《北京化工大學(xué)儀器分析第三章液相色譜實(shí)例分析.ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《北京化工大學(xué)儀器分析第三章液相色譜實(shí)例分析.ppt（41頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題及故障排除經(jīng)驗(yàn) 液相系統(tǒng)維護(hù)流程圖 色譜柱 等度系統(tǒng) 儲(chǔ)液瓶 脫氣機(jī) 泵單元 手動(dòng)進(jìn)樣器 色譜柱 檢測(cè)器 廢液瓶 1234567 低壓梯度系統(tǒng) 123456789 高壓梯度系統(tǒng) 12345678 液相色譜故障排除經(jīng)驗(yàn) 故障的確定 至少要重復(fù)出現(xiàn)兩次以上初步判斷故障引起的原因 方法或硬件由經(jīng)驗(yàn)或平時(shí)的積累確定故障原因 平時(shí)做好觀察和記錄當(dāng)不能確認(rèn)故障原因時(shí) 采用排除法逐一考察可能引起故障的因素確定故障能否自行處理 不要貿(mào)然拆卸不熟悉的部件 常見(jiàn)故障因素 儀器環(huán)境 實(shí)驗(yàn)室的溫度 濕度 酸度等 實(shí)驗(yàn)室震動(dòng) 灰塵等問(wèn)題 電源及地線問(wèn)題使用條件 流動(dòng)相 pH值 均勻度 氣泡等 樣品 樣品分解 氧化 樣品溶劑等 色譜柱 污染 堵塞 塌陷等 硬件問(wèn)題 輸液泵 進(jìn)樣器 檢測(cè)器 平常保養(yǎng) 做好平常的保養(yǎng)可以有效的降低故障的發(fā)生率 做好平常的保養(yǎng)可以延長(zhǎng)儀器的使用壽命常做的保養(yǎng) 保證儀器的使用環(huán)境 經(jīng)常清潔儀器 尤其是灰塵 泵的保養(yǎng) 使用緩沖鹽時(shí)要清洗柱塞 水和鹽不要長(zhǎng)期保存在泵里 進(jìn)樣器要經(jīng)常清洗 避免污染物吸附或堵塞管路 盡量進(jìn)行樣品前處理 色譜柱要定期清洗 保證柱效及使用壽命 系統(tǒng)中不要長(zhǎng)期保存水和鹽 長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)應(yīng)將儀器所有部分全部更換為70 以上的甲醇 避免細(xì)菌的滋生及鹽的析出 液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題 壓力異常 偏高 波動(dòng) 漏液保留時(shí)間漂移基線問(wèn)題 漂移 噪聲 峰形異常 壓力 壓力是液相色譜中最重要的指標(biāo) 要經(jīng)常關(guān)注壓力的變化 保留時(shí)間的變化經(jīng)常是由于壓力問(wèn)題引起的 不同溶劑即使在相同流速和溫度的情況下壓力也是不同的 記下儀器正常狀態(tài)時(shí) 在固定條件下 流動(dòng)相 流速 溫度等 的壓力顯示值 壓力過(guò)高時(shí) 首先要確認(rèn)是色譜柱堵塞還是系統(tǒng)堵塞色譜柱堵時(shí) 確認(rèn)可能造成堵塞的樣品的性質(zhì) 相應(yīng)選擇合適的清洗溶劑 系統(tǒng)堵塞 首先應(yīng)確認(rèn)是哪一部份堵塞 依據(jù)情況由后向前進(jìn)行排除 容易發(fā)生堵塞的部件 保護(hù)柱及色譜柱線路過(guò)濾器混合器過(guò)濾組件管路連接處進(jìn)樣器檢測(cè)器流通池 壓力過(guò)低 如果壓力為零 泵頭中沒(méi)有液體 充滿氣泡單向閥完全堵死泵的柱塞桿折斷壓力傳感器損壞 流動(dòng)相流動(dòng)正常 但無(wú)壓力 如果有壓力但是壓力比正常時(shí)低 漏液?jiǎn)蜗蜷y堵塞 壓力波動(dòng) 壓力在短時(shí)間內(nèi)劇烈波動(dòng) 泵頭中有氣泡單向閥臟柱塞密封圈漏液 經(jīng)常漏液的部件 泵 柱塞密封圈 排液閥手動(dòng)進(jìn)樣器 轉(zhuǎn)子密封圈磨損檢測(cè)器 流通池窗口 墊片損壞 透鏡破碎 接頭處漏液 接頭松動(dòng) 接頭臟 接頭磨損 部件不匹配 保留時(shí)間不穩(wěn)定 吸濾頭臟泵輸液不正常 壓力波動(dòng) 氣泡等 流動(dòng)相組分變化流動(dòng)相緩沖能力不夠色譜柱平衡時(shí)間不夠柱溫的變化柱子問(wèn)題 噪音大 流動(dòng)相污染 變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成漏液流動(dòng)相 泵 檢測(cè)器流通池內(nèi)有氣泡流動(dòng)相各溶劑不相溶或混和不均勻檢測(cè)池能量不足流通池被污染溫度影響 檢測(cè)器和柱溫差別太大 其他電子設(shè)備的影響或電源 地線等 基線漂移 流動(dòng)相污染 變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成流動(dòng)相不均勻 脫氣 使用純度更高的溶劑 溫度波動(dòng)系統(tǒng)平衡時(shí)間不夠流通池被污染或有氣泡流通池窗口破裂 峰形問(wèn)題 死體積太大柱子被污染或堵塞色譜柱塌陷流動(dòng)相緩沖不足或不合適樣品溶劑選擇不當(dāng) 與流動(dòng)相之間極性差異太大樣品過(guò)載 濃度或體積 柱溫過(guò)低 鬼峰 流動(dòng)相被污染進(jìn)樣閥殘余峰樣品中未知物色譜柱中的污染物 管線選擇 材料不銹鋼Teflon 聚四氟乙烯 PEEK 聚醚醚酮 尺寸0 1mmI D x1 6mmO D 0 3mmI D x1 6mmO D 0 5mmI D x1 6mmO D 0 8mmI D x1 6mmO D 管線材料 不銹鋼 可用于所有連接 能承受幾千kgf cm2壓力酸性或高濃度鹽環(huán)境中易腐蝕 尤其在pH小于2時(shí) PEEK 可用于所有連接 能承受高達(dá)250kgf cm2壓力可在整個(gè)PH范圍 pH1 14 內(nèi)使用不適用于高溶解性溶劑如氯仿等Teflon 用于柱后阻尼管 反應(yīng)管和排液管 化學(xué)惰性大能承受5kgf cm2壓力 接頭 不銹鋼接頭 墊圈主要用于輸液泵 進(jìn)樣器的連接能承受400kgf cm2壓力一旦固定 墊圈不可再動(dòng)PEEK接頭主要用于色譜柱 檢測(cè)器的連接易于安裝能承受250kgf cm2壓力容易產(chǎn)生死體積 不銹鋼接頭 墊圈 PEEK接頭 死體積 死體積可能會(huì)引起分離度變差和重現(xiàn)性變差等問(wèn)題 管線 公螺母 死體積 好的連接 差的連接 選擇原則采用 HPLC 級(jí)溶劑避免使用會(huì)引起柱效損失或保留特性變化的溶劑對(duì)試樣有適宜的溶解度溶劑粘度要小與檢測(cè)器相匹配 流動(dòng)相 水 甲醇梯度ODS柱 鬼峰 鬼峰的出現(xiàn) 流動(dòng)相 水的等級(jí)純化水蒸餾水去離子水 波長(zhǎng) nm 純化水 去離子水 因?yàn)椴患兾锏拇嬖?去離子的吸光率較高 純化水中去除了無(wú)機(jī)和有機(jī)的污染物 吸光率 流動(dòng)相 流動(dòng)相的更換 不互溶的流動(dòng)相不能直接更換 緩沖鹽不能直接用有機(jī)溶劑更換 水 正己烷 異丙醇 緩沖鹽 有機(jī)溶劑 水 過(guò)濾 0 45um或更小孔徑濾膜目的 除去溶劑中的微小顆粒 避免堵塞色譜柱 尤其是使用無(wú)機(jī)鹽配制的緩沖液時(shí) 溶劑前處理 吸濾頭 吸濾頭 材料 不銹鋼 或陶瓷 燒結(jié) 孔徑10um故障 堵塞表現(xiàn) 管路中不斷有氣泡生成措施 用異丙醇 或5 稀硝酸 超聲波清洗 再用蒸餾水清洗 LC20AT主入口閥部件號(hào) 228 45704 92 LC20AD入口閥LC20AT副入口閥部件號(hào) 228 45704 91 LC20AD出口閥部件號(hào) 228 45705 91 單向閥 LC10ADvp出口閥LC10ATvp出口閥部件號(hào) 228 34976 91 LC10ADvp入口閥部件號(hào) 228 39093 92 LC10ATvp入口閥部件號(hào) 228 32166 91 進(jìn)樣器 自動(dòng)進(jìn)樣器手動(dòng)進(jìn)樣器 7725 7725i 原理 六通閥 注入方式 1 全量注入2 部分注入 7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥 色譜柱的日常保養(yǎng) 購(gòu)買(mǎi)新柱后一定要仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū) 確認(rèn)柱的使用條件以及清洗再生步驟 按照說(shuō)明書(shū)條件測(cè)試色譜柱柱效 記錄使用壓力定期檢測(cè)柱壓和柱效不同流動(dòng)相之間轉(zhuǎn)換時(shí)應(yīng)注意溶劑的互溶性確認(rèn)樣品不會(huì)在流動(dòng)相中析出或帶有固體不溶物 請(qǐng)使用0 45um或0 2um的一次性濾膜過(guò)濾樣品 或者進(jìn)行前處理 為了延長(zhǎng)色譜柱使用壽命 請(qǐng)使用保護(hù)柱 定期用合適的溶劑清洗或再生色譜柱長(zhǎng)期不用時(shí) 清洗干凈后 使用柱子說(shuō)明書(shū)中指明的溶劑保存 柱子要從儀器上卸下并用堵頭密封后保存 定期用合適的流動(dòng)相清洗保存的柱子 避免干涸 峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因 1 柱子劣化 進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙 溶劑效應(yīng)3 樣品劣化 生成氧化物 分解物等 判斷標(biāo)準(zhǔn)所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時(shí)則為柱子劣化 峰的變形 根部變寬 有肩或分叉 溶解樣品的溶劑選擇不當(dāng) 最好不要選擇高溶解性的試劑作為溶解樣品的溶劑 最好注入少量樣品 溶解性效應(yīng) 低溶解性溶劑 高溶解性溶劑 檢測(cè)器基線異常 基線噪音異常大氣泡未脫出檢測(cè)器污染燈老化出現(xiàn)漂移或不規(guī)則波動(dòng)系統(tǒng)污染 如色譜柱 管路 檢測(cè)器和流動(dòng)相等等產(chǎn)生規(guī)則波動(dòng)室溫變化 如空氣調(diào)節(jié)器直吹檢測(cè)器泵的脈動(dòng) 紫外燈的保養(yǎng) 氘燈保證壽命為2000小時(shí)保證儀器的使用環(huán)境在分析前 柱平衡得差不多時(shí) 再打開(kāi)檢測(cè)器紫外燈 不要頻繁的開(kāi)關(guān)紫外燈 同樣會(huì)損害紫外燈的壽命 一般間隔時(shí)間在三小時(shí)以上時(shí) 檢測(cè)池背壓 使用0 3mmIDx2m塑料管作為阻尼管連接于檢測(cè)器出口 否則檢測(cè)池中會(huì)有氣泡產(chǎn)生連接阻尼管之前 必須先確認(rèn)檢測(cè)池能夠承受的壓力