2019年春高中生物 專題2 細胞工程 2.2 動物細胞工程 2.2.2 動物細胞融合與單克隆抗體(第2課時)預(yù)習(xí)學(xué)案 新人教版選修3.doc
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動物細胞融合與單克隆抗體 課前預(yù)習(xí)學(xué)案 一、預(yù)習(xí)目標 預(yù)習(xí)動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程,了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用,并說其應(yīng)用實例。 “二、預(yù)習(xí)內(nèi)容 ㈠、動物細胞融合 1、概念:_______或_______動物細胞結(jié)合形一個細胞的過程,也稱細胞雜交。 2、結(jié)果:形成___________。 3、過程:兩個或多個細胞___________________________________。 4、意義:克服了___________的不親和性,成為研究___________、___________、腫瘤和 _______________培育的重要手段。 ㈡、單克隆抗體 1、抗體 ⑴產(chǎn)生細胞:_________________。 ⑵成分:__________。 ⑶特點:從__________中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2、單克隆抗體的制備 (1)過程 ⑵雜交瘤細胞的特點:____________________、____________________。 ⑶單克隆抗體的優(yōu)點:____________、____________、____________。 ㈢、單克隆抗體的應(yīng)用 1、作為診斷試劑,具有__________、__________、__________、__________的優(yōu)點。 2、用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療_______、可制成___________。 三、提出疑惑 同學(xué)們,通過你的自主學(xué)習(xí),你還有哪些疑惑,請把它填在下面的表格中 疑惑點 疑惑內(nèi)容 課內(nèi)探究學(xué)案 一、學(xué)習(xí)目標 1、 掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。 2、 簡述動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程。 3、 了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用,并說其應(yīng)用實例。 學(xué)習(xí)重難點:單克隆抗體的制備 二、學(xué)習(xí)過程 (一) 動物細胞的融合 探究一:動物細胞的融合 1、植物體細胞雜交和動物細胞融合的區(qū)別(學(xué)生填下表) 植物體細胞雜交 動物細胞融合 細胞融合原理 細胞膜的流動性 融合過程 先使細胞分散開 誘導(dǎo)方法 電激、振動、離心、聚乙二醇 結(jié)果 應(yīng)用 培育植物新品種 意義 相同點 原生質(zhì)體融合原理相同;原生質(zhì)體融合的方法相似 2植物體細胞雜交和動物細胞融合的主要區(qū)別是什么? 3、為什么可以使用滅活的病毒促進動物細胞融合? 4、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎? 知識閱讀:閱讀課本P52中的小字,了解一下動物細胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史。 (二)單克隆抗體 探究二:單克隆抗體制備的原理 1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?抗體是從何來的? 2、B淋巴細胞有什么特點? 3、若要想獲得大量的單一抗體,如何做呢? 4、在體外培養(yǎng)的條件下,一個B淋巴細胞是不可能無限增殖的,那么,怎樣解決這一問題的呢? 5、小結(jié)以下內(nèi)容: ◆ 利用____________________產(chǎn)生特異性抗體的功能。 ◆ 利用____________________無限增殖的特性。 ◆ 利用____________________技術(shù)將兩種細胞融合獲得雜交瘤細胞。 ◆ 利用____________________技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細胞。 探究三:單克隆抗體制備的過程 1、如何獲得B淋巴細胞? 2、如果把B淋巴細胞和骨髓瘤細胞放在一起時,會有幾種融合方式(類型)? 3、 選擇雜交瘤細胞的兩步篩選的目的各是什么? 4、如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)?(教師講解為主) 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后,能存活的細胞就是雜交瘤細胞,但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞,通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細胞稀釋,用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng),使每孔不超過一個細胞,通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體,那么上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞,挑選陽性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋,一般需進行3~4次,直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞。該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。 探究四:單克隆抗體的應(yīng)用 1、單克隆抗體的應(yīng)用有哪些? 2、生物導(dǎo)彈的組成及優(yōu)點 (三)反思總結(jié) (四)當堂檢測 1、基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞混合,用滅活的仙臺病毒處理后,不可能獲得下列哪種基因型的細胞 ( ) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb 2、動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的是 ( ) ①誘導(dǎo)融合的方法完全相同 ②所用的技術(shù)手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成雜種細胞 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 3、關(guān)于單克隆抗體,下列敘述不正確的是 ( ) A、可以制成診斷盒.用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合,用于病變細胞的定向治療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn),不能體外生產(chǎn) 4、“生物導(dǎo)彈”是指 ( ) A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體 C、雜交細胞 D、B淋巴細胞 課后練習(xí)與提高 1、動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較,在動物細胞融合中有特殊性的是 ( ) A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點 C、融合的誘導(dǎo)手段 D、融合的過程 2、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱為 ( ) A、抗體、T淋巴細胞 B、抗原、T淋巴細胞 C、抗體、B淋巴細胞 D、抗原、效應(yīng)B淋巴細胞 3、單克隆抗體和血清抗體相比,其優(yōu)越性在 于 ( ) A、單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈” B、單克隆抗體能夠在體外制備 C、單克隆抗體比血清抗體的特異性強、免疫活性高 D、單克隆抗體制備過程簡單 4、單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述,錯誤的是 ( ) A.特異性強、靈敏度高 B.與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C.體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體 D.由效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌 5、試管嬰兒、試管苗、克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果,下面對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述正確的是 ( ) A.都屬于無性生殖,能保持母本性狀 B.都是細胞工程的技術(shù)范圍 C.都充分體現(xiàn)了體細胞的全能性 D.都不會發(fā)生基因重組和變異 6、右圖為細胞融合的簡略過程,請據(jù)圖回答: (1)若A、B是植物細胞,在細胞融合之前已用____ __________ ____________處理,除去了____________;由A、B到細胞C 的過程中,常用的物理方法是_____________________________。 融合完成的標志是_______________。 (2)若A、B是植物細胞,則形成的D細胞還要應(yīng)用__________ ____________________技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。 (3)若A、B是動物細胞,一般取自________________________________, 然后用____________________使其分散開來;由A、B到C的過程中,常用的不同于植物細胞融合的手段是_______________________,所形成的D稱為_____________________ ,A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有_____________________。 (4)若該過程是制備單克隆抗體,A為小鼠效應(yīng)B細胞,那么,在獲得此細胞之前,小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng),生成了_______________________ ___________________,圖中B為 。 (5)若該過程仍是制備單克隆抗體,在A、B到C的過程中,所形成的C有_____種,用來培養(yǎng)的D細胞應(yīng)該是_________________。從中選擇出它的方法是_________________培養(yǎng),獲得D后,常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和______________。 動物細胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學(xué)案答案 預(yù)習(xí)內(nèi)容: 探究二:單克隆抗體制備的原理 1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?抗體是從何來的? 傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動物產(chǎn)生抗體,然后從動物血清中分離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低,而且制備的抗體特異性差。 2、B淋巴細胞有什么特點? B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體,但每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。 3、若要想獲得大量的單一抗體,如何做呢? 我們必須用單個B淋巴細胞進行無性繁殖,也就是通過克隆形成細胞群,這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體,即單克隆抗體 第二步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細胞。因為小鼠體內(nèi)的B淋巴細胞有很多種,因此獲得的雜交瘤細胞可能產(chǎn)生不同的抗體,需要從中篩選出能產(chǎn)生我們所需的單一抗體的雜交瘤細胞,篩選的方法是專一抗體檢驗。 4、如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)?(教師講解為主) 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后,能存活的細胞就是雜交瘤細胞,但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞,通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細胞稀釋,用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng),使每孔不超過一個細胞,通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中- 1.請仔細閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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