xì)胞質(zhì)幾乎全部來(lái)自母本。故C錯(cuò)誤。 答案　C 5．(xx浙江卷)用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是(　　)。 A．都需用CO2培養(yǎng)箱 B．都須用液體培養(yǎng)基 C．都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性 解析　動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，動(dòng)物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)不一定用液體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。故C正確。 答案　C 6．(xx山東卷)人類(lèi)在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒。該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖： 請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)過(guò)程①代表的是________。 (2)過(guò)程②構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用________和________兩種工具酶。 (3)過(guò)程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是________，獲得的X是________。 (4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的________所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行________比較；或用圖中的________進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。 解析　本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過(guò)程，考查了中心法則、基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技。 (1)中心法則中，對(duì)于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過(guò)程需要補(bǔ)充的過(guò)程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制的過(guò)程，圖中過(guò)程①正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程。(2)基因工程的步驟是：目的基因的提取——構(gòu)建基因表達(dá)載體——導(dǎo)入受體細(xì)胞——目的基因的檢測(cè)和表達(dá)，其中構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和載體。 (3)過(guò)程③是將瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程，獲得的叫雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。 (4)本題考查了免疫預(yù)防的操作過(guò)程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過(guò)基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時(shí)為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進(jìn)行核酸序列的比對(duì)，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過(guò)能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在，進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)是否為目的RNA病毒。 答案　(1)逆轉(zhuǎn)錄　(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶、限制性?xún)?nèi)切酶)　DNA連接酶(兩空可以互換)　(3)細(xì)胞融合　雜交瘤細(xì)胞　(4)A蛋白　核酸(基因)序列　抗A蛋白的單克隆抗體 7．(xx江蘇卷)動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理過(guò)程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞____________________________________________。 (2)氣室中充入5% CO2氣體的主要作用是__________________________________________。 (3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，但要注意選擇抗生素的________，以保證抗生素對(duì)肝臟無(wú)害。 (4)有機(jī)物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X是否具有解毒作用。 材料用具： 肝臟小塊，外周血淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液，植物凝集素(刺激淋巴細(xì)胞分裂)；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液(使染色體著色)，有機(jī)物X溶液等。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程： ①在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，取4等份，備用。 ②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作(“√”表示已完成的步驟)。 甲 乙 丙 丁 步驟一：加入肝臟培養(yǎng)液 √ √ √ √ 步驟二：加入有機(jī)物X溶液 √ √ 步驟三：放置肝臟小塊 √ 上表中還需進(jìn)行的操作是__________________________________________________。 ③培養(yǎng)一段時(shí)間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。 ④一段時(shí)間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察________________，并對(duì)比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細(xì)胞正常，則說(shuō)明____________________________。 解析　本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。(1)把肝臟切成小薄片，有利于肝臟細(xì)胞的呼吸代謝，即吸收氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。(2)氣室中充入5% CO2的作用是形成碳酸來(lái)維持培養(yǎng)液適宜的pH。(3)同時(shí)也要注意選擇抗生素的種類(lèi)和數(shù)量來(lái)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。(4)乙組或丁組沒(méi)有處理，向乙(或丁)組裝置中放置肝臟小塊作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，有機(jī)物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂所以要觀察淋巴細(xì)胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否變化。甲組添加肝臟小塊淋巴細(xì)胞染色體正常，丙組沒(méi)有添加出現(xiàn)染色體異常，說(shuō)明肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X具有解毒作用。 答案　(1)吸收氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物　(2)維持培養(yǎng)液適宜的pH　(3)種類(lèi)和劑量　(4)向乙(或丁)組裝置中放置肝臟小塊　染色體形態(tài)和數(shù)量　肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X具有解毒作用