2019年春高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3.doc
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動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1. 掌握動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)?!?.理解單克隆抗體技術(shù)。(重、難點(diǎn)) 3.了解動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用。(重點(diǎn)) 一、動(dòng)物細(xì)胞融合(閱讀教材P52) 概念 是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,也稱細(xì)胞雜交 原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 結(jié)果 形成雜交細(xì)胞 誘導(dǎo)因素 ①聚乙二醇(PEG)、②滅活的病毒、③電激等 應(yīng)用 ①成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段;②制備單克隆抗體 意義 克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性 二、單克隆抗體(閱讀教材P52~P54) .傳統(tǒng)抗體的獲得 (1)方法:①向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動(dòng)物產(chǎn)生抗體;②從動(dòng)物血清中分離所需抗體。 (2)缺陷:產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 2.單克隆抗體的制備過(guò)程 .單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用 (1)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量高。 (2)應(yīng)用 ①作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 ②用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 判一判 (1)(2018曲阜高二檢測(cè))細(xì)胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比,其優(yōu)越性在于能定向地改造生物的性狀。() (2)(2018南京師大附中高二期中)制備單克隆抗體時(shí),要選用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞。(√) (3)(2018南京師大附中高二期中)B淋巴細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體,而漿細(xì)胞能產(chǎn)生抗體。(√) (4)動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。() (5)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是相同的。() 動(dòng)物細(xì)胞融合 結(jié)合下面動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程,探究下列問題: (1)融合過(guò)程:細(xì)胞膜融合→細(xì)胞質(zhì)融合→細(xì)胞核融合。 (2)細(xì)胞膜融合的過(guò)程體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。 (3)融合后重組細(xì)胞的特點(diǎn):融合形成的雜種細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的遺傳信息,通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),雜種細(xì)胞表現(xiàn)出兩個(gè)親本細(xì)胞的特點(diǎn)。 植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合 原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 步驟 酶解法去掉細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,形成雜種體細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)形成雜種植株 分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合 誘導(dǎo)方法 物理方法、化學(xué)方法 物理方法、化學(xué)方法、滅活病毒 結(jié)果 形成雜種植株 形成雜種細(xì)胞 1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是( ) A.動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程 B.動(dòng)物細(xì)胞融合需要用纖維素酶處理 C.動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要人工誘導(dǎo) D.誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的方法有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激等 答案:B 2.下列對(duì)植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,描述正確的是 ( ) A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B.只有植物體細(xì)胞雜交可跨越種屬間的生殖隔離,突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 C.利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為生產(chǎn)單克隆抗體開辟了新途徑 D.目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交,得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物,并使它們的性狀全部得以體現(xiàn) 解析:選C。動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法有生物方法,如用滅活的病毒,而植物原生質(zhì)體融合沒有生物方法;兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交,得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物,并不一定使它們的性狀都能得以體現(xiàn),這是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。 生物工程技術(shù)產(chǎn)生后代個(gè)體的遺傳物質(zhì)或基因來(lái)源 (1)轉(zhuǎn)基因生物:目的基因來(lái)自外源生物,絕大多數(shù)基因來(lái)自兩個(gè)親本。 (2)雜種植株:遺傳物質(zhì)來(lái)自融合的兩個(gè)親本細(xì)胞。 (3)經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)獲得的動(dòng)物細(xì)胞:遺傳物質(zhì)只來(lái)自一個(gè)親本。 (4)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞:遺傳物質(zhì)來(lái)自融合的兩個(gè)親本細(xì)胞。 (5)克隆動(dòng)物:細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體動(dòng)物,細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物個(gè)體。 單克隆抗體 結(jié)合下圖探究制備單克隆抗體的流程。 (1)第一步:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原蛋白,然后從小鼠體內(nèi)獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞;該細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體。 (2)第二步:用電激法、聚乙二醇法、滅活的病毒法等,誘導(dǎo)兩種細(xì)胞發(fā)生融合,這時(shí)得到的融合細(xì)胞除了雜交瘤細(xì)胞,還有B淋巴細(xì)胞相互融合的細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞相互融合的細(xì)胞。 (3)第三步:用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。然后再?gòu)碾s交瘤細(xì)胞群中選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。這時(shí)的雜交瘤細(xì)胞既能分泌抗體又能大量增殖。 (4)第四步:克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。 (5)第五步:將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取單克隆抗體。 (1)融合后的細(xì)胞,在培養(yǎng)時(shí)通過(guò)什么方式進(jìn)行繁殖?細(xì)胞中染色體數(shù)目與淋巴細(xì)胞相比有何不同? 提示:有絲分裂。融合后細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。 (2)篩選過(guò)程中對(duì)細(xì)胞克隆培養(yǎng)時(shí),在特定培養(yǎng)基上使每個(gè)孔一個(gè)細(xì)胞的目的是什么? 提示:使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞,達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的(或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度)。 1.植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體制備的比較 比較項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交(番茄—馬鈴薯植株) 單克隆抗體制備 第1步 原生質(zhì)體的制備(酶解法) 正常小鼠的處理(注射滅活抗原) 第2步 原生質(zhì)體的融合(物、化法) 動(dòng)物細(xì)胞融合(物、化、生法) 第3步 雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 第4步 雜種植株鑒定 提純單克隆抗體(特異性強(qiáng)、靈敏度高) 融合前處理 酶解法除去細(xì)胞壁:纖維素酶、果膠酶 注射特定抗原,免疫處理正常小鼠 意義和用途 ①克服有性遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙; ②培育作物新品種 ①制備單克隆抗體; ②有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防 2.漿細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的比較 細(xì)胞類型 來(lái)源 特點(diǎn) 漿細(xì)胞 由B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后增殖分化而來(lái) 能產(chǎn)生單一抗體,但不能無(wú)限增殖 骨髓瘤細(xì)胞 從骨髓腫瘤中提取 能無(wú)限增殖,但不能產(chǎn)生抗體 雜交瘤細(xì)胞 漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成 既能產(chǎn)生抗體,又能無(wú)限增殖 3.兩次篩選的比較 第一次篩選:由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,因此細(xì)胞混合物中融合細(xì)胞將以多種形式出現(xiàn),因此必須從中篩選出既能分泌抗體,同時(shí)又能大量增殖的雜交瘤細(xì)胞。 第二次篩選:從雜交瘤細(xì)胞群中選出能產(chǎn)生專一抗體的特異性雜交瘤細(xì)胞。 交匯點(diǎn) 免疫調(diào)節(jié) (1)免疫類型:人體的免疫分為________和特異性免疫;特異性免疫又包括__________和__________。 (2)免疫過(guò)程 ①體液免疫:B淋巴細(xì)胞接受抗原刺激后增殖、分化,大部分分化為__________細(xì)胞,產(chǎn)生抗體,小部分分化為__________細(xì)胞。 ②細(xì)胞免疫:T細(xì)胞接受抗原刺激后,分化形成__________,然后與被抗原入侵的__________細(xì)胞密切接觸,使其裂解死亡。 答案:(1)非特異性免疫 體液免疫 細(xì)胞免疫 (2)①漿 記憶 ②效應(yīng)T細(xì)胞 宿主 1.關(guān)于應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下,其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述不正確的是( ) ①將X抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞?、趶幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞?、劾么偌?xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合?、軐㈦s交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔中培養(yǎng) ⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞?、迯母顾刑崛】贵w A.實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥ B.④過(guò)程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程也屬于克隆 C.③過(guò)程中獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖 D.③到⑤過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選 解析:選C。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合后,B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞不能無(wú)限增殖。 2.對(duì)于下面制備單克隆抗體過(guò)程示意圖的敘述,不正確的是( ) A.圖中有1處明顯錯(cuò)誤 B.②中兩兩融合的細(xì)胞有3種,篩選保留了1種 C.③中雜交瘤細(xì)胞均能產(chǎn)生抗體 D.⑤可以無(wú)限增殖并分泌相應(yīng)抗體 解析:選C。圖中的錯(cuò)誤是用于提取B淋巴細(xì)胞的小鼠沒有經(jīng)過(guò)免疫,A正確;②為第一次篩選,目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞,B正確;③雜交瘤細(xì)胞是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的,但由脾臟中提取的B淋巴細(xì)胞包括非免疫的B淋巴細(xì)胞和已免疫的漿細(xì)胞,因此,③雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生抗體,C錯(cuò)誤;⑤是經(jīng)過(guò)兩次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞群,具有無(wú)限增殖和分泌相應(yīng)抗體的特點(diǎn),D正確。 核心知識(shí)小結(jié) [要點(diǎn)回眸] [答題必備] 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。 動(dòng)物細(xì)胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。 雜交瘤細(xì)胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而成的,具有既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的能力。 單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高,并能大量制備。 單克隆抗體的主要用途有:作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 [隨堂檢測(cè)] 1.動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中,最重要的是( ) A.克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜交細(xì)胞 解析:選B。植物體細(xì)胞雜交主要是為了克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙,以培育新品種。另外,植物體細(xì)胞雜交還應(yīng)用了植物細(xì)胞的全能性。動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制,目前只見到高度分化的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中表現(xiàn)全能性,還未見到融合細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子,因此動(dòng)物細(xì)胞融合不能用來(lái)培育新的物種。生產(chǎn)雜交細(xì)胞,也不是動(dòng)物細(xì)胞融合的主要目的。 2.(2018太原外國(guó)語(yǔ)學(xué)校高二月考)將源自同品系小鼠的癌細(xì)胞和正常成纖維細(xì)胞融合,所獲雜種細(xì)胞的后代只要保留成纖維細(xì)胞的某些染色體就可表現(xiàn)為正常表型,但若這些染色體丟失則會(huì)重新惡變?yōu)榘┘?xì)胞。下列敘述不正確的是( ) A.雜種細(xì)胞的后代保留的成纖維細(xì)胞的某些染色體上有抑制細(xì)胞惡性增殖的基因 B.利用滅活病毒可以誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合 C.雜種細(xì)胞重新惡變后將失去接觸抑制現(xiàn)象 D.染色體數(shù)目的變異會(huì)抑制細(xì)胞的癌變 答案:D 3.(2018上海寶山高二模擬)如圖是兩種生物細(xì)胞融合技術(shù)的示意圖,下列關(guān)于該圖的敘述中,正確的是( ) A.a(chǎn)過(guò)程必須除去細(xì)胞壁;b過(guò)程需要通過(guò)細(xì)胞識(shí)別 B.如果圖中表示的是動(dòng)物細(xì)胞融合或植物體細(xì)胞雜交,X均能形成雜種個(gè)體 C.若X是蘋果梨幼苗,則c過(guò)程是細(xì)胞分裂、分化的過(guò)程 D.細(xì)胞融合技術(shù)的缺點(diǎn)是不能克服遠(yuǎn)緣不親和性 答案:C 4.(2018常州高二檢測(cè))核苷酸合成有兩個(gè)途徑,物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如下圖)。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶,制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?,F(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”來(lái)篩選特定的雜交瘤細(xì)胞。關(guān)于篩選原理的敘述,正確的是( ) A.免疫的B細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖 B.骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因無(wú)法進(jìn)行上述兩個(gè)途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖 C.雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行上述兩個(gè)途徑,所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖 D.HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體 解析:選B。免疫的B細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞均屬于成熟細(xì)胞,不能增殖,A錯(cuò);骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞缺乏轉(zhuǎn)化酶,又因HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑,所以在HAT培養(yǎng)基上不能增殖,B正確;雜交瘤細(xì)胞因?yàn)榭梢赃M(jìn)行補(bǔ)救合成途徑,能夠在HAT培養(yǎng)基上大量增殖,C錯(cuò);HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞能大量增殖,也能產(chǎn)生抗體,但不一定產(chǎn)生目標(biāo)抗體,D錯(cuò)。 5.用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成,一是“瞄準(zhǔn)裝置”,二是殺傷性“彈頭”,下列對(duì)此描述不正確的是( ) A.“瞄準(zhǔn)裝置”是由識(shí)別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成的 B.“彈頭”是由放射性同位素、化學(xué)藥物和細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成的 C.“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細(xì)胞的功能 D.“生物導(dǎo)彈”是利用細(xì)胞工程制備出來(lái)的 解析:選C?!皬楊^”中的藥物不具有選擇性。“生物導(dǎo)彈”中的“瞄準(zhǔn)裝置”是由專一識(shí)別特定腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體構(gòu)成的;“彈頭”是由殺死腫瘤細(xì)胞的放射性同位素、化學(xué)藥物和細(xì)胞毒素等物質(zhì)構(gòu)成的;“生物導(dǎo)彈”是利用動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等細(xì)胞工程技術(shù)制備出來(lái)的。 6.(2018江西臨川二中期末)如圖為動(dòng)物細(xì)胞融合示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答: (1)圖中滅活的仙臺(tái)病毒的作用是____________________________________。 (2)若僅考慮兩兩融合,則A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后共有___________________三種類型。 (3)由雜種細(xì)胞形成無(wú)性系1、2、3的方法,可以稱為________________________。 (4)此項(xiàng)技術(shù)最重要的應(yīng)用是____________________________________。 解析:(1)誘導(dǎo)細(xì)胞融合需要有促融劑,比如聚乙二醇、滅活的仙臺(tái)病毒等。(2)若僅考慮兩兩融合,則A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后共有A—A、A—B、B—B三種類型。(3)無(wú)性繁殖可以稱之為克隆。(4)細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是制備單克隆抗體。 答案:(1)促進(jìn)細(xì)胞融合(作為促融劑) (2)A—A、A—B、B—B (3)克隆 (4)制備單克隆抗體 7.(2018天津河?xùn)|區(qū)一模)下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖,沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥,可抑制DNA和RNA的合成,對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。(注:堿性磷酸酶廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎等組織器官中) (1)制備單克隆抗體需要篩選,第二次篩選時(shí),雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行__________________,最終篩選出________________________。 (2)活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的__________________和________________過(guò)程。 (3)在此治療中,正確的方法是注射________________________。與傳統(tǒng)的化療相比,此治療方法的優(yōu)點(diǎn)是____________________________________。 答案:(1)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè) 產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 (2)DNA的復(fù)制 轉(zhuǎn)錄 (3)阿霉素和單克隆抗體 (4)特異性強(qiáng),能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害 [課時(shí)作業(yè)] 一、選擇題 1.(2018徐州高二檢測(cè))基因型為Aa與基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞,用滅活的病毒處理后,不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞( ) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb 解析:選C。誘導(dǎo)融合處理后可能會(huì)出現(xiàn)3種兩兩融合的細(xì)胞,即同種細(xì)胞相互融合,基因型為AAaa和BBbb;不同種細(xì)胞相互融合,融合后的雜交細(xì)胞基因型為AaBb,C項(xiàng)基因型細(xì)胞不可能出現(xiàn)。 2.與植物體細(xì)胞雜交相比,動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是( ) A.細(xì)胞膜的流動(dòng)性、離心 B.細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活的病毒 C.細(xì)胞的全能性、電激 D.細(xì)胞的全能性、滅活的病毒 解析:選B。植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性,動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)因子有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等,其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子,而聚乙二醇、電激均可用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交。 3.(2018陜西黃陵中學(xué)高二月考)制備單克隆抗體時(shí)用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,通過(guò)培養(yǎng),形成細(xì)胞群。此過(guò)程中的細(xì)胞內(nèi)部變化一定不涉及( ) A.RNA聚合酶與結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合 B.堿基互補(bǔ)配對(duì) C.同源染色體配對(duì) D.脫水縮合 答案:C 4.用a表示骨髓瘤細(xì)胞,b表示B淋巴細(xì)胞,則單克隆抗體制備過(guò)程中兩次篩選的目的分別為( ) A.從a、aa、ab、bb、b中篩選出a、aa、ab;從a、aa、ab中篩選出ab B.從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab、bb、b;從ab、bb、b中篩選出ab C.從a、aa、ab、bb、b中篩選出ab;從ab中篩選出能產(chǎn)生特定抗體的ab D.從a、aa、ab、bb、b中篩選出aa;從aa中篩選出能大量增殖的aa 解析:選C。第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基選出雜交瘤細(xì)胞,即ab;第二次篩選是通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)選出能產(chǎn)生特異性抗體的ab。 5.(2018棲霞二中高二檢測(cè))下圖中的供體DNA中含有無(wú)限增殖調(diào)控基因,該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞的分裂,圖示是利用該基因制備新型單克隆抗體的過(guò)程,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A.經(jīng)酶A處理后Ⅰ與質(zhì)粒具有相同的黏性末端 B.Ⅱ是已免疫的B淋巴細(xì)胞 C.Ⅲ既能無(wú)限增殖又能分泌特異性抗體 D.Ⅱ→Ⅲ過(guò)程中的檢測(cè)篩選的目的是得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞 答案:D 6.(2018棲霞二中高二檢測(cè))下列在現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中,不需要進(jìn)行檢測(cè)與篩選的是( ) A.對(duì)植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗 B.將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,制備單克隆抗體 C.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育“蘿卜—甘藍(lán)” D.將抗蟲基因?qū)胫参锛?xì)胞,培育具有抗蟲特性的新植株 答案:A 7.單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和德國(guó)科學(xué)家科勒設(shè)計(jì)了一個(gè)用已免疫的B淋巴細(xì)胞制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn),如圖為其實(shí)驗(yàn)流程圖。下列相關(guān)的敘述不正確的是( ) A.a(chǎn)是骨髓瘤細(xì)胞,②表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng) B.制備單克隆抗體時(shí),選擇B淋巴細(xì)胞的原因是它能分泌多種特異性抗體 C.④過(guò)程如在體外培養(yǎng),則需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,營(yíng)養(yǎng)充足,溫度、pH適宜等環(huán)境條件 D.誘導(dǎo)動(dòng)物、植物細(xì)胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇 解析:選B。對(duì)于B淋巴細(xì)胞來(lái)說(shuō),每一種B淋巴細(xì)胞經(jīng)特定抗原刺激后只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷:a是骨髓瘤細(xì)胞,b是雜交瘤細(xì)胞。①是誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程。②表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),篩選出雜交瘤細(xì)胞。③表示篩選出能專一性產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。④包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)兩種方法。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖,其他細(xì)胞不能生存。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要具備的條件是:無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,營(yíng)養(yǎng)充足,溫度、pH適宜,充足的空氣等。誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。 8.對(duì)于下面制備單克隆抗體過(guò)程的示意圖,敘述不正確的是( ) A.①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B.④中的篩選是通過(guò)抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的 C.②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D.⑤是可以無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞 解析:選A。單克隆抗體是B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,B淋巴細(xì)胞也可以從血漿中提取。細(xì)胞融合時(shí),使用的化學(xué)方法是用聚乙二醇誘導(dǎo);④中的篩選是通過(guò)抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的,如果有反應(yīng)說(shuō)明表達(dá)了抗體;融合細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn),既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。 9.(2018蕪湖高二檢測(cè))將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”,能夠用于殺死人類某些癌細(xì)胞。其過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A.①過(guò)程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同 B.經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無(wú)限增殖并產(chǎn)生特定抗體 C.②過(guò)程需要篩選并克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞 D.抗體的靶向作用使③過(guò)程具有高度特異性 解析:選B。①過(guò)程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,都是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,A正確。經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞不一定都能產(chǎn)生特定抗體,需要經(jīng)過(guò)抗體陽(yáng)性檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,B錯(cuò)誤。②過(guò)程需要采用抗體陽(yáng)性檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,然后進(jìn)行克隆化培養(yǎng)(包括體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)),C正確??贵w的靶向作用使③過(guò)程具有高度特異性,D正確。 10.(2018上海松江區(qū)第二次模擬)如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程,下列有關(guān)敘述不正確的是( ) A.圖中給實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙 C.用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙進(jìn)行篩選,融合細(xì)胞均能生長(zhǎng),未融合細(xì)胞均不能生長(zhǎng) D.對(duì)丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁 答案:C 二、非選擇題 11.(2018河南南陽(yáng)六校高二期末)細(xì)胞的融合技術(shù)有著廣泛的應(yīng)用:有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進(jìn)行受精作用,植物體細(xì)胞雜交要進(jìn)行原生質(zhì)體的融合,單克隆抗體的制備需進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合。下列為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問題: (1)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是__________,若進(jìn)行有性雜交,精子和卵子的結(jié)合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的______________功能。 (2)a、b分別表示兩種二倍體植物的體細(xì)胞,若a植物細(xì)胞內(nèi)含有m個(gè)染色體,b植物細(xì)胞內(nèi)含有n個(gè)染色體,則d細(xì)胞內(nèi)含有__________個(gè)染色體,d細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:________________。若對(duì)a和b采用雜交育種成功的話,得到的后代應(yīng)含有___________個(gè)染色體,若要得到可育的后代,常采用____________________處理幼苗。這兩種方法相比,體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是______________________。 答案:(1)細(xì)胞膜的流動(dòng)性 信息交流 (2)m+n 雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁 (m+n)/2 秋水仙素 克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 12.(2018菏澤一中宏志班檢測(cè))下圖是通過(guò)動(dòng)物纖維母細(xì)胞等獲得單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題: (1)過(guò)程①類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的________過(guò)程,過(guò)程②的實(shí)質(zhì)是__________。 (2)A代表________________物質(zhì),Y、Z細(xì)胞的名稱分別是___________、__________。 (3)過(guò)程③誘導(dǎo)細(xì)胞融合的生物因素是____________,細(xì)胞融合后還需要用____________培養(yǎng)基篩選獲得Z細(xì)胞。 (4)Z細(xì)胞還需經(jīng)過(guò)____________和______________才能獲得大量產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞。 (5)經(jīng)過(guò)上述過(guò)程獲得的單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是____________________。 答案:(1)脫分化 基因的選擇性表達(dá) (2)抗原(特定抗原) B淋巴細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 (3)滅活的病毒 選擇 (4)克隆化培養(yǎng) 抗體檢測(cè)(專一性抗體陽(yáng)性檢測(cè)) (5)特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備 13.(2018廣東汕頭檢測(cè))新型的微生物蛋白農(nóng)藥是由微生物產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)藥物,能夠激活農(nóng)作物的防御系統(tǒng),提高農(nóng)作物抗病抗蟲的能力??蒲腥藛T在某個(gè)真菌菌株上發(fā)現(xiàn)了激活蛋白AP45,并進(jìn)行了相關(guān)研究(見下圖)。請(qǐng)回答下列問題: (1)圖中的①是__________________________;②是_________________________。 (2)所設(shè)計(jì)的引物對(duì),應(yīng)與____________能互補(bǔ)配對(duì),但在__________________之間不應(yīng)有能互補(bǔ)配對(duì)的核苷酸序列。 (3)據(jù)圖分析,該實(shí)驗(yàn)以____________基因作為標(biāo)記基因。 (4)如果要利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá),則需要以____________為抗原、制備出其單克隆抗體。 (5)以此類激活蛋白制成的微生物蛋白農(nóng)藥并不會(huì)直接殺死害蟲或者病原生物,是一種環(huán)境友好型的產(chǎn)品,具有____________________________等優(yōu)點(diǎn)(要求一項(xiàng))。 答案:(1)RNA(或mRNA) 構(gòu)建目的基因表達(dá)載體 (2)目的基因(或cDNA) 兩種引物(或引物自身的不同片段或引物與非目的基因,要求一項(xiàng)) (3)青霉素抗性 (4)激活蛋白AP45(或目的蛋白) (5)不引起害蟲或病原生物的抗藥性(或易分解無(wú)殘留或?qū)θ诵鬅o(wú)害或其他合理答案) 14.(2018廣西桂林、賀州期末聯(lián)考)雙功能抗體就是雙特異性抗體,是一種非天然性抗體,結(jié)合抗原的兩個(gè)臂具有不同的特異性,可以通過(guò)生物學(xué)方法制備。1983年Milstein等人將能分泌目的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞(稱之為A細(xì)胞)與分泌另一種抗體的脾細(xì)胞(即B細(xì)胞)融合,形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜交瘤細(xì)胞(A—B細(xì)胞),得到可預(yù)先設(shè)定的特異性的雙功能抗體。 (1)Milstein等利用A細(xì)胞和B細(xì)胞制備雙功能抗體的過(guò)程中,使用了哪些動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)手段____________和____________(寫出兩種)。在這個(gè)過(guò)程中,若融合最多考慮兩兩融合,總共應(yīng)該有________種細(xì)胞存在,請(qǐng)參照題干表示方法用A、B字母表示這些細(xì)胞的具體類型____________________________________________。 (2)雙功能抗體在癌癥治療中的作用類似于“生物導(dǎo)彈”,借助于雙功能抗體一條臂與癌細(xì)胞表面抗原____________,同時(shí)另一條臂將T細(xì)胞和NK細(xì)胞等殺傷細(xì)胞定向帶到癌細(xì)胞所在位置。在生物體內(nèi)T細(xì)胞攻擊癌細(xì)胞屬于____________免疫。 (3)生物學(xué)方法制備雙功能抗體的缺點(diǎn)之一為,不能對(duì)雙功能抗體進(jìn)行改造,限制了它的臨床應(yīng)用。使用____________(工程技術(shù)),可以對(duì)雙功能抗體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,使其更加符合人類的需要,這種改造最終還必須通過(guò)對(duì)____________分子的改造來(lái)完成。 答案:(1)動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 5 A—A,A—B,B—B,A,B (2)特異性結(jié)合 細(xì)胞 (3)蛋白質(zhì)工程 DNA- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問題本站不予受理。
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- 2019年春高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體學(xué)案 新人教版選修3 2019 高中生物 專題 細(xì)胞 工程 動(dòng)物 細(xì)胞融合 單克隆抗體 新人 選修
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