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發(fā)酵罐安全操作流程 1、檢查蒸汽發(fā)生器，確保已開啟； 2、檢查空氣源，保證供氣壓力在0.4~0.7MPa之間，相對(duì)濕度應(yīng)小于60%；再調(diào)節(jié)空氣減壓閥，使其出口壓力在0.2~0.25MPa之間； 3、檢查各管道、閥門是否有泄漏，進(jìn)料口、補(bǔ)料口硅膠墊是否需要更換，如有請(qǐng)及時(shí)修整； 4、檢查各壓力表是否歸零，不能歸零的予以更換； 5、檢查罐內(nèi)是否清洗干凈； 6、查看控制系統(tǒng)、傳動(dòng)系統(tǒng)是否良好； 7、檢查完畢進(jìn)行打壓試漏：壓力0.15MPa保持30min，如果出現(xiàn)壓力下降，請(qǐng)用肥皂水查找泄漏點(diǎn)，并進(jìn)行修復(fù)； 8、安裝已標(biāo)定的PH電極、溶氧電極等其他檢測設(shè)備，確保已安裝到位、螺母旋緊； 9、檢查一切無問題，如實(shí)填寫記錄并簽字； 二、空氣過濾器消毒 1、首先關(guān)閉空氣過濾器前的進(jìn)蒸汽閥，緩慢卸掉空氣過濾器內(nèi)壓力； 2、打開蒸汽過濾器下端的排污閥（排凈冷凝水后微開），緩緩開啟蒸汽閥，排凈管道內(nèi)冷凝水后調(diào)整蒸汽閥大小，保證蒸汽壓力0.2MPa以上； 3、打開空氣過濾器下端的排污閥，慢慢打開過濾器前的蒸汽閥，待排盡冷凝水后排污閥微開； 4、開啟過濾器后的排氣閥門，通過調(diào)整其與蒸汽閥的大小，維持壓力0.12~0.14MPa消毒30min； 5、消毒結(jié)束調(diào)小排氣閥與排污閥的開度，迅速關(guān)閉蒸汽閥同時(shí)打開進(jìn)空氣閥（換氣過程中保證壓力不掉零），調(diào)整空氣閥大小保持壓力在0.08~0.1MPa，以便吹干空氣過濾器； 6、約20~30min過濾器吹干后（過濾器外壁溫度降至常溫，手試吹出的空氣干燥、細(xì)膩、滑潤），關(guān)閉過濾器下端的排污閥及排氣閥，保持正壓； 三、罐空消 1、首先打開夾套下端的排水閥，排盡夾套中的水； 2、依次打開取樣閥、蒸汽閥，排盡管道內(nèi)冷凝水后將取樣閥轉(zhuǎn)為微開；稍開罐排氣閥，再緩慢開啟罐底隔膜閥使蒸汽徐徐進(jìn)入發(fā)酵罐； 3、在滅菌過程中時(shí)刻注意并控制罐壓在0.11~0.12MPa內(nèi)，罐壓的控制通過蒸汽閥和排氣閥來實(shí)現(xiàn)； 4、空消30~50min后，關(guān)閉蒸汽閥和罐底隔膜閥，關(guān)閉后壓力會(huì)迅速下降，為防止罐內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓，需將進(jìn)空氣閥打開，維持罐壓0.03~0.05MPa或者壓力下降至零時(shí)將排氣閥打開自然冷卻；待溫度降至80℃以下時(shí)排盡罐內(nèi)冷凝水； 四、實(shí)消 1、將標(biāo)定好的PH電極、溶氧電極等檢測設(shè)備安裝，檢查確保安裝到位，旋緊螺母； 2、關(guān)閉罐底隔膜閥，微通風(fēng)、開低轉(zhuǎn)速，按工藝要求將配制好的培養(yǎng)基加入罐內(nèi)，檢查無漏加原料后將加料口螺母適度擰緊； 3、打開夾套排水閥，排盡夾層水；關(guān)閉夾套進(jìn)出水閥門；緩慢打開夾套進(jìn)蒸汽閥（打開過快夾層容易產(chǎn)生異響）進(jìn)行預(yù)熱，保證夾層壓力小于0.1MPa； 4、待罐內(nèi)溫度達(dá)到90℃以上（某些培養(yǎng)基在70~90℃時(shí)容易起泡沫，注意觀察）時(shí)關(guān)閉夾套蒸汽閥； 5、關(guān)閉攪拌、通風(fēng)，排氣閥微開；依次打開取樣閥、蒸汽閥，排盡管道內(nèi)冷凝水后將取樣閥轉(zhuǎn)為微開，打開罐底隔膜閥，將蒸汽緩緩?fù)ㄈ牍迌?nèi)（注意料液翻滾）；再打開進(jìn)風(fēng)管道上的蒸汽閥門，通過控制罐底隔膜閥、風(fēng)管蒸汽閥、排氣閥調(diào)節(jié)罐壓至0.11~0.12MPa，維持121℃滅菌30min（加料口、補(bǔ)料口等均稍微排氣，以徹底消除死角，時(shí)刻注意罐壓）；6、滅菌過程中校正溶氧電極零點(diǎn)，30min滅菌完畢后，依次關(guān)閉加料口、補(bǔ)料口、罐底隔膜閥、風(fēng)管蒸汽閥；關(guān)閉夾套排水閥，打開循環(huán)進(jìn)出水閥（變換要迅速，時(shí)刻注意罐壓變化，防掉零）；此時(shí)在控制柜中找到對(duì)應(yīng)罐，開啟“冷卻手動(dòng)”和“轉(zhuǎn)速”按鍵，開始冷卻降溫； 7、降溫時(shí)罐壓將迅速下降，當(dāng)降至0.05MPa時(shí)開啟風(fēng)管進(jìn)氣閥，隨時(shí)保持壓力在0.05MPa； 五、無菌接種 1、當(dāng)料液溫度降至工藝要求時(shí)，按照工藝要求將轉(zhuǎn)速、通風(fēng)量調(diào)至最大，并維持罐壓穩(wěn)定幾分鐘后，標(biāo)定溶氧電極滿度； 2、用酒精棉擦拭接種口和接種者雙手，火圈加入酒精套在接種口上，關(guān)閉攪拌轉(zhuǎn)速，降低通風(fēng)量，維持罐壓在0.01~0.02MPa（不能掉零，否則容易引起污染），點(diǎn)燃火圈，用工具扳手緩慢擰下接種口螺母（快速開啟，容易出現(xiàn)危險(xiǎn)），螺母不能離開火焰； 3、接種者將菌種瓶口在火焰上稍微燒一會(huì)兒，拔下瓶塞迅速將菌種倒入罐內(nèi)； 4、擰緊接種口螺母，熄滅火焰，并用酒精棉將接種口擦拭干凈；按工藝要求調(diào)好轉(zhuǎn)速、通風(fēng)量、罐壓，并點(diǎn)擊“開始發(fā)酵”按鍵開始計(jì)時(shí)培養(yǎng)； 六、取樣操作 關(guān)閉蒸汽閥、全開取樣閥，開啟罐底隔膜閥進(jìn)行取樣；取樣完畢后微開取樣閥和蒸汽閥，用少量蒸汽進(jìn)行封口，保持無菌狀態(tài)； 七、罐的清洗 1、發(fā)酵罐在使用前和使用后要及時(shí)清洗干凈；打開兩邊清洗口，用水管清洗余料，若不能清洗干凈則需拆開罐蓋； 2、拆洗前首先關(guān)閉電源，擰開周邊螺絲，兩人小心地同時(shí)將罐蓋垂直向上取出（注意：請(qǐng)不要抓傳動(dòng)軸，以免影響機(jī)械密封和軸的傳動(dòng)穩(wěn)定性），水平放置平整的地面上，并防止?jié)L動(dòng)； 3、徹底清洗干凈后，將罐蓋按原位輕輕放入發(fā)酵罐內(nèi)，擰上周邊螺絲（注意：對(duì)角擰螺絲，松緊基本一致）； 4、安裝完畢后通入空氣（0.15MPa）,檢查管道和罐的密封性，如有泄漏則需修復(fù)； 5、如不接著進(jìn)入下一批發(fā)酵，請(qǐng)將溶氧電極拆下清洗干凈，放回安全處保存；PH電極清洗干凈浸泡在3mol/L的KCL溶液中保存； 八、維護(hù)與保養(yǎng) 1、與發(fā)酵相配套設(shè)備按要求定期維護(hù)與保養(yǎng)； 2、空氣精過濾濾芯根據(jù)實(shí)際使用效果定期更換，一般使用期限為一年； 3、發(fā)酵罐清洗時(shí)，請(qǐng)使用軟毛刷，避免硬器刮擦； 4、壓力表、減壓閥時(shí)常檢查，不歸零及時(shí)更換； 5、定期檢查墊圈、密封圈等，損壞及時(shí)更換，以免影響罐的密封性； 6、電器、儀表、傳感器等電器設(shè)備嚴(yán)禁直接接觸水、汽； 7、PH電極在使用前必須通電穩(wěn)定2~3h，否則電極不穩(wěn)定，造成測量數(shù)據(jù)不準(zhǔn)； 8、溶氧電極在使用前必須通極化4~6h，否則電極不穩(wěn)定，造成測量數(shù)據(jù)會(huì)不準(zhǔn)； 9、設(shè)備長時(shí)間停止使用時(shí)，應(yīng)清洗干凈，排盡罐內(nèi)及各管道中的余水；松開罐蓋螺絲，防止密封圈產(chǎn)生永久變形。 第 5 頁 共 5 頁