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2019-2020年（江蘇專用）高考生物總復習 專題1 基因工程（隨堂反饋+高考體驗，含解析）新人教版選修3 1．若某種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列是CCTAGG，它在A和G之間切斷DNA。下圖表示用該酶處理某基因后產(chǎn)生的片段。下列有關(guān)敘述正確的是(　　) A．該正?；蛑杏?個CCTAGG序列 B．產(chǎn)生的DNA片段可用核糖核酸連接酶連接起來 C．用該酶處理得到圖示基因片段要水解3個磷酸二酯鍵 D．若該基因某處有一個CCTAGC突變?yōu)镃CTAGG，用該酶處理后將產(chǎn)生5個片段 解析：選D。該正常基因被切為4個片段，有3個切點，應有3個CCTAGG序列；產(chǎn)生的DNA片段不能用核糖核酸連接酶連接，只能用DNA連接酶連接；用該酶處理得到圖示基因片段要水解6個磷酸二酯鍵；若該基因某處有一個CCTAGC突變?yōu)镃CTAGG，則有4個切點，用該酶處理后將產(chǎn)生5個片段。 2．(xx泰州調(diào)研)下列關(guān)于生物工程中常見的幾種酶的敘述，正確的是(多選)(　　) A．DNA連接酶可把目的基因與載體的黏性末端的堿基黏合，形成重組DNA B．限制性核酸內(nèi)切酶將一個DNA分子片段切成兩個片段需消耗兩個水分子 C．Taq酶是用PCR儀對DNA分子擴增過程中常用的一種耐高溫的DNA聚合酶 D．用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞獲得原生質(zhì)體，便于植物雜交育種 解析：選BC。DNA連接酶連接的是磷酸二酯鍵，形成重組DNA。限制性核酸內(nèi)切酶將一個DNA分子片段切成兩個片段，切斷兩個磷酸二酯鍵，需消耗兩個水分子。用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞獲得原生質(zhì)體，便于植物體細胞雜交。 3．(xx浙江理綜)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是(　　) A．每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒 B．每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點 C．每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個ada D．每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子 解析：選C。大腸桿菌成功表達出腺苷酸脫氨酶，說明這些大腸桿菌都至少含有一個重組質(zhì)粒，A項正確；作為載體的條件為至少含有一個或多個酶切位點，所以作為載體的質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點，B項正確；作為基因表達載體應包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因四部分，但并不是每個酶切位點都至少插入一個ada，C項錯誤；由于這些目的基因成功表達，所以每個ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子，D項正確。 4．(xx四川理綜)北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列，該序列重復次數(shù)越多，抗凍能力越強。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是(　　) A．過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序 B．將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白 C．過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進行篩選 D．應用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達 解析：選B。因為一種氨基酸可能對應多種密碼子、真核生物體內(nèi)的基因含有內(nèi)含子等因素，導致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，所以人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A選項錯誤；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復序列重復次數(shù)越多，抗凍能力越強，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復次數(shù)越多抗凍能力越強，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B選項正確；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛毎淖畛Ｓ梅椒?，不是為了篩選含有標記基因的質(zhì)粒，C選項錯誤；應用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因植物中目的基因的存在，但不能完成對目的基因表達的檢測，D選項錯誤。 5．(xx江蘇理綜)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題： 限制酶 BamHⅠ Hind Ⅲ EcoRⅠ SmaⅠ 識別序列及切割位點 G↓GATCC CCTAG↑G A↓AGCTT TTCGA↑A G↓AATTC CTTAA↑G CCC↓GGG GGG↑CCC (1)一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有________個游離的磷酸基團。 (2)若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越__________。 (3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________________________________________________________________________。 (4)與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入__________酶。 (6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (7)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在____________________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。 解析：環(huán)狀DNA分子中磷酸全部參與形成磷酸二酯鍵，被Sma Ⅰ限制酶切開后相當于一個正常的DNA分子，每個DNA分子單鏈各含有一個游離的磷酸基團；A—T堿基對有兩個氫鍵，而G—C堿基對有三個氫鍵，G－C堿基對含量越多，熱穩(wěn)定性越高；從圖中讀出：Sma I限制酶破壞目的基因和標記基因；用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種不同的限制酶處理，形成不同的黏性末端，能有效防止只用一種限制酶形成的相同的黏性末端的質(zhì)粒或目的基因相互連接、環(huán)狀化；將質(zhì)粒與目的基因“縫合”應用DNA連接酶進行處理；標記基因的作用在于鑒別和篩選含有目的基因的細胞；大腸桿菌突變體喪失吸收蔗糖的能力，不能在只有蔗糖為碳源的選擇培養(yǎng)基上存活，所以可以用該種選擇培養(yǎng)基對導入的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因是否表達進行初步檢測。 答案：(1)0、2　(2)高　(3)SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因　(4)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化　(5)DNA連接　(6)鑒別和篩選含有目的基因的細胞　(7)蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)