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第17練　生物技術(shù)實踐 非選擇題 1.(2018黑龍江齊齊哈爾一模,37)(9分)微生物在果酒、果醋及腐乳制作過程中有廣泛應(yīng)用,回答下列問題: (1)某同學以新鮮葡萄為原料,嘗試用罐頭瓶制作葡萄酒,應(yīng)將溫度控制在　　　　　　。在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中,起主要作用的菌種來自　　　　　　　　　　　　。隨著酒精度數(shù)的提高,紅葡萄皮中的　　　　也進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。 (2)該同學制作成功的葡萄酒如果暴露在空氣中酒味會逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味,尤其是氣溫高的夏天更易如此,分析其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 醇變?yōu)榇姿岬沫h(huán)境條件是　　　　　　　　　。 (3)制作腐乳時有個加鹽腌制的過程,加鹽量為:離瓶口越近加鹽量越多,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。和腐乳風味關(guān)系最密切的配料是鹵湯,鹵湯由酒和各種香料配制而成,其中加酒的目的是　　　　　　　,并使腐乳具有獨特的香味。 2.(2018四川南充適應(yīng)性考試,37)(13分)泡菜制作簡單,易于儲存,開胃提神,醒酒去膩,老少皆宜,是家喻戶曉的一種佐餐菜肴。以下是有關(guān)泡菜制作的一些問題,請分析作答: (1)制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質(zhì)量比約為　　　　,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用,原因是　 　 。 (2)在泡菜腌制過程中經(jīng)常向壇口邊緣的水槽中補充水分,目的是提供　　　　　環(huán)境。在發(fā)酵初期會有氣泡從壇沿水槽內(nèi)的水中間歇性溢出,這些氣泡來源于　　　　　　　 。 (3)發(fā)酵后期,乳酸含量繼續(xù)增加,當達到1.2%以上時,發(fā)酵速率漸漸變緩甚至停止,主要原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　。 (5)發(fā)酵過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽,亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)變成致癌物　　　　　　,所以在發(fā)酵過程中應(yīng)定期測定亞硝酸鹽的含量,以把握取食泡菜的最佳時機。檢測亞硝酸鹽含量的方法是　　　　　　　　,在檢測泡菜中亞硝酸鹽含量的實驗中,必須先制備已知濃度的　　　　　　　　,將顯色反應(yīng)后的樣品與其進行比對。 3.(2018河北保定一模,37)(13分)下表是某研究小組配制的適合尿素分解菌生長的培養(yǎng)基,請回答下列問題: KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 蒸餾水 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15 g 1 000 mL (1)上述培養(yǎng)基的成分中,為尿素分解菌提供碳源的是　　　　,提供氮源的是　　　　。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看,屬于　　　　培養(yǎng)基;從功能上看,屬于　　　　培養(yǎng)基。 (2)當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落。此菌落來源于　　　　　　　　　　　　,此時　　　　　　較能準確地反映樣品中的活菌數(shù)。 (3)培養(yǎng)過程中,常選擇菌落數(shù)在　　　　　　區(qū)間的平板統(tǒng)計計數(shù)。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的真實數(shù)目低,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)尿素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長,添加某種維生素后才能正常生長,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (5)初步篩選出的產(chǎn)脲酶細菌,在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,能對分離的菌種做進一步鑒定,其原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 4.(2018貴州貴陽適應(yīng)性考試二,37)(9分)脂肪酶能催化天然植物油脂(甘油三酯)水解,產(chǎn)生脂肪酸和甘油。研究人員欲從某個環(huán)境中篩選含低溫堿性脂肪酶的菌株,以溴甲酚紫為指示劑(溴甲酚紫隨油脂分解紫色變淺)進行系列實驗操作。請回答下列問題: (1)自然界中能合成低溫堿性脂肪酶的微生物較少,研究人員應(yīng)在　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　的環(huán)境取土樣。 (2)若樣品中含油脂分解菌很少,應(yīng)配制　　　　(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。 (3)為了篩選出菌株,可將適量的　　　　　　指示劑滴加在平板中的菌落周圍,洗去浮色一段時間后,如果菌落周圍的現(xiàn)象是　　　　　　　　　　,則說明此種菌能夠產(chǎn)生脂肪酶。 (4)研究人員在分別確定脂肪酶菌株生長的最適碳源濃度和氮源濃度之后,還需進一步實驗并確定適合于產(chǎn)脂肪酶菌株生長的碳源和氮源濃度的最佳組合。以a和b分別代表碳源和氮源的濃度,假設(shè)酶活性a1>a2>a3;b1>b2>b3,據(jù)此形成下列兩種方案,你認為其中較為合理的方案是　　　　,請說明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 方案一:a1和b1,a2和b2、a3和b3分別組合,根據(jù)酶活性取其中的最佳組合。 方案二:a1分別與每種氮源濃度組合以及b1分別與每種碳源濃度組合,根據(jù)酶活性取其中的最佳組合。 5.(2018江西南昌二模,37)(8分)纖維素分解菌是人們生活中應(yīng)用廣泛的一種微生物,其中含有的纖維素酶(蛋白類物質(zhì))能夠分解纖維素?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題: (1)組成纖維素的單體是　　　　。在某真菌細胞中與纖維素酶合成分泌直接有關(guān)的具膜細胞器是　　　　　　　。 (2)在篩選纖維素分解菌的過程中,人們發(fā)明了　　　　染色法,這種方法能夠通過　　　　　直接對微生物進行篩選。 (3)利用人工誘變的方法處理某纖維素分解菌后,如何從其中篩選出分解纖維素能力強的生產(chǎn)用菌種?請簡要寫出:①實驗思路:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ②從突變的不定向性角度,預(yù)測觀察到的實驗結(jié)果(提示:培養(yǎng)基中纖維素被降解后,產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)明顯的透明圈):　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 6.(2018廣東惠州模擬,37)(12分)某科研所從腐爛的葡萄皮及醋醅、葡萄汁、自釀葡萄酒中篩選出一株性能優(yōu)良的醋酸菌M12,其分離純化步驟如下: 樣品→富集培養(yǎng)→分離純化→定性試驗→定量試驗→菌種鑒定 (1)培養(yǎng)醋酸菌時在培養(yǎng)基中加入95%的酒精作為　　　　　　。醋酸菌在　　　　　　　　　　　　　　　　　　　的情況下會將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸。 (2)無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還能　　　　　　。 (3)某同學從超市買來食醋嘗試從食醋中分離醋酸菌,結(jié)果沒有得到任何菌落,原因是:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。請你提出改進措施:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)培養(yǎng)基中加入酒精的量不能過多,因為　　　　　　　　　　　。為測試M12的耐酒精能力,請簡要說明實驗設(shè)計的思路:　 。 7.(2018廣東佛山質(zhì)檢二,37)(11分)菊科植物青蒿中含有青蒿油和青蒿素,其主要成分都為萜類化合物。青蒿素遇熱易分解,而青蒿油的熱穩(wěn)定性高。 Ⅰ.提取青蒿素時,應(yīng)選用　　　　(填“乙醇”或“乙醚”)作為萃取劑,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。與青蒿素相比,青蒿油更適合用　　　　　　法提取。 Ⅱ.青蒿素能抑制微生物的生長。為研究不同濃度青蒿素對大腸桿菌生長的影響,小明同學進行了如下實驗:①用青蒿素提取液配制多個不同稀釋度的青蒿素溶液,分別加入到固體培養(yǎng)基中,制成藥物平板(每個稀釋度做3個平板);②　　　　　　　　　　　　;③在適宜條件下培養(yǎng)24 h;④　　　　　　　　　　　　。 (1)請完善上述實驗步驟:②　　　　　　 ;④　　　　　　　　　　　　。 (2)步驟①中青蒿素溶液應(yīng)在培養(yǎng)基　　　　(填“滅菌前”或“滅菌后”)加入,理由是　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)為使小明的實驗結(jié)果更有說服力,該如何改進步驟①?　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 8.(2018山東、湖北部分重點中學模擬二,37)(8分)大腸埃希菌,俗稱大腸桿菌。是人和動物腸道中的正常棲居菌。自來水一旦被它污染,就有可能引發(fā)腸道傳染病,甚至流行病。因此,必須對自來水進行嚴格的檢測,以確保飲水安全。我國規(guī)定1 000 mL自來水中的大腸桿菌數(shù)不得超過3個。某同學欲鑒定家中自來水中大腸桿菌含量是否達標,對飲用水中大腸桿菌進行了培養(yǎng)、計數(shù)和鑒定?；卮鹣铝袉栴}: (1)實驗前應(yīng)進行無菌處理。將漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進行　　　　　　　　滅菌。培養(yǎng)基進行　　　　　滅菌。對自來水龍頭進行　　　　滅菌。 (2)為測定大腸桿菌的數(shù)目,將已知　　　　的水過濾后,將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng),注意濾膜與培養(yǎng)基完全貼緊,不能有　　　　。可根據(jù)培養(yǎng)基上　　　　的數(shù)目,計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。(取三份樣品求平均值) (3)為了鑒定大腸桿菌,在培養(yǎng)基中應(yīng)加入　　　　　　。在該培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)　　　　色。 9.(2018廣東湛江二模,37)(8分)茶被譽為“世界三大飲料之一”。茶中含有的茶多酚,易溶于水及乙醇,具有很強的抗氧化性,也能抑制細菌繁殖。請分析回答下列問題: (1)茉莉花可配制花茶等茶飲料,也可用于提取植物芳香油,提取流程如下:茉莉花+水→過程A→油水混合物→油層分離與粗提取→過程B→過濾→茉莉油。過程A表示　　　　　　　,過程B表示向粗提取精油中加入　　　　　　　　,目的是　　　　　。 (2)茶多酚可以用萃取方法分離得到。萃取裝置要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置,其目的是　　　　　　　　。萃取效率主要取決于　　　　　　　　　　　,同時也受到原料顆粒大小等條件的影響。 (3)在實驗室進行細菌培養(yǎng)時,為檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格,操作的方法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (4)活菌計數(shù)不用平板劃線法,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 10.(2018山東師大附中八模,37)(9分)利用生物技術(shù)可以從生物材料中提取一些特定的有效成分。請回答下列相關(guān)問題: (1)玫瑰精油化學性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,揮發(fā)性　　　　(填“較強”或“較弱”),適宜采用水蒸氣蒸餾法進行提取。經(jīng)上述方法提取后可收集到乳白色的乳濁液,應(yīng)向乳濁液中加入　　　　(填“NaCl”或“無水Na2SO4”)使其分層。 (2)提取橘皮精油方法與玫瑰精油不同,橘皮精油采用　　　　方法提取。提取過程中,橘皮先要經(jīng)過石灰水浸泡,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (3)現(xiàn)有乙醇、乙醚和乙酸乙酯,沸點依次為78 ℃、35 ℃和77 ℃,應(yīng)選擇　　　　　作為溶劑從植物組織中萃取胡蘿卜素,理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　。若要對提取樣品進行鑒定,可將該樣品與　　　　樣品的紙層析結(jié)果進行對比。β-胡蘿卜素在人體肝臟中可被氧化成兩分子的　　　　,因此可用于治療因缺乏該物質(zhì)引起的夜盲癥等疾病。 答案全解全析 非選擇題 1.答案　(1)18~25 ℃　附著在葡萄皮上的野生型酵母菌　色素　(2)空氣中含有醋酸菌,醋酸菌是好氧細菌,最適生長溫度為30~35 ℃,且有氧條件抑制酵母菌的無氧呼吸　缺少糖源、O2充足　(3)離瓶口越近雜菌污染的可能性越大　抑制微生物生長 解析　(1)利用附著在葡萄皮上的野生型酵母菌發(fā)酵制作葡萄酒,應(yīng)將溫度控制在18~25 ℃。隨著酒精度數(shù)的提高,紅葡萄皮中的色素也進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。(2)氣溫高的夏天,空氣中含有醋酸菌,醋酸菌是好氧細菌,最適生長溫度為30~35 ℃,有氧條件會抑制酵母菌的無氧發(fā)酵。在缺少糖源的有氧條件下,果酒中的乙醇被氧化成醋酸。(3)制作腐乳的過程中,離瓶口越近加鹽量越多,原因是離瓶口越近雜菌污染的可能性越大。腐乳制作中加酒的目的是抑制微生物生長,并使腐乳具有獨特的香味。 2.答案　(1)1∶4　加熱煮沸是為了殺滅雜菌,冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響　(2)無氧　微生物呼吸作用產(chǎn)生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣　(3)pH過低抑制了乳酸菌的生長　(4)鹽過多抑制了乳酸菌發(fā)酵　(5)亞硝胺　比色法 標準顯色液 解析　(1)制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質(zhì)量比約為1∶4,鹽水加熱煮沸是為了殺滅雜菌,冷卻之后使用是為了避免高溫殺死乳酸菌,保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響。(2)在泡菜腌制過程中經(jīng)常向壇口邊緣的水槽中補充水分,目的是隔絕空氣,提供乳酸菌發(fā)酵的無氧環(huán)境。在發(fā)酵初期,微生物呼吸作用產(chǎn)生的二氧化碳和泡菜壇中剩余的空氣由于發(fā)酵壇內(nèi)溫度升高會從壇沿水槽內(nèi)的水中溢出。(3)發(fā)酵后期,當乳酸含量達到1.2%以上時,pH過低會抑制乳酸菌的生長,導(dǎo)致發(fā)酵速率漸漸變緩甚至停止。(4)鹽過多會抑制乳酸菌發(fā)酵,會導(dǎo)致制作的泡菜“咸而不酸”。(5)亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)變成亞硝胺,亞硝胺具有致癌作用。檢測泡菜中亞硝酸鹽含量的方法是比色法,檢測時必須先制備已知亞硝酸鹽濃度的標準顯色液。 3.答案　(1)葡萄糖　尿素　固體　選擇　(2)樣品稀釋液中的一個活菌　平板上的菌落數(shù)　(3)30~300　兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的是一個菌落　(4)X射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變,從而缺少合成某種維生素必需的酶　(5)產(chǎn)脲酶細菌分解尿素,使培養(yǎng)基pH升高,指示劑變紅 解析　(1)適合尿素分解菌生長的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,可利用葡萄糖作為碳源,可將尿素作為唯一氮源。表格中碳源是葡萄糖,氮源是尿素。該培養(yǎng)基中有瓊脂,屬于固體培養(yǎng)基;從功能上看,屬于選擇培養(yǎng)基。(2)當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的每個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌,此時平板上的菌落數(shù)較能準確地反映樣品中的活菌數(shù)。(3)培養(yǎng)過程中,常選擇菌落數(shù)在30~300區(qū)間的平板統(tǒng)計計數(shù)。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的真實數(shù)目低,是因為當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的是一個菌落。(4)尿素分解菌經(jīng)X射線照射后不能正常生長,添加某種維生素后才能正常生長,可能是因為X射線照射導(dǎo)致尿素分解菌發(fā)生基因突變,從而缺少合成某種維生素必需的酶。(5)初步篩選出的產(chǎn)脲酶細菌,在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,因為產(chǎn)脲酶細菌可以分解尿素,使培養(yǎng)基pH升高,指示劑變紅,從而達到鑒定目的。 4.答案　(1)低溫、鹽堿地、被油污染(或含油脂)　(2)液體 (3)溴甲酚紫　菌落周圍紫色變淺　(4)方案二　方案一為兩個濃度的簡單組合,酶活性不一定最高;方案二用最佳碳源濃度與各氮源濃度組合,再用最佳氮源濃度與各碳源濃度組合擴大組合范圍,進行實驗,根據(jù)酶活性篩選出最佳組合方案 解析　(1)耐低溫耐鹽堿富含堿性脂肪酶的微生物應(yīng)生活在低溫、鹽堿地、含油脂的環(huán)境中。(2)液體培養(yǎng)基比固體培養(yǎng)基更適宜微生物的生長,所以若樣品中含油脂分解菌很少,應(yīng)配制液體培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng),以獲得大量菌體。(3)根據(jù)題干信息,如果在培養(yǎng)基中滴加溴甲酚紫,隨著油脂分解,在菌落周圍溴甲酚紫將隨油脂的分解紫色變淺,說明此種菌能夠產(chǎn)生脂肪酶。(4)方案一為兩個濃度的簡單組合,組合類型太少,組合類型中的酶活性不一定最高;方案二用最佳碳源濃度a1與各氮源濃度組合,再用最佳氮源濃度b1與各碳源濃度組合,擴大組合范圍,進行實驗,根據(jù)酶活性篩選出最佳碳源和氮源的組合方案。 5.答案　(1)葡萄糖　內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體　(2)剛果紅　顏色反應(yīng) (3)①將誘變得到的纖維素分解菌培養(yǎng)在含有纖維素和剛果紅的培養(yǎng)基中,選出透明圈大的菌株為生產(chǎn)用菌株　②在培養(yǎng)中可能有透明圈較大的菌株,也可能有透明圈較小的菌株 解析　(1)組成纖維素的基本單位是葡萄糖。某真菌細胞中合成的纖維素酶屬于分泌蛋白,需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的加工和運輸。(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)。當纖維素被纖維素酶水解后,剛果紅—纖維素復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,這種方法能夠篩選出纖維素分解菌。(3)結(jié)合對(2)分析可知:欲篩選纖維素分解菌,需在加入剛果紅、且以纖維素為唯一碳源的鑒別培養(yǎng)基中培養(yǎng)相應(yīng)的微生物,形成菌落以后,可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生透明圈進行篩選,且透明圈越大,說明微生物分解纖維素能力越強。但由于基因突變具有不定向性,因此在培養(yǎng)中可能有透明圈較大的菌株,也可能有透明圈較小的菌株。 6.答案　(1)碳源　糖源不足、氧氣充足、相對培養(yǎng)溫度較高(30~35 ℃)　(2)有效避免操作者自身被微生物感染　(3)市場購買的食醋在裝瓶之前經(jīng)過滅菌處理,已無活菌　從自釀食醋或其他含活醋酸菌的食品中分離醋酸菌　(4)酒精會抑制微生物的生長　分別在含有完全培養(yǎng)基的平板中添加等量不同濃度梯度的酒精,每個濃度設(shè)置3個或3個以上平板,接種等量M12并在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間,觀察并記錄M12菌落的生長情況 解析　(1)酒精中含有碳元素,可為醋酸菌的生長提供碳源。醋酸菌的最適生長溫度為30~35 ℃,當氧氣充足、缺少糖源時,醋酸菌可以先將乙醇變?yōu)橐胰?再將乙醛變?yōu)榇姿帷?2)無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還能有效避免操作者自身被微生物感染。(3)從超市買來的食醋,在裝瓶之前經(jīng)過滅菌處理,已無活菌,因此不能從食醋中分離出醋酸菌。若分離醋酸菌,可從自釀食醋或其他含活醋酸菌的食品中分離。(4)酒精會抑制微生物的生長,因此培養(yǎng)基中加入酒精的量不能過多。為測試M12的耐酒精能力,則自變量是酒精的濃度,因變量是M12菌落的生長情況;為了增加實驗結(jié)果的可信度,無關(guān)變量應(yīng)相同且適宜。據(jù)此并依據(jù)實驗應(yīng)遵循的單一變量原則、重復(fù)原則等原則設(shè)計實驗。 7.答案?、?乙醚　萃取青蒿素的溶劑應(yīng)不與水混溶,而乙醇是水溶性溶劑　水蒸氣蒸餾　Ⅱ.(1)將等量的大腸桿菌分別接種到各個平板上　觀察并記錄每個平板上的菌落數(shù)　(2)滅菌后　青蒿素熱穩(wěn)定性差,高壓蒸汽滅菌時會分解　(3)增加一組不加青蒿素溶液的平板 解析?、?萃取青蒿素的溶劑應(yīng)不與水混溶,而乙醇是水溶性溶劑,提取青蒿素時,應(yīng)選用乙醚作為萃取劑。青蒿油熱穩(wěn)定性高,化學性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機溶劑,能和水蒸氣一同蒸餾,故可用水蒸氣蒸餾法提取。Ⅱ.(1)實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照原則與單一變量原則,第①步配置好不同濃度的青蒿素培養(yǎng)基后;第②步應(yīng)該接種大腸桿菌,并且要保證無關(guān)變量要相同且適宜,即應(yīng)將等量的大腸桿菌分別接種到各個平板上;第④步應(yīng)該觀察實驗現(xiàn)象,即觀察并記錄每個平板上的菌落數(shù)。(2)青蒿素熱穩(wěn)定性差,高壓蒸汽滅菌時會分解,步驟①中青蒿素溶液應(yīng)在培養(yǎng)基滅菌后加入。(3)本實驗缺少對照組,不同濃度的青蒿素溶液的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)減少可能是由培養(yǎng)基中的其他物質(zhì)引起的,故應(yīng)該增加一組不加青蒿素溶液的平板。 8.答案　(1)干熱(或高壓蒸汽滅菌)　高壓蒸汽　灼燒　(2)體積 氣泡　菌落　(3)伊紅美藍　黑色 解析　(1)微生物培養(yǎng)過程中要注意防止雜菌污染,培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌,漏斗、培養(yǎng)皿、三角瓶和鑷子等進行干熱或高壓蒸汽滅菌,而對自來水龍頭進行灼燒滅菌。(2)(3)欲測定飲用水中大腸桿菌數(shù)目,將已知體積的水過濾后,將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色,注意濾膜與培養(yǎng)基完全貼緊,不能有氣泡;可根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目,計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。 9.答案　(1)水蒸氣蒸餾　無水硫酸鈉　去除水分　(2)防止加熱時有機溶劑揮發(fā)　萃取劑的性質(zhì)和使用量　(3)將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度恒溫箱中(倒置)培養(yǎng)一段時間,觀察是否有菌落生成　(4)得到的菌落多數(shù)不是單一菌落(菌落數(shù)遠小于活菌數(shù)) 解析　(1)提取茉莉油適合采用水蒸氣蒸餾法,將茉莉花與水混合后進行水蒸氣蒸餾。分離油層后應(yīng)用無水硫酸鈉處理,目的是去除其中的水分。(2)用萃取方法提取茶多酚,其萃取裝置中在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置的目的是防止加熱時有機溶劑揮發(fā)。萃取效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量。(3)實驗室檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格的方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度恒溫箱中(倒置)培養(yǎng)一段時間,觀察是否有菌落生成。(4)活菌計數(shù)一般采用稀釋涂布平板法,不用平板劃線法,原因是平板劃線法得到的菌落多數(shù)不是單一菌落,與實際活菌數(shù)相比,相差太大。 10.答案　(1)較強　NaCl　(2)壓榨　Ca(OH)2溶液能夠破壞細胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防治橘皮壓榨時滑脫,提高出油率　(3)乙酸乙酯　乙酸乙酯不溶于水,沸點較高且毒性較低　標準　維生素A 解析　(1)玫瑰精油化學性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,揮發(fā)性較強,易溶于有機溶劑,能隨水蒸氣一同蒸餾,適宜采用水蒸氣蒸餾法進行提取。經(jīng)水蒸氣蒸餾提取后收集到的乳白色的乳濁液是玫瑰精油與水的混合物;為了能將玫瑰精油與水分開,應(yīng)向乳濁液中加入NaCl使其分層。(2)橘皮精油主要存在于橘皮中,由于橘皮精油的有效成分在水蒸氣蒸餾過程中會發(fā)生部分水解,同時水中蒸餾會產(chǎn)生原料焦糊問題,因此一般采用壓榨法提取橘皮精油。提取橘皮精油時,為了提高出油率,首先將橘皮干燥去水,然后用石灰水浸泡,石灰水可以破壞細胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時滑脫,提高出油率。(3)萃取胡蘿卜素的萃取劑應(yīng)有較高的沸點,毒性低,能夠充分溶解胡蘿卜素,并且不與水混溶。在乙醇、乙醚和乙酸乙酯(沸點依次為78 ℃、35 ℃和77 ℃)中,乙酸乙酯不溶于水,沸點較高且毒性較低,因此應(yīng)選擇乙酸乙酯作為溶劑從植物組織中萃取胡蘿卜素。若要對提取樣品進行鑒定,可將該樣品與標準樣品的紙層析結(jié)果進行對比。β-胡蘿卜素在人體肝臟中可被氧化成兩分子的維生素A,因此可用于治療因缺乏維生素A引起的夜盲癥等疾病。