2019屆高考生物一輪復習 第十一單元 現(xiàn)代生物科技專題 隨堂真題演練35 基因工程及其安全性.doc
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隨堂真題演練35 基因工程及其安全性 (2017高考全國卷Ⅱ)幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}: (1)在進行基因工程操作時,若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料,原因是________________________________。提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是________________________________________。 (2)以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是______________________________________。 (3)若要使目的基因在受體細胞中表達,需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細胞,原因是_____________________________________________________________(答出兩點即可)。 (4)當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是________________。 (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是____________________________________。 解析:(1)在進行基因工程操作時,若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料,原因是相對于老葉而言嫩葉組織細胞更容易被破碎。提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是防止RNA降解。(2)以mRNA為材料獲得cDNA的原理是在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補配對的原則可以合成cDNA。(3)若要使目的基因在受體細胞中表達,需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細胞,原因是目的基因無復制原點且目的基因無表達所需啟動子。(4)DNA連接酶催化形成的化學鍵是磷酸二酯鍵。(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株不具備所期望的性狀表現(xiàn),根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常。 答案:(1)嫩葉組織細胞易破碎 防止RNA降解 (2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補配對的原則可以合成cDNA (3)目的基因無復制原點;目的基因無表達所需啟動子 (4)磷酸二酯鍵 (5)目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常 (2017高考全國卷Ⅲ)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示。 回答下列問題: (1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),則所構(gòu)建的表達載體轉(zhuǎn)入宿主細胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是_______________________________________________。 (2)某同學在用PCR技術獲取DNA片段B或D的過程中,在PCR反應體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為__________,加入了________作為合成DNA的原料。 (3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細胞增殖的作用,某同學做了如下實驗:將一定量的含T淋巴細胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對照,培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細胞濃度,結(jié)果如圖2。 ①由圖2 可知,當細胞濃度達到a時,添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細胞濃度不再增加,此時若要使T淋巴細胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是________________。細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是_______________________________。 ②僅根據(jù)圖1、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少____________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會降低其刺激T淋巴細胞增殖的效果。 解析:(1)若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),則轉(zhuǎn)錄出的mRNA上缺少起始密碼子,故不能翻譯出蛋白乙。(2)使用PCR技術獲取DNA片段時,應在PCR反應體系中添加引物、耐高溫的DNA聚合酶、模板、dNTP作為原料。(3)T淋巴細胞濃度之所以不再增加,是因為細胞間出現(xiàn)接觸抑制,因此若要使T淋巴細胞繼續(xù)增殖,需要對貼滿瓶壁的細胞使用胰蛋白酶處理,然后分瓶培養(yǎng),即細胞傳代培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,以維持培養(yǎng)液的pH。據(jù)圖分析,蛋白丙與對照接近說明B、D片段對于T淋巴細胞增殖不是非常重要,蛋白甲和乙對T淋巴細胞的增殖都有較大影響,甲、乙兩種蛋白中共同的片段是C,所以缺少C片段會降低其刺激T淋巴細胞增殖的效果。 答案:(1)編碼乙的DNA序列起始端無ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA無起始密碼子 (2)模板 dNTP (3)①進行細胞傳代培養(yǎng) 維持培養(yǎng)液的pH?、贑 (高考新課標全國卷Ⅰ)閱讀如下資料: 資料甲:科學家將牛生長激素基因?qū)胄∈笫芫阎?,得到了體型巨大的“超級小鼠”;科學家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。 資料乙:T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性??茖W家對編碼T4溶菌酶的基因進行了改造,使其表達的T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?,在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵,提高了T4溶菌酶的耐熱性。 資料丙:兔甲和兔乙是同一物種的兩個雌性個體,科學家將兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移植到兔乙體內(nèi),成功產(chǎn)出兔甲的后代,證實了同一物種的胚胎可在不同個體的體內(nèi)發(fā)育。 回答下列問題: (1)資料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達載體導入小鼠的受精卵中常用________法。構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶是________和________。在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時,常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是__________________________________________。 (2)資料乙中的技術屬于________工程的范疇,該工程是指以分子生物學相關理論為基礎,通過基因修飾或基因合成,對________進行改造,或制造一種________的技術。在該實例中,引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的________序列發(fā)生了改變。 (3)資料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到______種的、生理狀態(tài)相同的另一個雌性動物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育成新個體的技術。在資料丙的實例中,兔甲稱為______體,兔乙稱為________體。 解析:(1)小鼠細胞為動物細胞,將基因表達載體導入動物細胞常用的方法是顯微注射法;構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶是限制酶和DNA連接酶;將基因表達載體導入植物細胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是作為載體,將目的基因?qū)胧荏w細胞。 (2)從資料乙中可以得出是對基因進行改造,結(jié)果是得到耐熱性提高的蛋白質(zhì),因此屬于蛋白質(zhì)工程的范疇,該工程是指以分子生物學相關理論為基礎,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新蛋白質(zhì)的技術。對基因進行改造后,第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?,該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成二硫鍵,引起了空間結(jié)構(gòu)的改變,所以最終是由于氨基酸序列的改變導致了空間結(jié)構(gòu)的改變。 (3)胚胎工程中胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎,或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。資料丙中甲兔提供受精卵,所以甲兔是供體;胚胎在乙兔子宮內(nèi)發(fā)育,所以乙兔為受體。 答案:(1)顯微注射 限制酶 DNA連接酶 農(nóng)桿菌可感染植物,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中 (2)蛋白質(zhì) 現(xiàn)有的蛋白質(zhì) 新蛋白質(zhì) 氨基酸 (3)同 供 受 [課時作業(yè)] 1.DNA是豐富多彩的生命現(xiàn)象的“劇本”?,F(xiàn)在人們借助生物科學技術可以對“劇本”進行“拷貝”或“改編”。據(jù)圖回答下列問題: (1)催化①過程的酶是________,經(jīng)①過程產(chǎn)生的DNA片段末端的形式為________。 (2)催化②過程的酶是________,與催化①過程的酶相比較,該酶的專一性________(填“較強”或“較弱”)。 (3)催化③過程的酶是________,實現(xiàn)該過程還可以采用的方法是________。 (4)催化④過程的酶是________,該過程體現(xiàn)了DNA復制_________________________的特點。 答案:(1)限制酶 黏性末端 (2)DNA連接酶 較弱 (3)解旋酶 加熱 (4)DNA聚合酶 半保留復制、邊解旋邊復制 2.(2018遼寧五校協(xié)作體高三聯(lián)考)白細胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細胞介素的基因?qū)氲浇湍妇毎?,使其分泌出有活性的白細胞介素。請?jù)圖回答下列問題: (1)為增加白細胞介素基因的數(shù)量,可使用________技術,但前提是必須知道基因的部分序列,目的是________________________________________________________________________。 (2)在重組載體導入酵母菌細胞之前,需用________處理酵母菌,白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi),并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為________。在表達過程中,啟動子需與________識別和結(jié)合,從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程。 (3)在體液免疫過程中,白細胞介素是由________細胞分泌的,為了能成功表達出白細胞介素,不使用細菌,而使用酵母菌細胞作為受體細胞,可能原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)在分泌型表達載體和白細胞介素基因所在DNA分子上均有多個限制酶的酶切位點,圖示過程獲得有效表達的重組載體使用了EcoRⅠ和EcoR 52兩種限制酶,與使用單一的限制酶相比,其優(yōu)點是_______________________________________________。 解析:(1)基因工程中,擴增目的基因利用的是PCR技術,但前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便設計引物。(2)在重組載體導入酵母菌細胞之前,需用Ca2+處理酵母菌,使酵母菌細胞處于感受態(tài),白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi),并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為轉(zhuǎn)化。在表達過程中,啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合,從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程。(3)在體液免疫過程中,白細胞介素是由T淋巴細胞分泌的;由于細菌屬于原核生物,細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器,因此為了能成功表達出白細胞介素,不使用細菌,而使用酵母菌細胞作為受體細胞。(4)在分泌型表達載體和白細胞介素基因所在的DNA分子上均有多個限制酶的酶切位點,圖示過程獲得有效表達的重組載體使用了EcoRⅠ和EcoR 52兩種限制酶,與使用單一的限制酶相比,其優(yōu)點是能防止目的基因、表達載體發(fā)生自身環(huán)化或者目的基因反向接入分泌型表達載體中。 答案:(1)PCR 設計引物 (2)Ca2+ 轉(zhuǎn)化 RNA聚合酶 (3)T淋巴 細菌細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器 (4)能防止目的基因、表達載體發(fā)生自身環(huán)化或者目的基因反向接入分泌型表達載體中 3.(2018德州高三調(diào)研)凡是具有抗原性、接種于機體可產(chǎn)生特異性免疫、可抵抗傳染病的發(fā)生和流行的物質(zhì)均可稱為疫苗。以下是三代乙肝疫苗的生產(chǎn)原理示意圖,回答下列問題。 (1)目前臨床使用的乙肝疫苗是第二代疫苗。圖中外衣殼蛋白基因A的大量擴增可通過________技術,需要用到的一種重要酶是________和________種引物。構(gòu)建含基因A的重組質(zhì)粒需要用到的工具酶是______________________________________________。 (2)據(jù)信息和所學知識分析:第一代疫苗基本處于淘汰的原因是:__________________。 (3)結(jié)合圖中第二代、第三代疫苗的化學本質(zhì),分析推測哪一代疫苗利于運輸及其原因:________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)處源DNA進入機體后,如果整合到人體基因組中可能會引起________和________發(fā)生突變而導致機體癌變,這也是第三代疫苗可能存在的安全隱患,目前正在研究中。 解析:(1)目的基因大量擴增可通過PCR技術,該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶。由于DNA的結(jié)構(gòu)特點是兩條鏈反向平行,因此擴增過程需要2種引物。構(gòu)建基因表達載體需要用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶。(2)第一代疫苗用的是減毒或滅活的病毒,病毒有可能恢復致病性或引起血源性疾病。(3)從圖中分析,第三代疫苗要比第二代疫苗更有利于運輸,因為第三代疫苗本質(zhì)是DNA,第二代疫苗本質(zhì)是蛋白質(zhì),DNA的穩(wěn)定性比蛋白質(zhì)高。(4)細胞癌變的原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變。 答案:(1)PCR 熱穩(wěn)定DNA聚合酶(或Taq DNA聚合酶) 2 限制酶與DNA連接酶 (2)有引起血源性疾病的嫌疑(或病毒有可能恢復致病性) (3)第三代疫苗更有利于運輸,因為第三代疫苗的本質(zhì)是DNA,第二代疫苗的本質(zhì)是蛋白質(zhì),DNA穩(wěn)定性比蛋白質(zhì)高 (4)原癌基因 抑癌基因 4.(2016高考江蘇卷)下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點,其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題: 限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ 識別序列及切割位點 ↓ GGATCC CCTAGG ↑ ↓ TGATCA ACTAGT ↑ ↓ GATC CTAG ↑ ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ (1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應選用________兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。 (2)若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接,連接部位的6個堿基對序列為____________________,對于該部位,這兩種酶________________(填“都能”“都不能”或“只有一種能”)切開。 (3)若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得________種大小不同的DNA片段。 解析:(1)選擇的限制酶應在目的基因兩端存在識別位點,但BamHⅠ可能使質(zhì)粒中標記基因丟失,因此只能選BclⅠ和HindⅢ。酶切后的載體和目的基因片段,通過DNA連接酶作用后獲得重組質(zhì)粒。 (2)根據(jù)BamHⅠ和BclⅠ的酶切位點,BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接,在連接部位的6個堿基對序列為,與這兩種酶的酶切位點均不同。 (3)根據(jù)BamHⅠ、BclⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點, Sau3A Ⅰ在質(zhì)粒上有三個酶切位點,完全酶切可得到記為A、B、C三種片段,若部分位點被切開,可得到AB、AC、BC、ABC四種片段,所以用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得7種大小不同的DNA片段。 答案:(1)BclⅠ和HindⅢ DNA連接 (2) 都不能 (3)7 5.下圖表示科學家培育耐寒生物的過程,請回答下列問題: cDNA文庫②受體細胞→耐寒生物 (1)從cDNA文庫中獲取的目的基因______(填“有”或“無”)啟動子。實現(xiàn)①過程常用________技術,該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成________。 (2)②表示________________,其中標記基因的作用是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)轉(zhuǎn)基因技術是否成功,需要對受體細胞進行分子水平的檢測,首先是用DNA分子雜交技術檢測受體細胞染色體上的DNA上是否插入目的基因,這種方法需要遵循________________原則。 (4)若要培育抗凍能力強的轉(zhuǎn)基因羊,可將魚的抗凍蛋白基因?qū)胙虻腳_______中,培育該轉(zhuǎn)基因羊的最后一道“工序”是胚胎工程的________________技術。 解析:(1)用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補DNA片段,與載體連接后儲存在一個受體菌群中,這個受體菌群就叫這種生物的cDNA文庫,啟動子不能逆轉(zhuǎn)錄,由逆轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA中沒有啟動子。獲得更多的目的基因的方法是PCR技術,該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物。(2)②表示基因表達載體,其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因。(3)DNA分子雜交技術遵循堿基互補配對原則。(4)培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因動物時,受體細胞一般為受精卵,培育該轉(zhuǎn)基因羊的最后一道“工序”是胚胎移植。 答案:(1)無 PCR 引物 (2)基因表達載體 鑒別受體細胞中是否含有目的基因 (3)堿基互補配對 (4)受精卵 胚胎移植 6.科學家通過利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因,提高了光合作用過程中Rubisco酶對CO2的親和力,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題: (1)PCR過程所依據(jù)的原理是_______;擴增過程需要加入________________________酶。 (2)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,其作用是___________________________。目的基因能在不同生物體內(nèi)正常表達原來的蛋白質(zhì),說明整個生物界______________________。PCR定點突變技術屬于________________的范疇。 (3)可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達載體。常用________________將基因表達載體導入植物細胞,還需用到植物細胞工程中的________________________技術,來最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。 解析:(1)PCR依據(jù)的原理是DNA雙鏈復制;擴增過程需要加入耐高溫的DNA聚合(或TaqDNA聚合)酶。(2)啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合部位,可驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;因生物界共用一套遺傳密碼,所以目的基因可以在不同細胞內(nèi)表達合成相同蛋白質(zhì)。(3)常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達載體導入植物細胞,借助于植物組織培養(yǎng)技術,獲得轉(zhuǎn)基因植物。 答案:(1)DNA雙鏈復制 耐高溫的DNA聚合(或TaqDNA聚合) (2)RNA聚合酶識別和結(jié)合部位,可驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA 共用一套密碼子 蛋白質(zhì)工程 (3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng)- 配套講稿:
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